高效液相色譜法測定氨咖黃敏膠囊的含量

(亞寶藥業太原制藥有限公司，山西 太原 030032)

氨咖黃敏膠囊是治療感冒的非處方藥，屬于國家基本藥物，國家標準采用滴定法檢測其對乙酰氨基酚、咖啡因含量，操作煩瑣，影響因素多。筆者采用高效液相色譜(HPLC)法同時測定產品中2種組分的含量，方法簡便、準確，現報道如下。

1 儀器與試藥

島津LC-2010型高效液相色譜儀;島津UV-2550型紫外可見分光光度計。對乙酰氨基酚對照品、咖啡因對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號分別為100018-200408，171215-200406);氨咖黃敏膠囊(亞寶藥業太原制藥有限公司，批號為091109);甲醇為色譜純，其他試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱:AgilentC18柱(250 mm ×4.6 mm，0.5 μm);流動相:1%醋酸溶液(用乙二胺調pH至3.7)-甲醇(60∶40);流速:1.0 mL/min;檢測波長:272 nm[1-2];柱溫:30℃。

2.2 溶液制備

分別精密稱取對乙酰氨基酚對照品0.310 3 g、咖啡因對照品37.41 mg，分別置50 mL量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。再分別精密量取對乙酰氨基酚對照品貯備液2 mL、咖啡因對照品貯備液1 mL，置同一100 mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。取本品0.24 g，精密稱定，置50 mL量瓶中，加流動相適量，振搖溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2.0 mL，置25 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm的微孔濾膜濾過，即得供試品溶液。按照處方比例制備不含對乙酰氨基酚、咖啡因的陰性樣品，同供試品溶液的制備方法制備，即得陰性對照品溶液。

2.3 方法學考察

專屬性試驗:分別取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件進行測定。結果陰性對照品溶液色譜中，在與對乙酰氨基酚、咖啡因色譜峰相同的保留時間處無干擾峰出現，說明處方中其他成分對測定結果無影響。色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察:分別精密量取對乙酰氨基酚對照品貯備液(含對乙酰氨基酚1.222 g/L)、咖啡因對照品貯備液(含咖啡因 74.82 μg/mL)1.0，5.0，10.0，15.0，20.0，25.0 mL，置同一100 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。精密量取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積。以峰面積為縱坐標、進樣量為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程，對乙酰氨基酚為 Y=1484746.01X-1091.71，r=1.0000;咖啡因為 Y=3564619.60 X-961.56，r=1.000 0。結果表明對乙酰氨基酚和咖啡因進樣量分別在0.122 2～3.055 5 μg和 0.007 482 ～0.187 1 μg 范圍內與峰面積積分值線性關系良好。

精密度試驗:取同一對照品溶液10 μL，連續進樣5次，記錄峰面積。結果對乙酰氨基酚和咖啡因 RSD分別為0.34%，0.20%(n=5)，表明進樣精密度良好。

重復性試驗:取同一批(批號為091109)樣品6份，依法制備供試品溶液并測定。結果對乙酰氨基酚平均含量為160.85 mg/g(RSD=0.06%)，咖啡因平均含量為 9.499 mg/g(RSD=0.70%)，表明方法重復性良好。

穩定性試驗:取同一供試品溶液，分別在 0，2，4，5，6 h 時測定峰面積。結果對乙酰氨基酚 RSD=0.24%(n=5)，咖啡因 RSD=0.09%(n=5)，表明供試品溶液在6 h內穩定性良好。

加樣回收試驗:分別精密稱取已知含量的樣品(批號為091109)0.120 g，共6份，精密稱定，分別置50 mL量瓶中，再分別精密加入對照品溶液(含對乙酰氨基酚 40.54 μg/mL，咖啡因 2.368 μg/mL)0.8，1.0，1.2 mL，每個質量濃度 3 份，按供試品溶液制備方法制備溶液并測定，結果見表1。

表1 加樣回收試驗結果(n=9)

2.4 樣品含量測定

精密稱取樣品，按2.2項下方法制備供試品溶液，按外標法計算含量。結果見表2。

表2 樣品含量測定結果

3 討論

以上結果表明，采用高效液相色譜法測定本品的含量，專屬性強、準確、快速、簡便。為了保證結果的準確性，更好控制藥品質量，保證患者用藥安全，建議對國家標準中本品的含量測定方法進行改進。

[1]WS-10001-(HD-1021)-2002，國家藥品標準·化學藥品地標升國標(第 16 冊)[S].

[2]楊學軍.HPLC法同時測定阿咖酚膠囊中三種成份的含量[J].中國藥品標準，2009，10(5):369-371.