生殖器皰疹患者超氧化物歧化酶活力及自然殺傷細(xì)胞表達(dá)的檢測

鄒明華 李楚潮 劉臘鳳 劉瓊芬

生殖器皰疹(genital herpes，GH)是常見的性傳播疾病之一，由I型單純皰疹病毒(Herpes Simplex Virus type 1，HSV-1)或Ⅱ型單純皰疹病毒(HSV-2)引起的一種性傳播疾病，臨床主要由HSV-2感染引起［1］。GH發(fā)病率逐年增高，易反復(fù)發(fā)作，給患者和社會(huì)帶來沉重的心理和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［1，2］。GH的發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，有研究顯示HSV病毒感染機(jī)體后，引發(fā)機(jī)體的細(xì)胞免疫紊亂及氧化應(yīng)激狀態(tài)失衡，主要是T細(xì)胞水平表達(dá)低下、Th細(xì)胞及Tc細(xì)胞分化偏態(tài)［2，3］。本研究探討GH患者氧化應(yīng)激狀態(tài)與細(xì)胞免疫水平，以探討GH的發(fā)病機(jī)制，可用于指導(dǎo)GH的治療、判斷預(yù)后。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集24例GH患者，所有患者來自我院2010年8月至2011年1月性病科門診，診斷符合2000年我國衛(wèi)生部疾病控制司和全國性病麻風(fēng)病控制中心聯(lián)合頒布的GH診斷標(biāo)準(zhǔn)。24例GH患者中男16例，女8例，年齡18～40歲(平均23.6歲)，病程2 d～2年，平均病程10.1個(gè)月。患者就診前3個(gè)月內(nèi)均未系統(tǒng)性應(yīng)用免疫抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑、皮質(zhì)類固醇制劑。收集24例健康體檢者作為正常對照，其中男14例，女10例，年齡18～36歲(平均22.9歲)，患者與健康對照者年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 SOD的檢測 早晨空腹肘靜脈取血2 ml，分離血清待測。采用透射比濁法，SOD標(biāo)準(zhǔn)試劑合由南京建成生物研究所提供，檢測方法參照試劑說明書和文獻(xiàn)進(jìn)行［3］。

1.2.2 NK細(xì)胞表達(dá)的流式細(xì)胞術(shù)分析 取GH患者肝素抗凝血100 ul，加入淋巴細(xì)胞檢測試劑25 ul，混勻，室溫避光染色20 min;加入2 ml紅細(xì)胞裂解液，室溫避光放置10 min;1500 r/min離心5 min棄上清液，加磷酸鹽緩沖液(PBS)2 ml，混勻;1500 r/min離心5 min棄上清液，加2%多聚甲醛PBS 500 ml固定，放置4℃ ～8℃冰箱待檢測。……