無錫地區人乳頭狀瘤病毒感染狀況及基因型分析

穆會君，張 濱，謝 平

(南京醫科大學附屬無錫市人民醫院，江蘇無錫214023)

人乳頭狀瘤病毒(HPV)是一組在人類廣泛傳播的病毒，主要通過性和皮膚接觸傳染。目前已發現HPV有150種基因亞型，其中近40種能入侵人生殖器官，不同亞型的HPV對生殖器的致病性不同，而不同民族和不同地理區域，HPV感染的型別有很大差異［1］。2009年5月～2011年7月，我們對無錫市2 684例婦科患者和669例皮膚科患者被檢標本中出現的陽性結果進行分析，以了解無錫市HPV感染情況及其型別分布，為HPV的預防和治療提供依據。

1 資料與方法

選擇我院收治的婦科疑診HPV感染患者2 684例，其中住院患者210例，年齡21～86歲，門診患者2 474例，年齡17～80歲;皮膚科疑診HPV感染患者669例，其中男性368例，年齡1～87歲，女性301例，年齡1～73歲。儀器與試劑:HPV基因分型檢測試劑盒購于深圳亞能生物技術有限公司;基因擴增儀購自德國Eppendorf公司;FYY-3型分子雜交儀購自興化分析儀器廠。檢測方法:婦科患者采集宮頸口上皮細胞標本，皮膚科患者將疣體切下后放入0．5 ml離心管中，做好標識送檢。采用PCR-反向點雜交法檢測 HPV及其亞型，包括18種高危型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、MM4、83)和 5 種低危型(HPV6、11、42、43、44)。

2 結果

2．1 婦科

2．1．1 HPV亞型分布 2 684例樣本中檢出HPV陽性693例(25．82%)。共檢出21種HPV亞型，MM4和4型HPV未檢出。檢出單一HPV亞型者495例(71．43%)，兩種以上者 198 例(28．60%)。共檢出1 012株HPV，其中高危型占69．00%，其中HPV16、52、58、33、31、66、18 分別占 18．97%、9．59%、8．99%、5．73%、4．35%、4．25%、4．15%，低危型占31．00%，HPV11、43、6、42 分別占 13．04%、7．61%、5．73%、2．57%。

2．1．2 HPV感染情況及年齡分布 693例HPV陽性患者中檢出感染單一HPV亞型495例(71．43%)，雙重感染 144 例(20．78%)，三重感染36 例(5．19%)，四重感染14 例(2．02%)，五重以上感染 4例(0．58%);感染年齡≤20歲 34例(4．91%)，21～30 歲 273 例(39．39%)，31 ～40 歲235例(33．91%)，41～50歲 117例(16．88%)，＞50歲34例(4．91%)。

2．2 皮膚科

2．2．1 HPV亞型分布 669例樣本中檢出 HPV 630例(94．18%)，共檢出 20 種 HPV 亞型，MM4、4和39型HPV未檢出。共檢出933株HPV，其中高危型占 14．08%，高危型主要為 HPV16、18、66、52、58(6．65%、1．71%、1．39%、1．07%、1．07%)，低危型占 85．92%，低危型主要為 HPV6、11、42、43(41．59%、36．44%、3．00%、1．39%)。

2．2．2 HPV感染情況及年齡分布 630例HPV陽性患者中檢出感染單一HPV亞型420例(66．67%)，雙重感染 157 例(24．92%)，三重感染44 例(6．98%)，四重感染 7 例(1．11%)，五重以上感染 2例(0．32%);感染年齡≤20歲 53例(8．41%)，21～30 歲 255 例(40．48%)，31 ～40 歲172例(27．30%)，41～50歲89例(14．13%)，＞50歲61 例(9．68%)。

3 討論

HPV感染是導致宮頸癌和其他上皮樣癌的主要病因。HPV-DNA檢測不僅能明確相關疾病的致病因子，且有助于篩選有潛在致癌風險的患者。本研究使用PCR-反向點雜交法檢測患者HPV感染情況，該方法整合了PCR擴增和核酸雜交技術，可在一張膜上對同一例標本進行5種低危型和18種高危型HPV的檢測，具有通量高、特異性強等優點，既適用于HPV臨床分型檢測，也適用于HPV感染的大規模人群調查研究。

我國婦女HPV感染及型別分布情況各地報道不同［2～4］，李霓等［5］報道中國婦女 HPV 感染率為16．1%，HPV16、52、58 型是中國特有的優勢感染型別。本研究顯示，婦科HPV感染率為25．82%，明顯高于上述資料;693例HPV陽性例數中，共檢出1 012株HPV，其中高危型占到69．00%，與其類似，高危型前三位依次為HPV16、52、58，亦與其一致。檢出21個HPV亞型，71．43%為單一感染，28．60%為多重感染，多重感染高出上述資料約10個百分點。研究顯示，多重感染出現持續感染的危險性更大［6］，而HPV持續感染是宮頸病變發生的原因，因此，多重感染更易導致宮頸病變及宮頸癌的發生。對該類患者應積極治療并進行嚴密追蹤隨訪。本研究還顯示，皮膚科患者疣體標本中HPV感染陽性率高達94．18%，其中低危型占到85．92%，型別主要為HPV6、11，與文獻報道的HPV6、11型感染主要引起尖銳濕疣等良性病變一致［7］;高危型占14．08%，占前三位的型別為 HPV16、18、66，鑒于 HPV16、18的強致癌性，對這些患者應加強跟蹤治療。此外，皮膚科患者多重感染也更為常見，達到33．33%，值得關注。

從感染患者的年齡段來看，婦科與皮膚科患者感染高峰均集中在21～30歲，婦科與皮膚科分別占到39．39%、40．48%;其次是 31～40歲，分別占33．91%、27．30%，與文獻報道基本一致［8］，因此加強對該年齡段人群HPV的篩查更有利于HPV的防治。

綜上所述，無錫地區HPV感染率和多重感染率均較高，婦科與皮膚科患者感染的高危型HPV型別有很大差異，但HPV16型均是感染率最高的型別。對HPV行分型檢測可對患者進行個體化評估，預測宮頸和皮膚發生癌變的風險度，有助于篩查時間的間隔、治療方案的制定等。此研究不僅有助于了解無錫地區HPV感染狀況以及感染的優勢型別，對HPV疫苗的研制和應用也具有指導意義。

［1］Bernard HU，Burk RD，Chen Z，et al．Classification of papillomaviruses(PVs)based on 189 PV types and proposal of taxonomic amendments［J］．Virology，2010，401(1):70-79．

［2］葉健，黨裔武，劉瓊東，等．廣西地區宮頸癌患者HPV感染情況分析［J］．山東醫藥，2010，50(46):20-22．

［3］楊英捷，趙健，廖秦平，等．2285例女性下生殖道人乳頭狀瘤病毒感染篩查結果分析［J］．中國實用婦科與產科雜志，2006，22(6):444-446．

［4］何君梅，尹格平．21種HPV亞型檢測在宮頸病變診斷及預測中的價值［J］．山東醫藥，2010，50(15):35-36．

［5］李霓，代敏．中國婦女人乳頭狀瘤病毒感染的多中心橫斷面研究［J］．中華疾病控制雜志，2008，12(5):411-415．

［6］Lee SA，Kang D，Seo SS，et al．Multiple HPV infection in cervical cancer screened by HPV DNA chip［J］．Cancer Lett，2003，198(2):187-192．

［7］McLaughlin-Drubin ME，Münger K．Oncogenic activities of human papillomaviruses［J］．Virus Res，2009，143(2):195-208．

［8］孫燕冰，姜艷萍，袁麗仙．人乳頭狀瘤病毒(HPV)陽性308例分析［J］．昆明醫學院學報，2010，(4):40-42．