血清Ghrelin和瘦素水平與幽門螺桿菌感染的關系研究

郁海靜，張 靜，丁士剛，楊雪玲，劉琳娜，王曄

幽門螺桿菌 (Helicobacter pylori，Hp)于1982年由澳大利亞學者Warren和Marshall首先從慢性活動性胃炎患者的胃黏膜中分離出，多種細菌因子及毒力因子參與了Hp相關疾病的發生、發展，目前已經確認這種細菌和慢性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關淋巴組織淋巴瘤和胃腺癌密切相關。Ghrelin是1999年由Kojima等［1］發現的由28個氨基酸組成的腦腸肽，主要來源于胃腸道，是生長激素促分泌激素受體的內源性配體，具有促進與調節生長激素分泌的作用，同時還具有增強食欲、減少脂肪利用、增加體質量、維持能量正平衡以及控制胃動力、促進胃酸分泌等多種生物學作用。瘦素是肥胖基因編碼的蛋白質，主要在脂肪組織中生成和分泌，胃黏膜也有分泌［2］。瘦素通過抑制食欲、增加能量代謝而維持體質量［3］。Ghrelin與瘦素共同參與調節機體的能量代謝，兩者作用相互補充又相互拮抗［4］，兩者在胃黏膜都有分泌。由Hp介導的炎癥反應可損害胃黏膜細胞，包括分泌Ghrelin及瘦素的細胞［5］。目前關于Hp感染狀況與血清Ghrelin及瘦素水平關系的研究結論尚有爭議。本研究通過分析血清Ghrelin和瘦素水平與Hp感染的關系，進一步探討Hp感染對血清Ghrelin和瘦素的影響，明確其臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取于2009年4—7月于北京大學第三醫院進行胃鏡檢查的患者116例，其中男56例，女60例，年齡16～79歲，平均 (44.3±15.1)歲。所有患者除外肢端肥大癥、骨質疏松、侏儒癥、糖尿病以及合并嚴重感染等影響激素代謝的疾病及應激。記錄患者的一般情況，包括性別、年齡、身高、體質量及體質指數 (BMI)。

1.2 血清Ghrelin和瘦素的檢測方法 所有患者于胃鏡檢查前晨起7～10時空腹抽取靜脈血2 ml，注入血清分離管中，室溫1 000 g離心15 min，分離血清，置于－20℃的冰箱內備檢。Ghrelin和瘦素檢測采用ELISA法，應用商品化的試劑盒 (Human Ghrelin/Leptin ELISA Kit，美國Esblab公司)，嚴格按照試劑盒說明進行操作。

1.3 Hp感染的判定方法 所有患者在進行胃鏡檢查的同時于胃竇和胃體至少分別鉗取一塊組織，固定于10%福爾馬林溶液中，常規石蠟包埋，5μm連續切片，行Warthin－Starry(WS)染色，判定Hp感染狀況。血清Hp抗體采用ELISA法測定，應用商品化的試劑盒 (抗Hp抗體檢測試劑盒，北京貝爾生物工程有限公司)，嚴格按照試劑盒說明進行操作。同一病例中胃竇和胃體黏膜中有任何一項WS染色陽性，同時血清Hp抗體陽性則判定為Hp感染。

1.4 統計學方法 采用SPSS 11.5統計軟件進行統計學分析。正態分布的計量資料，兩組間比較采用兩獨立樣本均數的t檢驗;非正態分布的計量資料，兩組間比較采用非參數檢驗(Mann－Whitney U檢驗)。計數資料采用χ2檢驗。相關分析采用Spearman相關分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同Hp感染情況下血清Ghrelin、瘦素水平的比較 Hp陽性患者血清Ghrelin水平低于Hp陰性患者，Hp陽性患者血清瘦素水平亦低于Hp陰性患者，但兩組患者的血清Ghrelin、瘦素水平間差異均無統計學意義 (P＞0.05，見表1)。

表1 不同Hp感染情況下血清Ghrelin、瘦素水平的比較Table1 Comparison of serum Ghrelin and leptin levels between different Hp status

2.2 不同性別患者血清Ghrelin、瘦素水平的比較 男性患者的血清Ghrelin水平低于女性患者，兩組間差異有統計學意義(P=0.000);男性患者的血清瘦素水平低于女性患者，但兩組間差異無統計學意義 (P=0.671，見表2)。

表2 不同性別患者血清Ghrelin、瘦素水平的比較Table2 Comparison of serum Ghrelin and leptin levels between males and females

2.3 不同性別患者Hp感染對血清Ghrelin、瘦素水平的影響所入選病例中Hp陽性患者75例，其中男39例，女36例;Hp陰性患者41例，其中男17例，女24例，Hp陽性組和Hp陰性組患者性別間差異無統計學意義 (χ2=1.179，P=0.278)。由表3、4可見，無論男性或者女性，不同Hp感染情況下血清Ghrelin、瘦素水平間差異均無統計學意義 (P＞0.05)，Hp感染與否對血清Ghrelin、瘦素水平均沒有影響。

表3 男性患者不同Hp感染情況下血清Ghrelin、瘦素水平的比較Table3 Comparison of serum Ghrelin and leptin levels between different Hp status in males

表4 女性患者不同Hp感染情況下血清Ghrelin、瘦素水平的比較Table4 Comparison of serum Ghrelin and leptin levels between different Hp status in females

2.4 不同BMI患者血清Ghrelin、瘦素水平的比較 所入選病例中BMI＜24.0 kg/m2的患者77例，BMI≥24.0 kg/m2的患者39例。BMI＜24.0 kg/m2組的血清Ghrelin水平高于BMI≥24.0 kg/m2組，差異有統計學意義 (P=0.003);而BMI＜24.0 kg/m2組的血清瘦素水平則低于BMI≥24.0 kg/m2組，差異有統計學意義 (P=0.000，見表5)。

表5 不同BMI患者血清Ghrelin、瘦素水平的比較Table5 Comparsion of serum Ghrelin and leptin levels between different BMI

2.5 不同BMI患者Hp感染對血清Ghrelin、瘦素水平的影響Hp陽性患者75例，平均BMI為 (22.56±3.2)kg/m2;Hp陰性患者41例，平均BMI為 (23.47±3.8)kg/m2，Hp陽性組和Hp陰性組的BMI間差異無統計學意義 (t=1.310，P=0.194)。由表6、7可見，無論患者的BMI＜24.0 kg/m2還是BMI≥24.0 kg/m2，不同Hp感染情況下血清Ghrelin、瘦素水平間差異均無統計學意義 (P＞0.05)，Hp感染與否對血清Ghrelin、瘦素水平均沒有影響。

2.6 不同Hp感染情況下血清Ghrelin和瘦素的相關性 Hp陽性組血清Ghrelin和瘦素水平的Spearman相關系數為－0.088，P值為0.455;Hp陰性組血清Ghrelin和瘦素水平的Spearman相關系數為－0.217，P值為0.173。無論Hp感染與否，血清Ghrelin和瘦素水平之間均無相關性。

表6 BMI＜24.0 kg/m2組患者在不同Hp感染情況下血清Ghrelin、瘦素水平的比較Table6 Comparison of serum Ghrelin and leptin levels between different Hp status in BMI＜24.0 kg/m2 group

表7 BMI≥24.0 kg/m2組患者在不同Hp感染情況下血清Ghrelin、瘦素水平的比較Table7 Comparison of serum Ghrelin and leptin levels between different Hp status in BMI≥24.0 kg/m2 group

3 討論

Ghrelin是由proghrelin分化成熟的一種28肽胃腸激素，同時在腦內神經系統表達，因此屬于腦腸肽家族。Ghrelin主要來源于胃腸道，其次為十二指腸［6］。Ghrelin是生長激素促分泌激素受體的內源性配體，具有促進與調節生長激素分泌的作用，還具有增強食欲、減少脂肪利用、增加體質量、維持能量正平衡的調節能量代謝作用。近年來研究發現，Ghrelin也能影響胃腸動力及胃酸分泌，并有一定的黏膜保護作用。目前公認Hp為最常見的胃黏膜損害因子，與慢性胃炎、消化系潰瘍、胃腺癌等多種疾病密切相關，并對胃酸分泌有一定的影響，根除Hp后可增加胃酸分泌。目前關于Hp感染與血清Ghrelin水平關系的研究結果仍未明確，可能與病例選擇、檢測手段、人群差異、營養狀態和生活飲食習慣有關。本研究結果顯示，Hp陽性患者血清Ghrelin水平低于Hp陰性患者，但兩者間差異無統計學意義，提示Hp感染狀態與血清Ghrelin水平無關。血清Ghrelin主要由胃黏膜泌酸細胞分泌［7］，在Hp感染時，胃黏膜產生Ghrelin細胞減少，從而導致血清Ghrelin水平下降［8］，根除 Hp后血清 Ghrelin水平明顯上升［9］，另有研究發現血清Ghrelin水平與Hp感染狀況無關［10］。而Stec－Michalska等［11］研究發現，Hp感染增加胃黏膜 Ghrelin水平，CagA陰性菌株感染者血清Ghrelin水平有升高趨勢，而CagA和VagA是Hp毒力的主要標志，由此推測血清Ghrelin水平可能與感染Hp的細菌毒力有關。而本研究僅限于判定是否存在Hp感染，并未對細菌毒力進行分析，可能影響研究結果。

瘦素是由脂肪細胞分泌的激素，胃黏膜細胞也可以產生，其分泌與機體脂肪含量呈負相關，血清瘦素水平可以反映機體脂肪儲備情況。瘦素通過抑制食欲、減少攝食、增加能量代謝而維持體質量平衡［12］，胃黏膜細胞分泌的瘦素對胃腸道具有重要作用。本研究未發現Hp的感染狀況與血清瘦素水平相關。Roper等［10］的研究結果顯示，Hp陽性患者血清瘦素水平明顯低于Hp陰性患者，差異有統計學意義;Nishi等［2］的研究發現血清瘦素水平與Hp感染狀況無關，而胃黏膜瘦素水平與Hp感染狀況有關，Hp陽性患者明顯高于Hp陰性患者，差異有統計學意義，由此推論胃黏膜細胞分泌的瘦素可能作用于胃黏膜局部，并不影響血清瘦素水平。為進一步明確胃黏膜細胞分泌瘦素的機制及與Hp感染狀況的關系，需要進行胃液中瘦素水平檢測及胃黏膜組織瘦素mRNA檢測。

Ghrelin和瘦素共同作用于下丘腦弓狀核神經肽Y神經元和agouti相關肽神經元，Ghrelin和瘦素的作用相互補充又相互拮抗，二者共同參與調節機體的能量代謝［13］。有研究表明，肥胖者血漿Ghrelin濃度低于體質量正常者，而血漿瘦素濃度增高，并且與 BMI相關［14］。本研究中發現，在 BMI＜24.0 kg/m2和BMI≥24.0 kg/m2兩組中血清Ghrelin和瘦素水平有明顯差異，在BMI＜24.0 kg/m2時，血清Ghrelin水平高，而瘦素水平低;當BMI≥24.0 kg/m2時，血清Ghrelin水平低，而瘦素水平高;在不同BMI情況下血清Ghrelin和瘦素水平與Hp感染狀況無關。由此可見，血清Ghrelin和瘦素水平與BMI有關，這可能是血清Ghrelin和瘦素在調節機體能量代謝、維持能量平衡的一種適應性反應，而不受Hp感染狀況的影響。

Ghrelin和瘦素在調節機體能量代謝中的作用是相反的，而本研究結果顯示無論Hp感染與否，血清Ghrelin和瘦素水平間無相關性。Roper等［10］的研究發現，在Hp陽性患者中胃液Ghrelin和瘦素水平存在正相關，而在Hp陰性患者中胃液Ghrelin和瘦素水平無相關性，由此推測血清Ghrelin和瘦素水平關系可能受其他內分泌激素的影響，而Hp感染可能僅影響胃局部的Ghrelin和瘦素水平。

本研究結果顯示，血清Ghrelin水平與性別有關，男性患者低于女性患者，但血清瘦素水平與性別無關，不同性別患者的血清Ghrelin和瘦素水平與Hp感染狀況無關，與Chuang等［15］的研究結果一致，但與 Pacifico等［16］的研究結果相反。我們推測不同性別患者血清Ghrelin水平差異可能與男性、女性患者性激素水平差異、營養狀況、脂肪分布、種族等多種因素有關，而不受Hp感染狀況的影響，有待于進一步研究。

本研究結果顯示，血清Ghrelin、瘦素水平與Hp感染狀況無關，循環Ghrelin和瘦素水平受多種因素影響，可能不能真實反映在Hp感染的不同狀況下胃黏膜Ghrelin和瘦素的表達情況，因此我們需要進一步檢測胃黏膜組織中Ghrelin和瘦素的表達水平，同時還需要對Hp的細菌毒力進行分析，以進一步明確Hp的感染狀況與Ghrelin和瘦素水平的關系。

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