VEGF和Ki-67在膀胱移行細胞癌中的表達和臨床意義

楊宏 雷永虹 秦揚 他同生 楊承綱

為探討膀胱癌中癌基因的表達與其生物學行為的關系，采取免疫組化SP法對68例膀胱移行細胞癌(bladder transitional cell cancer，BTCC)組織中血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和核增殖相關抗原 Ki-67的表達進行測定，同時結合對患者的隨訪，對其病理分級、局部浸潤(臨床分期)、復發轉移及預后等情況進行分析，并在此基礎上探討二者的關系及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我科2001年1月至2005年6月間首次手術切除并經病理證實的BTCC組織石蠟標本68例，其中男54例，女14例;年齡33～80歲，平均年齡62.16歲;病理分級按WHO標準:Ⅰ級16例，Ⅱ級31例，Ⅲ級21例;臨床分期按UICC-TNM標準:表淺性腫瘤(Tis～T1期)46例，浸潤性腫瘤(T2～T4期)22例;術后隨訪至2008年6月，隨訪時間4個月～7年不等，復發25例，未復發43例。另取10例正常膀胱黏膜作對照。

1.2 方法 病理標本4 μm厚石蠟切片，65℃烘烤，脫蠟，水化后微波修復抗原，繼以SP法檢測。

1.3 統計學分析 計數資料比較采用χ2檢驗，P ＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 VEGF和Ki-67在正常膀胱黏膜和BTCC中的表達 正常膀胱黏膜VEGF和Ki-67無陽性表達，陽性率為0%，BTCC組織中VEGF和Ki-67陽性表達分別為50例(73.53%)和48例(70.59%)，二者VEGF和Ki-67陽性率表達差異有統計學意義(P＜0.01)。VEGF和Ki-67在BTCC中的陽性表達率隨病理分級的升高而升高，差異有統計學意義(P＜0.05)。浸潤性腫瘤陽性表達率明顯高于表淺性腫瘤，差異有統計學意義(P＜0.05)。復發組陽性表達率明顯高于未復發組，差異有統計學意義(P ＜0.01)。見表1。

表1 VEGF和Ki-67在正常膀胱黏膜和BTCC中的表達

2.2 VEGF與Ki-67在BTCC中表達的關系 VEGF和Ki-67共同陽性43例，共同陰性12例，兩者在BTCC中表達一致的符合率達80.88%，在 VEGF表達較高的區域，Ki-67表達亦較強，在VEGF表達++或+++的35例中，同時Ki-67++有26例，占74.29%，兩者協同強陽性表達率差異有統計學意義(P＜0.01)。見表 2。

表2 VEGF與Ki-67在BTCC中表達的關系 例

2.3 轉歸 本研究結果發現，在VEGF和Ki-67共同陽性43例中，有22例復發，占復發組(25例)的88%。對有完整隨訪資料的患者研究表明，VEGF和Ki-67的陽性表達患者術后易復發或轉移，預后差，生存期明顯低于VEGF和Ki-67的陰性表達者。

3 討論

膀胱癌在我國是泌尿系統中最常見的惡性腫瘤，其發病率和病死率居第一位，術后復發或轉移是導致治療失敗的常見原因。BTCC生物學行為復雜多變，異質性強，具有易復發性，其復發規律及其與生物學特性的關系至今仍不清楚，尋找生物學標志對了解膀胱移行細胞癌的發生發展、浸潤具有重要意義。其次，由于目前采用經尿道膀胱腫瘤電切術(TURBT)的患者較多，原位膀胱手術日益成熟，通過分析其生物學行為會對指導臨床選擇最佳治療方案有一定的幫助。

腫瘤細胞的增殖和播散有賴于豐富的血管支持，血管新生是腫瘤生長、轉移和表達腫瘤生物學特征的基礎。膀胱癌與所有實體腫瘤一樣，生長與轉移依賴于血管新生，目前已知，內皮細胞增殖是血管新生的首要環節，VEGF是迄今發現的針對內皮細胞特異性最高、促腫瘤血管構建作用最強的調節因子［1］。

VEGF是一種功能強大且能產生多種生物學效應的細胞因子，是目前已知的一族最強的促血管形成物質，其對腫瘤的作用有:(1)促進血管內皮細胞增殖;(2)增強血管通透性，使腫瘤細胞外滲，轉向臨近組織器官;(3)改變細胞外基質表達及基因的表達;(4)顯著影響免疫功能，使腫瘤細胞逃脫機體免疫監測作用引起腫瘤細胞的擴散和轉移［2］。腫瘤自腫瘤血管從宿主獲得營養，并通過不成熟的腫瘤血管向宿主輸出大量惡性細胞，導致腫瘤不斷生長和轉移。由此可見，VEGF在腫瘤血管生長和調節腫瘤細胞增殖過程中起著十分關鍵的作用。

核增殖相關抗原Ki-67是目前較為肯定的核增殖標志基因，反映細胞的增殖活性，在人增殖細胞的G1、S、G2、M期表達，M期達最大表達峰，而G0期無表達。傳統的細胞增殖標記物如PCNA等，在許多靜止期細胞亦有高水平的表達［3］，而Ki-67在G0期無表達，因此Ki-67較前者更能準確地評價細胞增殖活性。

本研究結果發現，VEGF和Ki-67在BTCC中呈高表達，而在正常膀胱黏膜中則不表達(P＜0.01)。二者在BTCC中的陽性表達率隨病理分級的升高而升高(P＜0.05)，且復發明顯升高(P＜0.05);浸潤性腫瘤VEGF陽性表達率明顯高于表淺性腫瘤(P＜0.05)，說明二者的表達與BTCC的侵襲力有關。本研究結果提示:VEGF和Ki-67的表達與BTCC的病理分級、臨床分期、腫瘤復發和預后呈明顯相關性，即二者在BTCC中表達越強，癌細胞分化越差，惡性程度越高，越易向深層浸潤，越容易復發，預后越差。這說明VEGF和Ki-67與BTCC的生物學行為關系密切，可能對膀胱癌的發生進展起促進作用。進一步證實VEGF和Ki-67在BTCC中的表達可作為判斷膀胱腫瘤惡性程度、侵襲能力及預后較理想的兩項指標。

另外，在本研究中VEGF和Ki-67在BTCC中表達一致的符合率達80.88%，在 VEGF表達較高的區域，Ki-67表達亦較強，兩者協同強陽性表達率差異有統計學意義(P＜0.01)。結合本研究結果可進一步說明:VEGF和Ki-67之間可能有著某種聯系，VEGF既可刺激腫瘤血管形成，還可促進腫瘤細胞增殖，它們在促進腫瘤新生血管形成和腫瘤細胞過度增殖的機制中可能存在協同作用。本研究對有完整隨訪資料的患者研究表明，VEGF和Ki-67的陽性表達患者術后易復發或轉移，預后差，生存期明顯低于VEGF和Ki-67的陰性表達者，提示VEGF和Ki-67的陽性表達尤其是聯合陽性表達對判斷膀胱癌復發、評估預后具有重要意義，能較準確地評估膀胱移行細胞癌的生物學行為，二者不僅為測定腫瘤的惡性潛力提供了客觀指標，而且可幫助選擇治療。

因此，同時檢測VEGF和Ki-67，研究腫瘤血管形成和腫瘤細胞增殖機制對了解惡性腫瘤的發生發展、侵襲和轉移的生物學特性和機制，以及抗腫瘤血管生成靶向治療有著重要的理論意義和臨床應用價值。

1 Katoh R，Miyagi E，Kawai A，et al.Expression of vascular endothelial growth factor in human thyrioid neoplasms.Hum Pathol，1999，30:891.

2 梁建清.膀胱癌診斷新發展.中國綜合臨床雜志，2005，21:380-381.

3 Hall PA，Levison DA，Woods AL，et al.Proliferating cell nuclear antigen(PCNA)im-munolocalization in paraffin sections:an index of cell proliferation with evidence of deregulat-ed expression in some neoplasms.J Pathol，1990，162:285.