超高壓法提取山楂中熊果酸的最佳工藝研究

駱曉沛 張守勤 董雯 麗

摘 要：以熊果酸的提取率為指標(biāo)，采用單因素與正交實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的方法對(duì)超高壓提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，得到最佳提取參數(shù)為：料液比1：60 ，乙醇體積分?jǐn)?shù)60%、浸泡時(shí)間4小時(shí)、壓力200mPa。在該條件下，熊果酸的提取率：6.08%。該工藝簡(jiǎn)單合理，為工業(yè)生產(chǎn)提供了理論參考。

關(guān)鍵詞：山楂；熊果酸；超高壓提取工藝

中圖分類(lèi)號(hào)：R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

引言

山楂為薔薇科植物山楂( Crataegus pinnatifida Bge. )的成熟果實(shí)，重要的藥用價(jià)值，我國(guó)古代醫(yī)學(xué)家早已重視山楂的軟堅(jiān)消積作用[1]，目前，已有50多種中藥配方以山楂作原料，如常見(jiàn)的開(kāi)胃健脾藥有“山楂丸”、“焦三仙”等。據(jù)報(bào)道山楂中的三萜酸是山楂降脂和抗腫瘤有效部位，其主要有效成分為熊果酸、齊墩果酸等三萜酸[2]。

熊果酸是存在于天然植物中的一種三萜類(lèi)化合物，具有鎮(zhèn)靜、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗?jié)儭⒔档脱牵拱?、抗病毒等作用[3]，熊果酸還具有明顯的抗氧化功能，因而被廣泛地用作醫(yī)藥和化妝品原料。本課題充分利用我國(guó)山楂資源，以熊果酸的提取率為檢測(cè)指標(biāo)，考察了料液比(A) 、溶劑濃度(B) 、浸泡時(shí)間(C) 和壓力(D) 四個(gè)影響因素，研究山楂中熊果酸的超高壓提取參數(shù)，開(kāi)辟出能適合工業(yè)生產(chǎn)的提取條件。

1 材料與方法

1.1 材料

DL700超高壓等靜壓機(jī)(上海大隆機(jī)器廠(chǎng))；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)27520型(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；MA110電子天平(上海良平儀器儀表有限公司)； RE－52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海安亭電子儀器廠(chǎng))。

山楂果片，購(gòu)于吉林大藥房；熊果酸對(duì)照品，購(gòu)于上海友思生物技術(shù)公司。其他試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 山楂熊果酸的超高壓提取

將山楂果片干燥后粉碎成40目粉末， 精密稱(chēng)取山楂果粉末1g，準(zhǔn)確加入一定量的溶劑， 混勻，塑封，浸泡，按預(yù)先設(shè)計(jì)的參數(shù)超高壓處理[4]，過(guò)濾，定容。用分光光度法測(cè)量吸光度(A)值。

1.2.2 紫外分光光度法測(cè)定熊果酸含量[5]

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：精密稱(chēng)取干燥至恒重的熊果酸對(duì)照品25mg，置25ml容量瓶中，加無(wú)水乙醇，輕搖使充分溶解，定容，搖勻，得1.0mg/ml蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液。

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制：精密吸取熊果酸對(duì)照品無(wú)水乙醇液(濃度1.0mg/ml) 0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml水溶揮干，分別加5%香草醛—冰醋酸溶液0.4ml，高氯酸1.0ml，60℃水溶15分鐘，冰浴冷卻，加冰醋酸5.0ml 搖勻，在548nm 處測(cè)定吸收值。以熊果酸的濃度為橫坐標(biāo)，吸收度測(cè)定值為縱坐標(biāo)，做圖得到標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

1.2.3樣品的測(cè)定：吸取樣品液0.2 ml至試管中，步驟同上，在548nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（A）值，根據(jù)公式計(jì)算出山楂果中熊果酸的提取率Y(%)：

Y＝C×V/0.2 /m×100%

式中：C為按照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得出的熊果酸濃度；V為過(guò)濾后定容體積；m為山楂果樣品質(zhì)量。

2 結(jié)果與討論

根據(jù)考察，料液比、溶劑濃度（即乙醇濃度）、提取壓力和浸泡時(shí)間對(duì)熊果酸提取率影響較大，而提取時(shí)間即保壓時(shí)間則影響不明顯，因此在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)之上，選擇四因素三水平進(jìn)行正交試驗(yàn)，分別為：壓力100mPa、200mPa、300mPa；乙醇濃度50％、60％、70％；料液比1：20、1：40、1：60；浸泡時(shí)間1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)。以熊果酸的提取率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

從表1可以看出:在正交試驗(yàn)所選條件范圍內(nèi)， 4個(gè)因素對(duì)黃酮提取效果影響的順序?yàn)? B (乙醇濃度) > C (浸泡時(shí)間) > A (料液比) > D (提取壓力) 。最佳工藝條件為:溶劑為60%濃度乙醇，壓力為200mPa， 料液比為1：60， 浸泡時(shí)間4小時(shí)，提取時(shí)間為3min。最高提取率為6.08%。優(yōu)選得到的工藝穩(wěn)定、方法可行。

3 結(jié)論

山楂，是第一批列入衛(wèi)生部食藥兼用的水果，已被公認(rèn)為加工保健食品的最佳原料之一。熊果酸具有廣泛的生物學(xué)活性，安全低毒，日本等國(guó)家已經(jīng)將其作為天然抗氧化劑應(yīng)用于食品中。超高壓技術(shù)在我國(guó)的應(yīng)用主要有：高壓殺菌、特色產(chǎn)品的加工、水產(chǎn)品的加工、中草藥的提取[6]。常溫超高壓提取技術(shù)具有提取時(shí)間短、效率高、節(jié)能環(huán)保等優(yōu)勢(shì)。研究利用超高壓技術(shù)提取山楂中熊果酸的工藝，可以為超高壓技術(shù)的應(yīng)用提供可靠的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]全國(guó)中草藥匯編編寫(xiě)組.全國(guó)中草藥匯編(上冊(cè))[M].北京:人民衛(wèi)生出社，1990.115-117.

[2]山楂中總?cè)扑崽崛」に嚨膬?yōu)選，王逸萍; 陳愛(ài)萍; 徐智勇;中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2007，（25）4：774-775

[3]熊斌，雷志勇， 陳虹。熊果酸藥理學(xué)的研究進(jìn)展。國(guó)外醫(yī)學(xué)藥學(xué)分冊(cè)2004，31（3）：133-136。

[4]陳瑞戰(zhàn)，張守勤，王長(zhǎng)征.常溫超高壓提取人參總皂苷[J].化工學(xué)報(bào).2005（5）：5-56.

[5]王文祥，顧振綸。比色法測(cè)定山楂總?cè)扑岬暮?。中?guó)野生植物資源，2006，20（5 ）：47-48。

[6]勵(lì)建榮，王泓。超高壓技術(shù)在食品工業(yè)中的應(yīng)用及前景?，F(xiàn)代食品科技，2006，22（1）：171-173.

作者簡(jiǎn)介：

駱曉沛（1968-），女，黑龍江齊齊哈爾人，副教授，碩士研究生。