蘆根溶解尿結(jié)石的體外實(shí)驗(yàn)研究

楊淑玲，楊金元，羅南洪，庹 潯，盧愛軍，郭 惠，林 娜

（1.南昌大學(xué)理學(xué)院化學(xué)中心，南昌330031；2.江西省職業(yè)病醫(yī)院檢驗(yàn)科，南昌330006）

蘆根（別名：蘆茅根、葦根、蘆柴根、蘆菇根、順江龍、水蓈蔃、蘆通、葦子根、蘆芽根、甜梗子等）為禾本科植物蘆葦（Phragmites communis Trin）的新鮮或干燥根莖[1－2]。《中藥學(xué)》指出：蘆根其功效為清熱瀉火、止嘔利尿、能溶解結(jié)石[1]。臨床中藥辭典也指出：蘆根具有清熱生津、清瀉肺熱、清胃止嘔、利尿通淋之功效[2]，被選入許多溶石的方劑，如：蘆根排石湯[3]等。

尿石癥是我國常見的泌尿外科疾病之一。近年來，尿石癥的發(fā)病率不斷升高[4]。尿結(jié)石可分為：草酸鈣、磷酸鈣、磷酸鎂銨、尿酸結(jié)石、胱氨酸結(jié)石及其他結(jié)石等6類。一般以復(fù)合形式存在，草酸鈣與磷酸鈣的混合物占80～84%，磷酸鈣與磷酸鎂銨的混合物占6～9%，尿酸結(jié)石占6～10%，胱氨酸結(jié)石占1～2%，其他特殊結(jié)石占1%以下[5]。我國是3大結(jié)石高發(fā)區(qū)之一，泌尿系統(tǒng)結(jié)石發(fā)病率為1%～5%，南方地區(qū)高達(dá)5%～10%，每年新發(fā)病率150～200／10萬人，且有上升趨勢(shì)[4，6－7]。

結(jié)石病既影響身體健康，又影響工作和勞動(dòng)能力。尋找高效溶石的藥物，是許多科研工作者不斷探索的課題。本研究探索了蘆根在不同時(shí)間、不同濕度及維生素C和檸檬酸存在下的溶解尿結(jié)石的作用，旨在為開發(fā)蘆根藥用資源，提高蘆根的藥用價(jià)值，提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與藥物

YJ501型超級(jí)恒溫器（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠），美國VARIAN GTA 120原子吸收分光光譜儀。蘆根由南昌三點(diǎn)堂藥店提供，尿結(jié)石樣品由南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院泌尿外科提供。分析純CaCO3（廣東西隴試劑廠），分析純檸檬酸、維生素C（國藥集團(tuán)藥業(yè)股份有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 蘆根水提取液的制備

蘆根500 g加蒸餾水5 000 m L煮沸1 h，過濾；殘?jiān)诱麴s水4 000 m L煎煮30 min，過濾；合并過濾液。冰箱冷藏24 h，取上清液。下層液體過濾，合并上清液和過濾液，得蘆根水提取液2.5 L，（含蘆根生藥200 g·L－1），備用。

1.2.2 蘆根水提取液在不同時(shí)間溶解尿結(jié)石的作用

取0.5 L試劑瓶5只（編號(hào)：0、1、2、3、4），用移液管吸取蘆根水提取液100 m L（含蘆根生藥20 g），加入到各試劑瓶中，每瓶中同時(shí)放入尿結(jié)石樣品3 g（0號(hào)不放尿結(jié)石樣品），一直攪拌，100 r·min－1。除0號(hào)試劑瓶外，分別在0、1、2、3、4 h后，濾去尿結(jié)石樣品，得到試樣 A0.A1.A2.A3.A4.A5，待測(cè)Ca2＋濃度。

1.2.3 維生素C對(duì)蘆根水提取液溶石作用的影響

取0.5 L試劑瓶5只（編號(hào)：0、1、2、3、4），用移液管分別加入蘆根水提取液100 m L，每瓶中分別放入尿結(jié)石樣品3 g（0號(hào)不放進(jìn)尿結(jié)石樣品）和維生素C 0.5 g，置恒溫水浴上一直攪拌，100 r·min－1。除0號(hào)外，分別在0、1、2、3、4 h后濾去尿結(jié)石樣品，得到試樣D0、D1、D2、D3、D4，待測(cè)Ca2＋濃度。

1.2.4 檸檬酸對(duì)蘆根水提取液溶石作用的影響

取0.5 L試劑瓶5只（編號(hào)：0、1、2、3、4），用移液管分別加入蘆根水提取液100 m L，每瓶中分別放入尿結(jié)石樣品3 g（0號(hào)不放進(jìn)尿結(jié)石樣品）和檸檬酸0.5 g，一直攪拌，100 r·min－1。除0號(hào)外，分別在0、1、2、3、4 h后濾去尿結(jié)石樣品，得到試樣E0、E1、E2、E3、E4，待測(cè)Ca2＋濃度。

1.2.5 蘆根水提取液在不同溫度下的溶石作用

取0.5 L試劑瓶5只（編號(hào)：0、1、2、3、4），分別用移液管加入蘆根水提取液100 m L，每瓶中同時(shí)放入尿結(jié)石樣品3 g（0號(hào)不放進(jìn)尿結(jié)石樣品），在恒溫水浴上一直攪拌，100 r·min－1。溫度（室溫）分別控制在19、29、39、49、59℃，除0號(hào)外，分別在0、1、2、3、4 h后濾去尿結(jié)石樣品，得到試樣 B0、B1、B2、B3、B4，待測(cè)Ca2＋濃度。

1.2.6 Ca2＋濃度的測(cè)定

1.2.6.1 Ca2＋標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

在110℃干燥至恒重的基準(zhǔn)物質(zhì)CaCO3準(zhǔn)確稱取0.500 0 g，置于250 m L燒杯中，蓋以表面皿，加水潤(rùn)濕，再從燒杯嘴邊逐滴加入數(shù)毫升HCl至完全溶解，加熱至沸，用蒸餾水把可能濺到表面皿上的溶液洗入杯中，待冷卻后移入250 m L容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。相當(dāng)于CaCO32 g·L－1。

1.2.6.2 鈣標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

取標(biāo)準(zhǔn)鈣溶液（2 g·L－1）30、40、50、60、70、80 m L，進(jìn)行原子吸收光譜測(cè)定，制得鈣標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.6.3 各組Ca2＋濃度的測(cè)定

使用美國VARIAN GTA 120原子吸收分光光譜儀測(cè)定Ca2＋濃度。工作波長(zhǎng)：422.7 nm；工作電流：3 m A；狹縫：0.5 nm；空氣：11.00 L·min－1；乙炔：1.5 L·min－1。平行條件下測(cè)定3次，取平均值。對(duì)各組（不同時(shí)間組、維生素C組、檸檬酸組、不同溫度組）的試樣分別進(jìn)行Ca2＋濃度的測(cè)定。

2 結(jié)果

2.1 各組中蘆根水提取液溶解尿結(jié)石的量（按Ca2＋ mg·L－1計(jì) ）與時(shí)間的關(guān)系

蘆根水提取液中含 Ca2＋量平均為37.06 mg·L－1。不同時(shí)間條件下蘆根水提取液溶解尿結(jié)石時(shí)，3 h達(dá)到最高峰，溶解結(jié)石（按Ca2＋mg·L－1計(jì)）為5.66 mg·L－1，3 h后幾乎無變化。見表1。

不同溫度下蘆根水提取液溶解尿結(jié)石時(shí)，隨著溫度的升高，溶解量亦無明顯變化。見表2。

在維生素C存在條件下，蘆根水提取液溶解尿結(jié)石的量（按Ca2＋mg·L－1計(jì)）為7.37 mg·L－1；在檸檬酸存在條件下，蘆根水提取液溶解尿結(jié)石的量（按Ca2＋mg·L－1計(jì)）為5.81 mg·L－1。

說明維生素C和檸檬酸對(duì)蘆根水提取液溶解尿結(jié)石都有助溶作用，但維生素C的助溶作用更強(qiáng)。

表1 各組試樣中Ca2＋濃度的測(cè)定結(jié)果ρ／（mg·L－1）

表2 不同溫度組Ca2＋濃度的測(cè)定結(jié)果ρ／（mg·L－1）

2.2 各組中蘆根水提取液溶解尿結(jié)石的Ca2＋濃度變化曲線

各組中蘆根水提液溶解尿結(jié)石的Ca2＋濃度變化曲線見圖1。

圖1 各組C變化曲線

3 討論

根據(jù)醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)及流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，尿結(jié)石病患者比二十世紀(jì)初多十倍[7]。人類一直在努力改進(jìn)和提高治療結(jié)石的方法和技術(shù)，但因其復(fù)發(fā)率很高，常伴有并發(fā)感染，給患者帶來了極大的痛苦，嚴(yán)重時(shí)甚至危及患者的生命[8]。

尿結(jié)石屬中醫(yī)“石淋”范疇，多因感受外界六淫之濕邪或穢濁之氣，移熱下焦或嗜食肥甘厚味，釀生濕熱，蘊(yùn)結(jié)于腎及膀胱，致下焦?jié)駸幔蛞杭灏救站茫蛑须s質(zhì)結(jié)為結(jié)石，結(jié)石內(nèi)阻，氣機(jī)不暢，以致氣滯血瘀。故石淋以下焦?jié)駸狃鲎铻榛静C(jī)。早期多為實(shí)證，治以清熱利濕、通淋排石、理氣通降行瘀[9]。蘆根具有溶解尿結(jié)石的功能，有利尿通淋之功效。

蘆根中含有多種化學(xué)成分，如：阿魏酸、多糖、甾體化合物、萜類化合物、脂肪酸等[10]，其中萜類化合物可能有溶解泌尿結(jié)石的作用。在治療泌尿結(jié)石時(shí)，除了要溶解結(jié)石外，還要保護(hù)腎組織，所以，蘆根溶解泌尿結(jié)石，只是治療結(jié)石的一個(gè)方面，還必須用保護(hù)腎臟藥物，療效才更佳。根據(jù)結(jié)石成因的基因?qū)W說，因目前對(duì)草酸鈣結(jié)石有關(guān)的基因研究還不夠深入，現(xiàn)在還難以從這方面有效地預(yù)防及防止復(fù)發(fā)。

本研究顯示：在不同時(shí)間條件下，蘆根水提取液溶解尿結(jié)石時(shí)，3 h達(dá)到最高峰，溶解尿結(jié)石（Ca2＋計(jì)）5.66 mg·L－1，3 h后幾乎無變化；不同溫度下蘆根水提取液溶解尿結(jié)石時(shí)，隨著溫度的升高，溶解量無明顯變化。結(jié)果還表明，維生素C和檸檬酸對(duì)蘆根水提取液溶解尿結(jié)石都有助溶作用，但維生素C的助溶作用更強(qiáng)。

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