白飯樹水提物對小鼠佐劑性關節炎的作用

付 翔， 鄧俊剛， 鄧立東

(桂林醫學院附屬醫院，廣西桂林541001)

白飯樹Fluggea virosa為大戟科白飯樹屬Flueggea植物，為廣西壯民族藥，以全株入藥，苦、微澀，性涼，有小毒，具清熱解毒、可治療濕疹、膿皰瘡、過敏性皮炎、瘡癤及燒燙傷［1-2］等。近年來，中國大陸及臺灣地區的學者對白飯樹祛風除濕的生理及藥理毒理活性關注程度越來越高，在這方面做了一些有益的研究［3］。本實驗選擇小鼠佐劑性關節炎模型觀察白飯樹根皮不同質量濃度水提取物的治療作用，探索藥物的作用機制，為臨床合理用藥提供實驗信息。

1 實驗材料

1.1 白飯樹提取物 取白飯樹500 g，用3000 mL水溶液煎煮3次，合并煎煮液，得濃縮液1800 mL，經濃縮蒸干得到的膏狀物即為水提取物，稱質量得28.24 g，每克提取物相當于17.70 g/g(生藥/提取物)。實驗時，用蒸餾水將提取物溶解并配制成相當于生藥 0.5 g/mL、0.25 g/mL、0.125 g/mL 的受試液，備用。

1.2 試劑 醋酸地塞米松(山東魯抗辰欣制藥有限公司，批號07123120);0.9%氯化鈉注射液(安徽雙鶴藥業有限責任公司);Freund‘s完全佐劑(sigma公司，批號:098k8729)。

1.3 儀器 調溫電熱套(鞏義市予華儀器有限責任公司產品);旋轉蒸發儀(上海亞榮生化儀器廠);DZF-250真空干燥器(鄭州長城科工貿有限公司);B2500S-M7超聲波清洗器(必能信超聲有限公司產品);HANGPING FA2004電子天平(上海精科天平儀器廠)。

1.4 動物 清潔級昆明種小鼠50只，體質量20～25 g，由廣西醫科大學實驗動物中心提供，動物生產許可證號:SCXK桂2003-0002。

2 實驗方法

2.1 模型制備與實驗治療［4］小鼠50只，隨機分為5組，每組10只，分別在其左后足趾皮下注射Freund’s完全佐劑0.1 mL，0.5 h 后灌胃給藥［5］。A 組:0.9%氯化鈉注射液;B組:白飯樹10 g/kg;C組:5 kg/kg;D組:白飯樹2.5 kg/kg;E組:地塞米松水溶液，每日1次，連續24 d，分別在第2、8、12、16、20、24天測量各組小鼠左后足體積，并計算腫脹體積(ΔMl)。第24天后處死小鼠，摘取脾臟及胸腺，稱質量，計算免疫器官系數(臟器重/體質量)。

3 實驗結果

3.1 對AA模型小鼠繼發性足趾腫脹的影響 實驗結果顯示，白飯樹高、中劑量灌胃均能明顯抑制AA模型小鼠繼發性足腫脹，與地塞米松治療效果相當，低濃度效果不明顯，結果見表1。

3.2 對AA小鼠胸腺與脾臟作用 白飯樹水提取物高、中、低濃度三組胸腺系數(胸腺/體質量)均低于模型組，見表2。

表1 白飯樹水提取物對AA小鼠繼發性炎癥反應的影響(± s，n=10)

表1 白飯樹水提取物對AA小鼠繼發性炎癥反應的影響(± s，n=10)

注:與模型組比較，*P ＜0.05。

組別 給藥前10 min/(ΔmL)給藥后足趾腫脹體積/(ΔmL)第2天 第8天 第12天 第16天 第20天 第24天A 0.1183 ±0.0214 0.0738 ±0.0414 0.0824 ±0.0357 0.0825 ±0.0437 0.0645 ±0.0308 0.0628 ±0.0263 0.0642 ±0.0273 B 0.0730 ±0.0299 0.0655 ±0.0289 0.0730 ±0.0299 0.0563 ±0.0326 0.0508 ±0.0351 0.0431 ±0.0201* 0.0387 ±0.0372*C 0.1066 ±0.0217 0.0715 ±0.0243 0.0782 ±0.0170 0.0613 ±0.0183 0.0507 ±0.0262 0.0418 ±0.0213* 0.0393 ±0.0254*D 0.0950 ±0.0312 0.0685 ±0.0220 0.0662 ±0.0199 0.0633 ±0.0144 0.0590 ±0.0154 0.0585 ±0.0136 0.0557 ±0.0175 E 0.1005 ±0.0089 0.0585 ±0.0289 0.0622 ±0.0091 0.0553 ±0.0167* 0.0410 ±0.0107* 0.0420 ±0.0173* 0.0323 ±0.0111*

表2 白飯樹水提取物對AA小鼠胸腺與脾臟作用(± s，n=10)

表2 白飯樹水提取物對AA小鼠胸腺與脾臟作用(± s，n=10)

注:與模型組比較，*P ＜0.05。

地塞米松組胸腺/體質量(×10 －3) 1.99 ±0.09 1.05 ±2.21* 1.12 ±1.97* 1.34 ±2.09* 1.13 ±0.11組別 模型組 高質量濃度組A 中質量濃度組B 低質量濃度組C*脾/體質量(×10 －3) 2.51 ±0.12 1.30 ±0.59* 1.13 ±0.14* 1.24 ±0.40* 1.53 ±0.21*

4 討論

4.1 用Freund’d完全佐劑誘發的關節炎繼發病變是一種遲發型超敏反應(DTH)，其原理為BCG作為抗原進入機體使T細胞致敏(稱急性炎癥反應)，當再次接觸抗原，致敏T細胞分化增殖，釋放各種淋巴因子以及直接殺傷靶細胞，引起單核細胞浸潤，同時由抗原抗體形成的免疫復合物激活補體，導致白細胞趨化激活［6］。釋放一系列致炎因子產生局部和全身性炎癥反應(稱繼發反應)。一般認為微生物感染及其抗原在類風濕性關節炎RA的發病機制中占主導地位，近年來證明細胞免疫更突出。在細胞免疫中T淋巴細胞對機體免疫穩定起著重要的調節作用。從本實驗可看出，白飯樹對胸腺和脾臟有抑制作用，減輕了AA小鼠的繼發性足腫脹，這可能與藥物的免疫調節有關，可進一步研究其細胞免疫調節機制。

4.2 從本實驗的結果看，白飯樹高、中質量濃度組的給藥劑量對佐劑性關節炎小鼠的足腫脹有明顯的抑制作用，低質量濃度組未顯示明顯的治療效果，可以以此給藥量來作為臨床用藥劑量參考依據。

4.3 白飯樹是深藏于民間的一味中草藥，它開發和利用的道路還有很長要走，在目前已有的研究中，藥理研究方面僅以水煎劑、醇提物為報道［3，7］，研究還較粗淺，許多藥理作用尚處于探索階段，毒理研究更是空白。如能進一步加強其藥理學研究，將其化學成分與藥理作用、毒理作用研究結合起來，闡明其藥效成分及其藥理作用，一定能提高其應用價值。

［1］中國植物志編輯委員會.中國植物志［M］.北京:科學出版社，1997:68-72.

［2］中華本草編委會.中華本草［M］.上海:上海科學技術出版社，1999:858-859.

［3］許實波，王正濂，趙金華，等.白飯樹水提物對實驗性肝損傷的保護作用［J］.中山大學學報論叢，1994，(6):54-57.

［4］周 健，丁長海，徐叔云，等.口服Ⅱ型膠原治療大鼠佐劑性關節炎的研究［J］.中國藥理學通報，1999，15(5):478.

［5］徐淑云，卞如濂，陳 修，等.藥理實驗方法學［M］.北京:人民衛生出版社，2006:920.

［6］王莘智，范伏元，賀選玲.當歸多糖對佐劑性關節炎足趾腫脹值及小鼠醋酸作用扭體反應的實驗研究［J］.中國免疫學雜志，2008，24(10):891-895.

［7］Tatematsu H，Mori M，Yang TH，et al.Cytotoxic principles of Securinega virosa:Virosecurinine and viroallosecurinine and related derivatives［J］.J Pharm Sci，1991，80(4):325-327.