VEGF和Ki-67在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)和臨床意義

楊宏 雷永虹 秦?fù)P 他同生 楊承綱

為探討膀胱癌中癌基因的表達(dá)與其生物學(xué)行為的關(guān)系，采取免疫組化SP法對68例膀胱移行細(xì)胞癌(bladder transitional cell cancer，BTCC)組織中血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和核增殖相關(guān)抗原 Ki-67的表達(dá)進(jìn)行測定，同時結(jié)合對患者的隨訪，對其病理分級、局部浸潤(臨床分期)、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移及預(yù)后等情況進(jìn)行分析，并在此基礎(chǔ)上探討二者的關(guān)系及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我科2001年1月至2005年6月間首次手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的BTCC組織石蠟標(biāo)本68例，其中男54例，女14例;年齡33～80歲，平均年齡62.16歲;病理分級按WHO標(biāo)準(zhǔn):Ⅰ級16例，Ⅱ級31例，Ⅲ級21例;臨床分期按UICC-TNM標(biāo)準(zhǔn):表淺性腫瘤(Tis～T1期)46例，浸潤性腫瘤(T2～T4期)22例;術(shù)后隨訪至2008年6月，隨訪時間4個月～7年不等，復(fù)發(fā)25例，未復(fù)發(fā)43例。另取10例正常膀胱黏膜作對照。

1.2 方法 病理標(biāo)本4 μm厚石蠟切片，65℃烘烤，脫蠟，水化后微波修復(fù)抗原，繼以SP法檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 計數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P ＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 VEGF和Ki-67在正常膀胱黏膜和BTCC中的表達(dá) 正常膀胱黏膜VEGF和Ki-67無陽性表達(dá)，陽性率為0%，BTCC組織中VEGF和Ki-67陽性表達(dá)分別為50例(73.53%)和48例(70.59%)，二者VEGF和Ki-67陽性率表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。VEGF和Ki-67在BTCC中的陽性表達(dá)率隨病理分級的升高而升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。浸潤性腫瘤陽性表達(dá)率明顯高于表淺性腫瘤，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。復(fù)發(fā)組陽性表達(dá)率明顯高于未復(fù)發(fā)組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.01)。見表1。

表1 VEGF和Ki-67在正常膀胱黏膜和BTCC中的表達(dá)

2.2 VEGF與Ki-67在BTCC中表達(dá)的關(guān)系 VEGF和Ki-67共同陽性43例，共同陰性12例，兩者在BTCC中表達(dá)一致的符合率達(dá)80.88%，在 VEGF表達(dá)較高的區(qū)域，Ki-67表達(dá)亦較強(qiáng)，在VEGF表達(dá)++或+++的35例中，同時Ki-67++有26例，占74.29%，兩者協(xié)同強(qiáng)陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。見表 2。

表2 VEGF與Ki-67在BTCC中表達(dá)的關(guān)系 例

2.3 轉(zhuǎn)歸 本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在VEGF和Ki-67共同陽性43例中，有22例復(fù)發(fā)，占復(fù)發(fā)組(25例)的88%。對有完整隨訪資料的患者研究表明，VEGF和Ki-67的陽性表達(dá)患者術(shù)后易復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，預(yù)后差，生存期明顯低于VEGF和Ki-67的陰性表達(dá)者。

3 討論

膀胱癌在我國是泌尿系統(tǒng)中最常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率和病死率居第一位，術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致治療失敗的常見原因。BTCC生物學(xué)行為復(fù)雜多變，異質(zhì)性強(qiáng)，具有易復(fù)發(fā)性，其復(fù)發(fā)規(guī)律及其與生物學(xué)特性的關(guān)系至今仍不清楚，尋找生物學(xué)標(biāo)志對了解膀胱移行細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展、浸潤具有重要意義。其次，由于目前采用經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術(shù)(TURBT)的患者較多，原位膀胱手術(shù)日益成熟，通過分析其生物學(xué)行為會對指導(dǎo)臨床選擇最佳治療方案有一定的幫助。

腫瘤細(xì)胞的增殖和播散有賴于豐富的血管支持，血管新生是腫瘤生長、轉(zhuǎn)移和表達(dá)腫瘤生物學(xué)特征的基礎(chǔ)。膀胱癌與所有實(shí)體腫瘤一樣，生長與轉(zhuǎn)移依賴于血管新生，目前已知，內(nèi)皮細(xì)胞增殖是血管新生的首要環(huán)節(jié)，VEGF是迄今發(fā)現(xiàn)的針對內(nèi)皮細(xì)胞特異性最高、促腫瘤血管構(gòu)建作用最強(qiáng)的調(diào)節(jié)因子［1］。

VEGF是一種功能強(qiáng)大且能產(chǎn)生多種生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子，是目前已知的一族最強(qiáng)的促血管形成物質(zhì)，其對腫瘤的作用有:(1)促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖;(2)增強(qiáng)血管通透性，使腫瘤細(xì)胞外滲，轉(zhuǎn)向臨近組織器官;(3)改變細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)及基因的表達(dá);(4)顯著影響免疫功能，使腫瘤細(xì)胞逃脫機(jī)體免疫監(jiān)測作用引起腫瘤細(xì)胞的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移［2］。腫瘤自腫瘤血管從宿主獲得營養(yǎng)，并通過不成熟的腫瘤血管向宿主輸出大量惡性細(xì)胞，導(dǎo)致腫瘤不斷生長和轉(zhuǎn)移。由此可見，VEGF在腫瘤血管生長和調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞增殖過程中起著十分關(guān)鍵的作用。

核增殖相關(guān)抗原Ki-67是目前較為肯定的核增殖標(biāo)志基因，反映細(xì)胞的增殖活性，在人增殖細(xì)胞的G1、S、G2、M期表達(dá)，M期達(dá)最大表達(dá)峰，而G0期無表達(dá)。傳統(tǒng)的細(xì)胞增殖標(biāo)記物如PCNA等，在許多靜止期細(xì)胞亦有高水平的表達(dá)［3］，而Ki-67在G0期無表達(dá)，因此Ki-67較前者更能準(zhǔn)確地評價細(xì)胞增殖活性。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，VEGF和Ki-67在BTCC中呈高表達(dá)，而在正常膀胱黏膜中則不表達(dá)(P＜0.01)。二者在BTCC中的陽性表達(dá)率隨病理分級的升高而升高(P＜0.05)，且復(fù)發(fā)明顯升高(P＜0.05);浸潤性腫瘤VEGF陽性表達(dá)率明顯高于表淺性腫瘤(P＜0.05)，說明二者的表達(dá)與BTCC的侵襲力有關(guān)。本研究結(jié)果提示:VEGF和Ki-67的表達(dá)與BTCC的病理分級、臨床分期、腫瘤復(fù)發(fā)和預(yù)后呈明顯相關(guān)性，即二者在BTCC中表達(dá)越強(qiáng)，癌細(xì)胞分化越差，惡性程度越高，越易向深層浸潤，越容易復(fù)發(fā)，預(yù)后越差。這說明VEGF和Ki-67與BTCC的生物學(xué)行為關(guān)系密切，可能對膀胱癌的發(fā)生進(jìn)展起促進(jìn)作用。進(jìn)一步證實(shí)VEGF和Ki-67在BTCC中的表達(dá)可作為判斷膀胱腫瘤惡性程度、侵襲能力及預(yù)后較理想的兩項(xiàng)指標(biāo)。

另外，在本研究中VEGF和Ki-67在BTCC中表達(dá)一致的符合率達(dá)80.88%，在 VEGF表達(dá)較高的區(qū)域，Ki-67表達(dá)亦較強(qiáng)，兩者協(xié)同強(qiáng)陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。結(jié)合本研究結(jié)果可進(jìn)一步說明:VEGF和Ki-67之間可能有著某種聯(lián)系，VEGF既可刺激腫瘤血管形成，還可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，它們在促進(jìn)腫瘤新生血管形成和腫瘤細(xì)胞過度增殖的機(jī)制中可能存在協(xié)同作用。本研究對有完整隨訪資料的患者研究表明，VEGF和Ki-67的陽性表達(dá)患者術(shù)后易復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，預(yù)后差，生存期明顯低于VEGF和Ki-67的陰性表達(dá)者，提示VEGF和Ki-67的陽性表達(dá)尤其是聯(lián)合陽性表達(dá)對判斷膀胱癌復(fù)發(fā)、評估預(yù)后具有重要意義，能較準(zhǔn)確地評估膀胱移行細(xì)胞癌的生物學(xué)行為，二者不僅為測定腫瘤的惡性潛力提供了客觀指標(biāo)，而且可幫助選擇治療。

因此，同時檢測VEGF和Ki-67，研究腫瘤血管形成和腫瘤細(xì)胞增殖機(jī)制對了解惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移的生物學(xué)特性和機(jī)制，以及抗腫瘤血管生成靶向治療有著重要的理論意義和臨床應(yīng)用價值。

1 Katoh R，Miyagi E，Kawai A，et al.Expression of vascular endothelial growth factor in human thyrioid neoplasms.Hum Pathol，1999，30:891.

2 梁建清.膀胱癌診斷新發(fā)展.中國綜合臨床雜志，2005，21:380-381.

3 Hall PA，Levison DA，Woods AL，et al.Proliferating cell nuclear antigen(PCNA)im-munolocalization in paraffin sections:an index of cell proliferation with evidence of deregulat-ed expression in some neoplasms.J Pathol，1990，162:285.