HPLC測定不同方法提取的山黧豆中β-ODAP

趙興秀，何義國，鄧靜，方春玉，孟延發

（1.四川理工學院 生物工程系，四川 自貢 643000；2.四川大學 生命科學學院，四川 成都 610064）

山黧豆（Lathyrus sativus L.）屬豆科蝶形花亞科山黧豆屬一年生作物，在全世界有廣泛的種植，是人畜都可食用的豆科植物。其對環境具有廣泛的適應性：耐寒、耐旱、抗蟲害，尤其在干旱年份，在其他豆類及谷物都絕收時，它仍能維持一定的產量，是適合于干旱、半干旱地區種植的作物。山黧豆營養豐富，種子中蛋白質含量高達25%～28%，近似于小麥2倍，淀粉含量為55%～61%。而且蛋白質水解產物含有哺乳動物所需的17種主要的α-氨基酸[1]，所以是比較理想的高蛋白豆科飼料作物。但山黧豆籽實內含有一種非蛋白質氨基酸β-N-草酰基-α，β－二氨基丙酸（β－N－oxalyl－α，β－diaminopropionic，簡稱β-ODAP），是一種主要的毒素[2-3]，長期食用可引起下肢癱瘓，稱為山黧豆中毒，從而妨礙了山黧豆的推廣和種植。更進一步的研究顯示，山黧豆中還存在著β－ODAP的另一種異構體，α－N－草酰 基 －α，β － 二 氨 基 丙 酸 （α －N －oxalyl－α，β －diaminopropionic，簡稱α-ODAP），其中β-ODAP有毒性，α-ODAP無毒性或者毒性較弱，在水溶液中加熱可使這兩種異構體互相轉化[4]。

為了充分利用這一耐旱作物的高營養,國內外學者已經在β-ODAP的分離鑒定、化學及生物合成、分析方法、毒理學及代謝機理等方面做了大量工作[5]。這些工作都涉及到大量樣品中β-ODAP和無毒的α-ODAP的分析測定。因此，研究和建立快速、方便、準確的提取和分析方法非常必要。目前，對β-ODAP的測定方法已有不少報道[5]。如用6-氨基喹啉-N-羥丁二酰亞胺氨基甲酸酯（AQC）[6]、異硫氰酸苯酯（PITC）[7]、9－芴基甲基氯甲酸酯（FMOC）[8]等試劑柱前衍生液相色譜（HPLC）法。……