淺談中藥鑒別依據及方法

王雪蓮

一、色譜法

色譜法又稱層析法，是利用中藥化學成分在流動相與固定相中的分配系數差異而使各組分分離，并根據分離所得色譜圖進行分析鑒定的一種方法。包括:薄層色譜法(TLC)、薄層掃描法(TLCS)、高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、氣質聯用法(GCMS)等。色譜法是20世紀初產生，于60年代開始用于中藥分析，既能對中藥所含化學成分進行定性分析，又能對成分進行定量分析，經逐步完善最后列入1977年版中國藥典，且在以后各版藥典的中藥和成方制劑中的應用比例迅速上升，成為中藥鑒別最主要的方法之一。

二、光譜法

鑒別中藥的原理:選擇某一波段波長，以此通過中藥的粉末或提取液，測定中藥對這一波段波長的吸收并記錄其吸收光譜。光譜法包括:紫外光譜法(UV)、導數光譜法(DS)、紅外光譜法(IR)、熒光光譜法(FP)、核磁共振波譜法(NMR)、質譜法(MS)。

三、色譜-光譜聯用分析法

色譜-光譜聯用分析法是將色譜和光譜分析儀器聯用，通過對實驗數據的綜合分析，用以評價中藥質量的一種方法。本法集中了色譜技術高分離效能和光譜技術高鑒別能力的特點，廣泛用于中藥化學成分或組分的分離與含量測定。常用的方法有色譜-質譜、光譜-質譜和質譜-質譜等。如:氣相-質譜(GCMS)、高效液相-質譜(HPLC-MS)、紅外-質譜(IR-MS)和質譜-質譜(MS-MS)等。

四、中藥指紋圖譜鑒定技術

中藥指紋圖譜鑒定技術是借用了法醫學的指紋鑒定概念，但卻不是簡單的概念重復。中藥指紋圖譜鑒定是指中藥經適當處理后，將中藥中的部分化學信息(已知的活性成分、已知的非活性成分、部分未知成分)，通過一定的方法(TLC、HPLC、GC、IR 、UV)和手段(譜圖)進行表達，并對其進行計算、分析、評價，以技術參數和指紋特征加以說明的過程。

五、熱分析法

熱分析法是研究樣品及參比物在相同環境下等速加溫時，兩者的溫度與時間或與加熱溫度的變化關系的方法。分析的結果用熱譜圖表示，比較兩者熱圖譜的差異，以達鑒別中藥的目的。按分析內容分為:熱重量法(熱量法TG)、差示熱量分析法(差熱分析法DTA)、差示掃描量熱法(差動法DSC)。在中藥的鑒別分析中，差熱分析法最為常用。

六、分子生物學技術

聚合酶鏈式反應(PCR):是1985年發明的一種模擬自然DNA復制過程的快速體外DNA片段擴增技術，又稱無細胞分子克隆技術，獲得1993年諾貝爾化學獎。該技術的問世，為中藥鑒別提供了一條新途徑。PCR能將藥材中提取的痕量的DNA擴增到足以供檢測和分析的數量。在PCR的基礎上延伸出的鑒定方法有很多種，如 RFLP、RAPD、AP-PCR、AFLP、SSR、DNA測序等。其中，隨機擴增多態性DNA(random amplified polymorphic DNA ，RAPD)最為普通，它無需專門設計擴增反應引物，也無須預先知道被研究生物基因組的核苷酸序列，尤其是在目前絕大多數動植物中藥沒有基因組DNA資料的情況下，RAPD技術有很強的通用性，它最適于種下居群(品種)間的差異，也適用于種間和個體間。DNA分子遺傳標記技術屬于直接分析生物的基因形的方法，與傳統的方法相比，具有快速、準確、專屬性強、重現性好等特點。反映的是中藥樣品之間的DNA水平差異，即最基本的遺傳差異，不受中藥基源物種生長、發育、生態、環境、采收、加工、貯藏等因素影響，因而能給出樣品真偽最精確的直接判定。但因一般的中藥提取(尤其是有機溶劑提取)物中極少有DNA存在，所以DNA分子標記在中成藥的應用上有一定限制。僅用于有原藥材存在或被提取物中有DNA存在的情況。

七、中藥生物效應鑒定法

在中醫藥理論指導下，以中藥的歸經、功能主治為線索，通過高效液相、液-質聯用、氣-質聯用等現代分離分析手段和放射性配體，受體結合分析法研究中藥活性成分對機體生物分子(受體)的作用，在此基礎上建立國際承認的中藥質量評價、控制方法，方法的表征體現為有效成分含量或有效成分半數有效濃度EC50值、半效抑制濃度IC50值、表觀解離常數Ki值。

八、化學模式識別法

模式識別在六十年代末被引入到化學領域。它基于一個十分直觀的基本假設，即“物以類聚”:同類或相似的“樣本”間的距離應較近，不同類的“樣本”間的距離應較遠，這樣就可以根據各樣本間的距離或距離的函數來判別、分類，并利用分類結果預報未知。模式識別法中的主成分分析法(PCA)、SIMCA分類法、貝葉斯(Bayes)判別法、聚類分析法(CA)、模糊動態聚類分析法、人工神經網絡技術(ANN)等，另外還有計算機圖像分析技術(CIA)、導數譜線組法(DSUVG)等，這些方法通常是根據采集到的藥材總成分提取物的大量光譜或色譜數據以及某些經量化后的指標，運用計算機對這些數據進行處理，去粗取精，去偽存真，從數據分析中獲取能用于藥材分析鑒別的有用信息，然后以計算機代替人對藥材進行分析、鑒別、判斷，進行分類和鑒別真偽。

結論:

中藥是祖國藥學的寶貴遺產和財富，也是中藥工作者應繼承和發掘的基礎。隨著更多新方法、新技術的發現、發展和使用，使中藥鑒定的方法不斷創新，各種新的鑒別手段和方法的出現，彌補了傳統中藥鑒定方法和技術的不足，使中藥品種鑒定與質量評價從樸素的認識論向客觀化、科學化的方法論方向邁出了關鍵的一步，中藥鑒定正朝著標準化、科學化和信息化的方向穩步發展。

1 陳惠紅.幾種全草類中藥及其混淆品的鑒別.淮海醫學，2009，3:258-258

2 張建忠，欒麗，王艷春.淺談中藥的火試法鑒別.中國實用醫藥，2009，5"213-213

3 徐維成.幾種中藥鑒別方法.中原醫刊，1982:04.

4 張漢明，許鐵峰，秦路平，等.中藥鑒別研究的發展和現代鑒別技術介紹，2000，22(1)R2.