老年高血壓病患者心房顫動易感性與C-反應蛋白-717A/G多態性的關系

李 靜,高淑萍,石桂良,姜敏輝,鄧新桃,朱健華,潘 閩*

(1.南通大學附屬醫院 老年醫學科,江蘇 南通226001;2.寧夏人民醫院 心內科;3.興化市人民醫院心內科;4.南通大學附屬醫院心內科)

心房顫動(atrial fibrillation)是臨床最常見的心律失常。與竇性心律相比,房顫患者的卒中風險增加6倍,死亡風險增加2倍[1]。高血壓病是與房顫最相關的心血管疾病[2]。新近的研究顯示,炎癥可能參與了房顫的發生發展,房顫患者炎性標記物水平顯著升高,而應用抗炎藥物如他汀等可明顯降低房顫的方生[3]。本文研究 C-反應蛋白(CRP)-717A/G多態性(rs2794521)與老年高血壓病患者心房顫動的相關性。

1 對象與方法

1.1 一般資料

病例選自南通大學附屬醫院老年醫學科及心內科門診及住院的老年高血壓病患者169例。高血壓病的診斷標準按照JNC-7。分為房顫組75例,房顫的診斷按照2006年ACC/A HA/ECS制定統一的房顫命名和分類方法;對照組94例,經詳細的詢問病史、體格檢查、心電圖檢測證實既往無房顫發作史的竇性心律者。并排除并發感染或非感染性炎癥性疾病、嚴重肝腎功能不全、腫瘤或免疫系統疾病、急性冠狀動脈綜合征等其它引起CRP升高者。入選者均為無血緣關系的漢族人。2組的一般資料見表1。房顫組hs-CRP水平及左心房直徑顯著高于對照組。

表1 兩組一般資料比較

1.2 研究方法

1.2.1 CRP-717A/G多態性檢測 取EDTA-Na2抗凝外周靜脈血,RBC裂解液裂解后分離得到白細胞,改良KI法抽提DNA。PCR引物參照文獻[4]由上海生工公司合成。上、下游引物序列分別為:5′-GACTCCTGCCTGAAGCTTTACATA-3′和 5′-ATACATGTGCCATGCTGGTGTG-3′。PCR 反應體系為 50 μ l,含模板DNA 100 ng,dNTPS各0.2 mmol/L,引物各0.5 pmol/L,10 ×buffer 5 μ l,MgCl21.5 mmol/L,Taq DNA聚合酶2 U。經94℃5 min預變性后,94℃60 s,62℃30 s,72℃45 s共30個循環,最后 72℃延伸8分鐘。限制性酶切反應在30 μ l體系中進行,含PCR反應產物10 μ l,Bsh1236Ⅰ限制性內切酶2 U,10×buffer 3.0 μ l,37℃酶切16 h。3%瓊脂糖凝膠電泳分離酶切產物,溴乙錠染色后紫外燈下觀察結果。

1.2.2 生化指標檢測 血清總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)及甘油三酯(TG)的檢測用標準酶比色法(Randox公司),血清高敏C反應蛋白(hs-CRP)用乳膠凝集法(華拓公司)。檢測在日立7600全自動生化分析儀完成。

1.3 統計學分析

基因頻率用基因計數法計算,研究對象與Hardy-Weinberg平衡的符合程度用 χ2檢驗,組間基因型及等位基因頻率比較用 χ2檢驗;不同基因型間均數比較用t檢驗。hs-CRP呈偏態分布,將其轉化為對數后行t檢驗。數據處理由STATA8.0計算機軟件完成。

2 結果

2.1 兩組基因型及等位基因頻率

兩組基因型及等位基因頻率分布見表2。經 χ2檢驗,均符合 Hardy-Weinberg平衡(房顫組 χ2=0.001 8,P=0.966 4;對照組 χ2=0.288 9,P=0.590 9)。由于2組GG基因型頻率均較低(房顫組1例,對照組3例),故將GA及GG合為一組。房顫組AA基因型頻率顯著高于對照組(χ2=5.005 6,P=0.025 3),A等位基因頻率也顯著高于對照組(χ2=4.828 2,P=0.028 0)。

表2 兩組基因型及等位基因頻率

2.2 兩組不同基因型臨床參數比較

兩組不同基因型臨床參數比較見表3。無論是房顫組還是對照組,均未發現AA/GA+GG基因型在年齡、性別、血壓水平、血脂參數以及射血分數間存在顯著差異。同樣,2組也均未發現基因型對hs-CRP、左心房直徑有影響(P均＞0.05)。

表3 兩組不同基因型臨床參數比較

3 討論

近年來的研究顯示,房顫存在著家族聚集性及易感性。家族中有房顫者,其他成員發展為房顫的風險增加1.8倍[5]。鉀離子通道的變異與家族性房顫相關,但在散發性房顫患者中,僅少部分與其相關[6]。此外,雖然既往研究識別了多種房顫的危險因素,但仍有眾多具有這些危險因素的患者并不發展為房顫[7]。這些均表明,遺傳因素參與了房顫的發生發展。

高血壓病是與房顫最相關的心血管疾病[2],然而,其確切機制目前知之甚少。共入選5806例65歲以上老年人,隨訪(6.9±1.6)年的大規模、前瞻性隊列研究發現:基線CRP水平可預測房顫發生的危險性[8]。本文也發現,房顫組患者hs-CRP水平顯著高于對照組。兩組的基因型及等位基因比較發現,房顫組AA基因型及A等位基因頻率也顯著高于對照組。提示hs-CRP水平及A等位基因與老年高血壓病患者房顫發生相關。

CRP基因-717A/G多態位點位于CRP基因啟動區,因而我們進一步研究了該多態位點與hs-CRP水平的關系。但無論是房顫組還是對照組,均未發現-717A/G多態位點與hs-CRP水平相關。這一結果與既往的一些研究一致[4,9]。雖然有研究顯示,遺傳因素對血清CRP水平發揮了35%-40%的作用[10],但CRP基因多態性與血清CRP水平之間關系的研究結果并不一致[4,11]。其原因可能與年齡、性別、吸煙、臨床治療情況等混淆因子弱化了CRP基因的表型作用有關,也可能與多數研究樣本量太小有關。此外,其它一些炎性因子如白細胞介素-6基因啟動區的多態位點也可影響血清CRP水平[12]。

本文結果表明,老年高血壓病合并房顫患者hs-CRP水平顯著升高,CRP-717 A等位基因與房顫易感性相關。然而,這一結論尚需在不同種族及大樣本人群研究中進一步確認。CRP基因-717A/G多態性對房顫患者炎癥狀態作用的確切機制尚需進一步研究。

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