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桃葉鴉蔥抗抑郁作用的實驗研究

2011-07-26 11:35:36李秀榮
中成藥 2011年9期
關鍵詞:小鼠實驗

楊 輝, 李秀榮

(1.河北北方學院藥學系,河北 張家口075000;2.北京石景山醫院藥劑科,北京100043)

桃葉鴉蔥為菊科鴉蔥屬植物桃葉鴉蔥Scorzonera sinensis Lipsch的根。廣泛分布于我國吉林、遼寧、內蒙古、河北等地。其功效為清熱解毒、解毒療瘡。主要用于治療外感風熱、疔毒惡瘡、乳癰等。近來證實鴉蔥屬植物有保肝[1]及抗腫瘤[2]的作用。文獻報道其化學成分主要有苯丙素及其苷、倍半萜及其苷、三萜及其苷和黃酮類化合物[3-6]。

本實驗室在研究其抗疲勞作用的時候,發現其可能有抗抑郁作用,因此,對桃葉鴉蔥不同藥效部位進行抗抑郁實驗研究。

1 材料與方法

1.1 動物 健康昆明種小鼠,雌雄兼用,體質量18~22 g,由中國醫學科學院北京藥物研究所提供,在實驗室常規條件下飼養,所有實驗在白天進行。

1.2 藥物及制劑 桃葉鴉蔥,采自河北省赤城縣,經河北北方學院中醫系教授趙恒成鑒定為桃葉鴉蔥Scorzonera sinensis Lipsch的根;鹽酸氯米帕明(Clomipramine hydrochloride),江蘇恩華藥業股份有限公司,批號20090902;其他試劑均為國產分析純。

1.3 方法

1.3.1 桃葉鴉蔥樣品制備 桃葉鴉蔥根10 kg,粉碎后用95%乙醇回流提取3次,提取液減壓濃縮得膏狀物760 g,膏狀物依次用石油醚,三氯甲烷,乙酸乙酯和正丁醇萃取,萃取液減壓濃縮,四部分干膏的量分別為 165 g,138 g,42 g,60 g。分別取乙酸乙酯和三氯甲烷萃取物適量,加N,N-二甲基甲酰胺溶解,聚山梨酯-80助溶,生理鹽水稀釋至含生藥為1.0 g/mL。

1.3.2 分組及給藥 在給藥前1 d,將小鼠放入模型裝置中5 min,按性別、體質量將不動時間在60~160 s內的小鼠,隨機分為陰性對照組、陽性藥物組、桃葉鴉蔥根乙酸乙酯部位和三氯甲烷部位組。每組10只小鼠,灌胃給藥,2次/d,連續21 d。陰性對照組給予空白溶劑,0.2 mL/10 g;陽性藥物組給予鹽酸氯米帕明(20.0 mg/kg),0.2 mL/10 g;桃葉鴉蔥根乙酸乙酯部位和三氯甲烷部位組各分為3組:高劑量組按0.4 mL/10 g體質量灌胃,中劑量組按0.2 mL/10 g體質量灌胃,低劑量組按0.1 mL/10 g體質量灌胃。

1.3.3 小鼠強迫游泳實驗 根據文獻[7]報道的方法,進行小鼠強迫游泳實驗,于末次灌胃給藥1 h后,將小鼠頭部朝下放入直徑16 cm、水深18 cm的游泳杯中,水溫(20±2)℃,觀察小鼠在6 min內的游泳情況,前2 min適應,用秒表記錄小鼠后4 min內游泳累積不動時間(不動即小鼠停止掙扎或呈漂浮狀態,僅四肢有輕微動作以保持小鼠頭部在水面)。

1.3.4 小鼠懸尾實驗 根據文獻[8]報道的方法,進行小鼠懸尾實驗,末次給藥1 h后,用膠布將小鼠尾在距尾尖1 cm處黏于懸尾箱(55 cm×40 cm×30 cm)支架上,使其頭部向下懸掛呈倒懸狀,其頭部離箱底約5 cm,1次懸掛2只小鼠,中間用隔板隔開,使其互不干擾。懸掛時間為6 min,適應2 min后,用秒表記錄后4 min內的累計不動時間(不動指小鼠除呼吸外所有肢體均不動)。

1.3.5 統計學處理 利用SPSS17統計軟件,進行單因素方差分析,組間差異采用Dunnett-t檢驗。

2 結果

結果見表1。桃葉鴉蔥乙酸乙酯部位0.4 mg/10 g,0.2 mg/10 g連續給藥7 d能明顯縮短強迫游泳實驗、小鼠懸尾實驗中小鼠的不動時間,表現出抗抑郁作用;桃葉鴉蔥三氯甲烷部位對強迫游泳實驗、小鼠懸尾實驗中小鼠的不動時間的影響與對照組相比,無顯著差異。

3 討論

抑郁癥是一類常見的情感性精神障礙、嚴重危害人類身心健康的常見精神疾病,列世界十大疾病第五位。

表1 桃葉鴉蔥提取物對小鼠強迫游泳及懸尾實驗的影響(±s)

表1 桃葉鴉蔥提取物對小鼠強迫游泳及懸尾實驗的影響(±s)

注:與正常組比較,**P <0.01。

/s空白 —組別 劑量/(g/10 g)強迫游泳不動時間/s懸尾實驗不動時間94.2 ±9.8 140.1 ±25.2鹽酸氯米帕明 2×10-4 27.9±12.6** 53.5 ±24.6**乙酸乙酯部位高劑量 0.4 30.4±11.9** 60.2±19.7**乙酸乙酯部位中劑量 0.2 37.3±10.7** 91.5±20.6**乙酸乙酯部位低劑量 0.1 61.9 ±12.2 108.6 ±21.2三氯甲烷部位高劑量 0.4 87.1 ±12.9 135.6 ±22.6三氯甲烷部位中劑量 0.2 79.3 ±14.6 126.9 ±19.7三氯甲烷部位低劑量0.1 90.8 ±8.5 110.4 ±30.5

本實驗結果表明,鹽酸氯米帕明(2×10-4g/10 g體質量)和桃葉鴉蔥乙酸乙酯部位高、中劑量(0.4 mg/10g,0.2 mg/10 g)組均可顯著縮短小鼠強迫游泳、懸尾不動時間(P<0.01),表現出了較強的抗抑郁作用,且抗抑郁作用與藥物的劑量密切相關,為其后在抗抑郁方面的進一步研究與臨床應用奠定了基礎。

本實驗僅對桃葉鴉蔥乙酸乙酯部位和三氯甲烷部位進行了抗抑郁作用的探索,對其它藥效部位的抗抑郁作用還有待研究,同時,對于桃葉鴉蔥抗抑郁作用的確切物質基礎及作用機制仍需進一步研究。

[1]李泉妙.鴉蔥中化學成分的研究及保肝藥理活性的初探[D].吉林:吉林大學,2008:42-44.

[2]王 斌,邱培菊,李國強,等.蒙古鴉蔥抗腫瘤活性成分[J].中國天然藥物,2009,7(4):283-286.

[3]宋桂全.桃葉鴉蔥的栽培[J].特種經濟動植物,2006,(4):23.

[4]王 斌,李國強,管華詩.蒙古鴉蔥揮發油成分元素的GC-MS和 ICP-MS分析[J].時珍國醫國藥,2007,18(10):2364-2365.

[5]Sotiris P,Prokopios M,Eleftherios K,et al.Three new dihydroisocoumarins from the Greek endemic species Scorzonera cretica[J].Nat Prod,2001,64:1585-1587.

[6]Zidorn C,Ellmerer E P,Sturm S,et al.Tyrolobibenzyls E and F from Scorzonera humilis and distribution of caffeic acid derivatives,lignans and tyrolobibenzyls in European taxa of the subtribe Scorzonerinae(Lactuceae,Asteraceae)[J].Phytochemistry,2003,63:61-67.

[7]Porsolt RD,Bertin A,Jalfre M.Behavioral despair in mice:a primary screening test for antidepressants[J].Arch Int Pharmaeodyn Ther,1997,229(2):327-328.

[8]Steru L,Chermat R,Thierry B,et al.The tail suspension test:a new method for sceening antidepressants in mice[J].Psychopharmacology(Berl),1985,85(3):367-370.

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