外周血造血干細胞采集治療下肢動脈栓塞癥進展

趙楠 吳南

(內蒙古血液中心 呼和浩特 010070)

隨著醫學的發展,以及對造血干細胞的研究和臨床移植應用的進展,造血干細胞采集與移植應用不斷增加,應用范圍也在不斷拓寬,取得的臨床治療效果得以肯定,并且外周血造血干細胞采集技術的日趨成熟與簡捷,給很多病人帶來了重生的希望。

1 造血干細胞采集與移植分類

造血干細胞是各種血細胞與免疫細胞的起源細胞,可以增殖分化成為各種淋巴細胞、紅細胞、血小板及白細胞等,并且造血干細胞具有不斷自我更新與多向分化增殖能力,造血干細胞在體內形成干細胞池,其自我更新與多向分化之間保持動態平衡,致使造血干細胞數量相對穩定。

目前造血干細胞采集與移植分為骨髓移植(BMT)、外周血造血干細胞移植(PBSCT)和臍血造血干細胞移植,根據供者不同又分為自體和異體造血干細胞采集與移植,其中異體和自體外周血造血干細胞采集最容易被捐獻者接受,是目前國內外應用最多的一種采集與移植方式。我國1995年底首例異基因外周血造血干細胞采集與移植,并獲得成功。外周血造血干細胞移植與骨髓移植相比,具有采集方便、捐獻者容易接受、造血恢復快、可短期進行多次采集等優點,因此得到了快速的發展。我國規定,凡年齡在18～45周歲,身體健康,經血液檢查ALT≤25單位,H B s A g陰性,抗-H C V陰性,抗-H I V陰性,梅毒試驗陰性者都可成為異體造血干細胞捐獻者。正常情況下,人體內的造血干細胞具有很強的再生能力,造血干細胞采集后1～2周供者體內的血細胞可恢復到原來水平。與異體B M T、異體P B S C T相比,自體MBT和自體P B S C T不需要額外供者,無移植物排斥反應,移植相關死亡率低,對患者年齡也較異體移植寬;此外,我國白血病發病率為2.76/10萬,其中以兒童和35歲以下人居多,但由于我國捐獻造血干細胞人數不多,獨生子女沒有親兄弟姐妹(一般來講,親兄弟姐妹中有25%HLA基因完全相同,可選擇供者),所以給異體造血干細胞采集與移植帶來了不便。因此自體造血干細胞采集與移植成為國內外廣泛研究的課題。

目前,對于血站來講,外周血造血干細胞采集所用的設備主要是百特CS-3000血細胞分離機。

2 外周血造血干細胞的特性

大量的臨床實驗研究證明,與骨髓造血干細胞相比,外周血造血干細胞移植后,重建免疫功能早,淋巴細胞計數、T、B細胞計數、血清中IgM、IgA水平,淋巴細胞對ConA刺激后的反應等指標比骨髓移植恢復的快,外周血造血干細胞對輻射敏感性低,在受體內植入率高。學者Scott等研究發現,PBSCT和BMT即使輸入相同數量的CFU-GM,PBSCT的造血恢復速度明顯優于BMT。此外有的學者提出PBSCT早期恢復造血的原因還有:在PBSC中含有大量的造血輔助細胞,對移植后造血重建有一定支持作用;PBSC中干細胞對BM基質細胞的負調控效應不敏感;PBSC干細胞在增值中的系列偏倚特性,使其產生更多的CFU-GM,從而加快了造血的恢復。

在正常生理條件下,外周血造血干細胞數量比骨髓少的多,難以滿足造血干細胞移植的需要,但它容易受多種因素的影響而起伏很大,表現較強的機動性,從而為采集外周血造血干細胞提供了有利條件。迄今發現影響外周血造血干細胞和祖細胞數量的因素有。

2.1 造血干細胞動員劑

包括聚陰離子化合物、抗癌細胞毒劑、腎上腺皮質激素、生物制劑,如粒細胞集落刺激因子等,可使外周血造血干細胞增加20～30倍,以滿足采集和移植需要。

作為動員劑應具備以下條件:動員效果好,提高外周血中干細胞倍數高,動員出的造血干細胞有重建造血的功能,毒、副作用小,動員作用應持續數小時以上,便于采集分離。

2.2 失血

血液采集后的失血狀態,可反饋性引起粒細胞集落刺激因子增加,從而可刺激骨髓中造血干細胞大量向外周血移動。

2.3 晝夜變化

一般1d內外周血中粒細胞集落刺激因子數量呈時相性變化,上午9點最高峰,下午3點至夜間3點最低,其數量分別為1d平均值的150%和65%。此外,采集前體育運動也可增加外周血造血干細胞和祖細胞的數量。

3 外周血造血干細胞移植治療下肢動脈栓塞癥應用

外周血造血干細胞移植已廣泛應用于臨床,不但能夠治療白血病、淋巴瘤,各種癌癥、免疫性疾病和遺傳性疾病。而且在治療下肢動脈栓塞癥有一定療效。

筆者于2007年至2008年與內蒙古醫院心血管科合作開展外周血造血干細胞采集與移植19例(其中自體外周血造血干細胞移植18例,異體外周血造血干細胞移植1例)用于治療下肢動脈栓塞導致的下肢壞死癥,取得了一定的療效。使瀕于截肢的患者找到了非手術治療的明顯效果。接受自體外周血造血干細胞采集和移植的患者年齡60～80歲,均有糖尿病史;移植前癥狀19例患者單下肢或雙下肢均明顯因缺血出現壞死,疼痛劇烈,經采集的外周血造血干細胞沿下肢動脈走向多點皮下注射,3d后多數患者疼痛明顯減輕或消失,2周后下肢壞死變黑的皮膚出現血液供應跡象,1個月后皮膚變紅,免除了截肢。干細胞主要存在于骨髓造血中樞,在外周血中含量很少。造血干細胞含有能分化成內皮祖細胞的(EPC)幼稚細胞,已證實:在體外,骨髓細胞CD34+細胞的某一亞群能分化成血管內皮細胞;在體內,能被誘導形成小血管的內表面;而且造血干細胞能分泌堿性成纖維細胞生長因子。動物實驗證實,將骨髓單個核細胞植入梗死肢體后可促進局部的血管形成,并肯定了植入的內皮祖細胞參與了新的毛細血管的生成。因此,造血干細胞可能是促進局部缺血部位血管生成的高效物質。應用人類自體骨髓、PBSC和EPC治療缺血性下肢血管病成為一種嶄新的療法治療機理可能是外周血造血干細胞可誘發或具有血管再造功能。骨髓干細胞移植也有細胞來源不受限制,新生組織細胞和毛細血管可以實現功能上的融合等特點,為臨床治療栓塞性疾病提供了一條除介入、血管旁路移植以外的另一條新的非創傷性治療途徑。

總之,隨著臨床治療方法不斷延伸與發展,外周血造血干細胞移植應用越來越受到重視,治療效果也更加明顯。

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