乙肝患者外周血 IL-18、TGF-β1、ALT、TBIL、HBV-DNA定量測定及分析

(勝利油田中心醫(yī)院，山東東營257034)

乙型病毒性肝炎(下稱乙肝)發(fā)病機理復(fù)雜。目前已證實，HBV感染可使病情加重及病毒逃避機體免疫而持續(xù)感染［1］，其所誘導(dǎo)的機體免疫反應(yīng)程度決定患者的臨床特征和病情嚴(yán)重程度;許多細(xì)胞因子與乙肝、肝纖維化等形成關(guān)系密切。2008年5月～2010年12月，我們對67例乙肝患者外周血IL-18、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β1、ALT、總 膽 紅 素(TBIL)、HBV-DNA定量進行測定，并分析了各指標(biāo)間的關(guān)系。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 同期收治的67例乙肝患者(乙肝組)，男39例，女28例;年齡22～50(39.8±16.2)歲。診斷均符合2000年全國第十次病毒性肝炎會議(西安)制定的《病毒性肝炎防治方案》［1］，其中輕度13例、中度20例、重度15例、并肝硬化19例。設(shè)20例體檢健康者為對照組，男12例、女8例，年齡19～48(40.5±15.6)歲。兩組一般資料具有可比性。

1.2 外周血 IL-18、TGF-β1、HBV-DNA 定量測定兩組均抽取5ml空腹靜脈血，收集于無菌離心管中，室溫放置不超過4 h，4℃、3 000 r/min離心10min，吸取血清轉(zhuǎn)入無菌EP管中-20℃保存待檢。采用自動分析儀以放免法測定ALT、TBIL，采用雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測IL-18、TGF-β1，采用熒光PCR系統(tǒng)行HBV-DNA定量檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11.5進行統(tǒng)計學(xué)處理。計量資料以±s表示、行t檢驗，各指標(biāo)間關(guān)系采用Spearman相關(guān)分析及偏相關(guān)分析。P≤0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組血清 TGF-β1、IL-18、ALT、TBIL 水平見表1。IL-18與ALT、TBIL呈正相關(guān)，r分別為0.379 4、0.504 7(P 均＜0.01);TGF-β1與 IL-18、ALT、TBIL無明顯相關(guān)性;HBV-DNA 定量與 IL-18、TGF-β1、ALT、TBIL均無明顯相關(guān)性，r分別為0.103 8、0.180 6、0.004 3、0.016 9(P 均 ＞0.05)。

表1 兩組血清 IL-18、TGF-β1、ALT、TBIL、HBV-DNA(±s)

表1 兩組血清 IL-18、TGF-β1、ALT、TBIL、HBV-DNA(±s)

注:與對照組比較，*P＜0.01;與輕度比較，△P＜0.01;與中度比較，#P＜0.01;與重度比較，▲P＜0.01

組別 n IL-18(pg/ml) TGF-β1(pg/ml) ALT(IU/L) TBIL(μmol/L) HBV-DNA(×105 copies/m 67輕度 13 83.22±20.36* 102.51± 16.55* 76.69± 30.00* 19.68± 5.72* 10.51± 8.65*中度 20 162.60±52.67＊△ 231.12± 42.62＊△ 268.26± 88.75＊△ 53.27± 19.02＊△ 34.26± 78.67重度 15 279.62±50.16＊△# 457.80±117.83＊△# 436.95±153.32＊△ 280.95±192.91＊△# 1.39± 2.25肝硬化 19 157.81±45.80＊△▲ 829.37± 96.42＊△#▲ 247.70±133.82＊△ 70.40± 45.44＊△▲ 54.65±106.81對照組 20 65.19±18.02 41.21± 8.31 26.22±10.24 12.20 l)乙肝組± 2.150.00±0.00

3 討論

人體感染HBV后的病變進展主要由病原及宿主兩方面因素決定。病原研究發(fā)現(xiàn)，HBV-DNA定量測定是了解HBV復(fù)制狀況敏感而可靠的方法，也是選擇抗病毒治療及評價藥物療效最重要的指標(biāo)之一［2，3］;宿主方面的關(guān)鍵為自身免疫狀態(tài)，機體細(xì)胞免疫低下或缺陷及HBV在肝內(nèi)持續(xù)復(fù)制是乙肝病變進展的主要原因。IL-18是由活化巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、NK細(xì)胞等產(chǎn)生的一種強有力的免疫調(diào)節(jié)因子［4］，對乙肝患者具有雙重作用:通過促進Th1/Th2反應(yīng)平衡向Th1方向發(fā)展，誘導(dǎo)IFN-γ產(chǎn)生而抑制病毒復(fù)制，有利于病毒消除及肝功能恢復(fù)［5］;調(diào)動宿主對HBV的細(xì)胞免疫，促進吞噬細(xì)胞和NK細(xì)胞介導(dǎo)的非特異性免疫和輔助性T細(xì)胞、細(xì)胞毒性T細(xì)胞介導(dǎo)的特異性免疫，同時導(dǎo)致一定程度肝臟損害。本研究顯示，乙肝組不同疾病時期患者血清IL-18水平均明顯高于對照組，且與血清ALT、TBIL水平呈正相關(guān)。提示HBV感染可刺激IL-18表達(dá)，且IL-18與肝臟損傷嚴(yán)重程度密切相關(guān)［6］。但乙肝組肝硬化者血清IL-18水平與病情為中度者無明顯差異，IL-18與TGF-β1無相關(guān)性。可能與病例數(shù)量偏少及其他調(diào)節(jié)免疫的細(xì)胞因子參與優(yōu)勢作用有關(guān)，仍需進一步研究。TGF-β1亦為一種多功能細(xì)胞因子，已證實其為目前已知最強的致纖維化因子。本研究表明，乙肝組輕度、中度、重度患者血清TGF-β1水平均顯著高于對照組，且隨病情加重而升高。表明血清TGF-β1水平與患者病情基本一致，抑制TGF-β1分泌或拮抗其作用有利于恢復(fù)細(xì)胞免疫功能。本研究還顯示，乙肝組血清HBV-DNA定量顯著高于對照組，但與病情及 IL-18、TGF-β1、ALT、TBIL均無明顯相關(guān)性。證實HBV感染所致肝臟和其他臟器病變的發(fā)生、發(fā)展與人體免疫狀態(tài)有關(guān)。可能機制:HBV不直接致肝臟炎癥損害，而是通過激發(fā)宿主的免疫反應(yīng)及細(xì)胞因子等共同作用于肝臟。因此對慢乙肝實施抗病毒治療不能單憑血清HBV-DNA水平?jīng)Q定，應(yīng)結(jié)合肝功能、血清纖維化指標(biāo)及影像學(xué)檢查等判定，同時動態(tài)監(jiān)測上述指標(biāo)及抗病毒療效。

總之，乙肝發(fā)病過程復(fù)雜，血清 IL-18、TGF-β1水平可作為判斷肝臟損傷嚴(yán)重程度的指標(biāo)，其中TGF-β1水平升高對早期肝硬化具有診斷價值;HBV-DNA定量與肝功能及肝臟損傷程度無明顯相關(guān)。

［1］中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會、肝病學(xué)分會聯(lián)合修訂.病毒性肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)［J］.中華傳染病雜志，2001，19(1):56-60.

［2］張玉琦，周秀梅，丁明權(quán)，等.乙型肝炎患者血清HBV DNA水平與臨床特征的關(guān)系［J］.醫(yī)學(xué)臨床研究，2003，20(9):676-678.

［3］Zhou P，Cai Q，Guan J，et al.Relationship between the concentration of HBV DNA and liver damage in serum of the patients of chronic hepatitis B［J］.Gastroenterol Hepatol，2001，16(1):302-308.

［4］Lotze MT，Taraha H，Okamura H.Interleukin-18 as a novel，distinct，and distant member of the interleukin-1 family promoting development of the adaptive immune response:the interleukin-18 issue of the Journal of Immunotherapy［J］.J Immunother，2002，25(11):1-3.

［5］Tsutsui H，Matsui K，Okamura H，et al.Pathophysiological role of interleukin-18 in inflammatory liver diseases［J］.Immunol Rev，2000，174(1):192-209.

［6］Takeuchi D，Yoshidome H，Kato A，et al.Interleukin-18 causes hepatic ischemia/reperfusion injury by suppressing anti-inflammatory cytokine expression in mice［J］.Hepatology，2004，39(3):699-710.