ABO新生兒溶血病與孕婦血型抗體效價(jià)的相關(guān)性分析

閆曉鵬 王林 李雪英

(焦作市中心血站 河南焦作 454000)

ABO新生兒溶血病(ABO-HDN)是由于母體內(nèi)存在與胎兒紅細(xì)胞不相合的IgG抗-A(B)抗體,并由該抗體引起的同種被動(dòng)免疫性疾病。其對(duì)新生兒的最大危害是引起膽紅素腦病(核黃疸)而造成患兒早期死亡或使存活者留下不可逆的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥,一旦發(fā)生,治療效果甚微,僅能以預(yù)防為主[1]。所以,正規(guī)進(jìn)行孕婦血清中的IgG抗體檢測(cè),可早期預(yù)測(cè)胎兒發(fā)生溶血病的可能并有利于及時(shí)采取防治措施,對(duì)改善此類(lèi)患兒的預(yù)后及降低病死率意義重大。2005年8月至2009年12月,我室對(duì)581例孕婦及其新生兒進(jìn)行了血型血清學(xué)檢測(cè),現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來(lái)源 2005年8月至2009年12月,由焦作地區(qū)各醫(yī)療機(jī)構(gòu)推薦或自主來(lái)我室進(jìn)行產(chǎn)前檢查的孕婦夫婦,經(jīng)血型鑒定和不規(guī)則抗體篩查,選擇其中581例孕婦及其新生兒作為研究對(duì)象(孕婦不規(guī)則抗體篩查均為陰性且和丈夫?yàn)閱渭傾BO血型不合)。

1.1.2 試劑 抗-A、抗-B、抗D、Ac、Bc、Oc、2-Me、抗人球蛋白試劑、篩選細(xì)胞均由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供;聚凝胺試劑盒由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供;微柱凝膠卡由長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供;所有試劑均在有效期內(nèi)使用;指示細(xì)胞和酶處理細(xì)胞由本室自制。

1.1.3 儀器設(shè)備 KA-2200血球洗滌離心機(jī)(日本KUBOTA公司);SBHW2-1型電熱恒溫水浴箱(北京醫(yī)療設(shè)備廠(chǎng)有限責(zé)任公司);TD-3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)及FYQ型免疫微柱孵育器(長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司);DH-100新生兒總疸紅素測(cè)定儀(上海愛(ài)蓓兒醫(yī)用儀器有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 孕婦ABO-HDN血型抗體的初步確定 581例孕婦夫婦常規(guī)進(jìn)行ABO正反定型后,按表1初步確定孕婦血清中可能存在的IgG抗－A(B)抗體,并用抗人球蛋白法測(cè)定其效價(jià),效價(jià)≥64者為抗體陽(yáng)性,反之為抗體陰性,如表1。

表1 孕婦血清中可能存在的ABO-HDN抗體

表2 581例孕婦IgG抗-A(B)效價(jià)及ABO-HDN患兒發(fā)病率[例(%)]

1.2.2 孕婦IgG抗－A(B)效價(jià)測(cè)定[2]取孕婦血清100uL與等量2-Me混合,加塞,37℃放置10min或室溫放置30min;用生理鹽水倍比稀釋2-Me處理后的血清,并加入等量相應(yīng)的紅細(xì)胞;直接離心以檢測(cè)殘余IgM抗體效價(jià);37℃孵育30min,洗滌3次,加1滴抗人球蛋白試劑,3400r/min離心15秒,輕輕搖動(dòng)試管觀(guān)察結(jié)果,紅細(xì)胞凝集的最高稀釋度的倒數(shù)即為IgG抗－A(B)效價(jià)(必須比殘余IgM抗體效價(jià)高兩管以上檢測(cè)結(jié)果才有意義)。

1.2.3 新生兒ABO-HDN確認(rèn)試驗(yàn)[3]取0～7d新生兒靜脈血4mL,進(jìn)行ABO和Rh(D)定型;紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn);血清中游離抗體測(cè)定;紅細(xì)胞抗體放散試驗(yàn);血清膽紅素測(cè)定。ABO-HDN診斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[2]。

1.2.4 患兒換血的交叉配合試驗(yàn)[3]一般采用患兒母親的血清作“主側(cè)”交叉配血試驗(yàn)。因?yàn)榛純喊l(fā)生溶血的抗體來(lái)自母親,且患兒出生后其抗體含量總低于母親血清中抗體的含量,所以供血者紅細(xì)胞與母親血清配合者,也一定與患兒血清配合;如果當(dāng)時(shí)只有患兒血樣,則可用患兒的紅細(xì)胞放散液或血清作“主側(cè)”配血。因?yàn)檫M(jìn)入患兒的抗體已大部分被患兒紅細(xì)胞吸附,所以放散液要比患兒血清更具代表性。在“次側(cè)”交叉配血試驗(yàn)中,因?yàn)榛純杭t細(xì)胞已被不完全抗體致敏,所以必然顯示凝集,不作配血禁忌考慮,只要“主側(cè)”配血無(wú)凝集即可進(jìn)行換血。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,O型孕婦與A、B型孕婦抗體陽(yáng)性率及ABO-HDN患兒發(fā)病率的比較均行χ2檢驗(yàn),P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 孕婦IgG抗-A(B)效價(jià)測(cè)定及新生兒ABO-HDN發(fā)病情況

581 例孕婦中,IgG抗-A(B)效價(jià)≥64者共256(44.1%)例,新生兒確診為ABO-HDN者共117例(20.1%)。其中O型孕婦432例(74.4%),效價(jià)≥64者210例(36.1%),確診為ABO-HDN的患兒共106例(18.2%);A型孕婦96例(16.5%),效價(jià)≥64者30例(5.2%),確診為ABO-HDN的患兒共8例(1.4%);B型孕婦53例(9.1%),效價(jià)≥64者16例(2.8%),確診為ABO-HDN的患兒共3例(0.5%)。見(jiàn)表2。

2.2 患兒換血情況

117例ABO-HDN患兒中共有9例進(jìn)行了換血治療,占ABO-HDN患兒的7.7%。其中A型患兒5例,B型患兒4例,均有嚴(yán)重貧血和黃疸癥狀,血清膽紅素＞12mg/dL,IgG抗-A(B)效價(jià)≥256。經(jīng)換血治療后,患兒貧血明顯好轉(zhuǎn),血清膽紅素大幅度下降,結(jié)合藥物和藍(lán)光照射治療,1周后均痊愈出院。

3 討論

ABO-HDN是母嬰ABO血型不合,母體產(chǎn)生的抗胎兒紅細(xì)胞抗原的免疫性抗體IgG抗-A(B)通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血液循環(huán),并與胎兒紅細(xì)胞的相應(yīng)抗原結(jié)合而使其在單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)內(nèi)被破壞,從而引起胎兒和新生兒發(fā)生血管外溶血[4]。孕婦血清IgG抗-A(B)效價(jià)的高低對(duì)ABO-HDN的發(fā)病率有直接關(guān)系。目前臨床通常以64作為臨界值,隨著IgG抗體效價(jià)的上升,ABO-HDN的發(fā)病率也相應(yīng)升高[5]。本研究顯示,O型孕婦IgG抗-A(B)效價(jià)陽(yáng)性率明顯高于A、B型孕婦,所以O(shè)型孕婦的ABO-HDN發(fā)病率也相應(yīng)比A型和B型孕婦顯著增高。此點(diǎn)提示當(dāng)孕婦為O型,丈夫?yàn)榉荗型時(shí),應(yīng)及早對(duì)孕婦進(jìn)行IgG抗體效價(jià)測(cè)定并觀(guān)察其動(dòng)態(tài)變化,當(dāng)IgG抗-A(B)效價(jià)＞128時(shí)要給予藥物治療,當(dāng)IgG抗-A(B)效價(jià)＞512時(shí),有必要時(shí)考慮血漿置換,以減少新生兒溶血病的發(fā)生[6]。

由于O型孕婦血清中的抗A和抗B也可由自然環(huán)境中類(lèi)似A、B抗原物質(zhì)的免疫刺激產(chǎn)生,并于妊娠后通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)引起溶血,故ABO-HDN也可以發(fā)生在第一胎,且發(fā)生率約50%[7～8],此點(diǎn)也應(yīng)引起產(chǎn)科醫(yī)生的足夠重視。再者ABO-HDN和Rh-HDN比較,患兒出現(xiàn)黃疸的時(shí)間相對(duì)較晚,一般在生后2～5d,黃疸出現(xiàn)初期易被忽略為生理性黃疸而延誤溶血病的診斷。據(jù)報(bào)道,臨床上母嬰ABO血型不合患兒就診時(shí)間以≥3d為最多,占47.6%,最長(zhǎng)者為生后10d,從而使患兒病程延長(zhǎng)而導(dǎo)致發(fā)生膽紅素腦病及換血率增加,失去早期治療的有利時(shí)機(jī)[1]。

綜上所述,廣大產(chǎn)科醫(yī)生及育齡婦夫要正確認(rèn)識(shí)ABO-HDN的危害性,積極進(jìn)行產(chǎn)前血型血清學(xué)檢測(cè),當(dāng)夫婦ABO血型不合時(shí),應(yīng)定期觀(guān)察孕婦IgG抗-A(B)效價(jià)的變化,并適時(shí)采取干預(yù)措施,以有效控制并降低孕婦體內(nèi)的IgG抗體效價(jià),減少胎兒的溶血程度,提高對(duì)HDN的早期預(yù)防效果。新生兒分娩后要及時(shí)送檢和治療,防止患兒嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生。切實(shí)做到早期預(yù)測(cè)、早期干預(yù)、早期診斷和早期治療,從而提高新生兒的生存質(zhì)量。

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