幾種紅棗中生物活性物質環磷酸腺苷的含量分析

摘要：紅棗（Ｚｉｚｙｐｈｕｓ ｊｕｊｕｂａ）中含有豐富的生物活性物質環磷酸腺苷，以寧夏幾種特色紅棗（靈武長棗、同心圓棗和中寧圓棗）為研究對象，采用索氏提取法提取、高效液相色譜測定其中的環磷酸腺苷，并與山東大棗、陜北灘棗進行比較，結果發現，紅棗中環磷酸腺苷的含量由高到低依次為：靈武長棗（３３５．７ μｇ／ｇ）、中寧圓棗（１６９．０ μｇ／ｇ）、山東大棗（１６８．２ μｇ／ｇ）、陜北灘棗（１４０．８ μｇ／ｇ）、同心圓棗（１３９．５ μｇ／ｇ），研究結果為紅棗優良品種選育及進一步深加工等提供一定的參考。

關鍵詞：紅棗（Ｚｉｚｙｐｈｕｓ ｊｕｊｕｂａ）；環磷酸腺苷；提取；高效液相色譜

中圖分類號：Ｓ６６５．１；Ｏ６５７．７＋２ 文獻標識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０11）23－4955-03

Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｏｆ ｃＡＭＰ ｆｒｏｍ Ｓｅｖｅｒａｌ Types of Ｊｕｊｕｂｅｓ

ＺＨＡＯ Ｔａｎｇａ，ＨＡＯ Ｆｅｎｇ－ｘｉａｂ，ＹＡＮＧ Ｍｉｎ－ｌｉｂ

（ａ． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ； ｂ．Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｅｎｅｒｇｙ Ｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５００２１，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｊｕｊｕｂｅ was ｒｉｃｈ ｉｎ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｏｆ ｃＡＭＰ． Sｅｖｅｒａｌ Ｎｉｎｇｘｉａ ｊｕｊｕｂｅｓ（Ｌｉｎｇｗｕ ｌｏｎｇ ｊｕｊｕｂｅ， Ｔｏｎｇｘｉｎ ｒｏｕｎｄ ｊｕｊｕｂｅ ａｎｄ Ｚｈｏｎｇｎｉｎｇ ｒｏｕｎｄ ｊｕｊｕｂｅ） were selected as the study objects． Ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｓｏｘｈｌｅｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｃＡＭＰ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ． Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ Ｓｈａｎｄｏｎｇ ｂｉｇ ｊｕｊｕｂｅ ａｎｄ Ｓｈａｎｂｅｉ ｊｕｊｕｂｅ， ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｃＡＭＰ ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｊｕｊｕｂｅ ｗａｓ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ： Ｌｉｎｇｗｕ ｌｏｎｇ ｊｕｊｕｂｅ（３３５．７ μｇ／ｇ） ＞ Ｚｈｏｎｇｎｉｎｇ ｒｏｕｎｄ ｊｕｊｕｂｅ （１６９．０ μｇ／ｇ） ＞ Ｓｈａｎｄｏｎｇ ｂｉｇ ｊｕｊｕｂｅ （１６８．２ μｇ／ｇ） ＞ Ｓｈａｎｂｅｉ ｊｕｊｕｂｅ （１４０．８ μｇ／ｇ） ＞ Ｔｏｎｇｘｉｎ ｒｏｕｎｄ ｊｕｊｕｂｅ （１３９．５ μｇ／ｇ）． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｍａｙ ｂｅ ｂｅｎｅｆｉｃｉａｌ ｔｏ ｑｕａｌｉｔｙ ｖａｒｉｅｔｙ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｒｔｈｅｒ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｒｅｓｅａｒｃｈ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： jｕｊｕｂｅ； ｃＡＭＰ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ； ＨＰＬＣ

紅棗（Ｚｉｚｙｐｈｕｓ ｊｕｊｕｂａ Ｍｉｌｌ．）又名中華大棗、大棗和華棗，是鼠李科棗屬植物棗樹的果實［１］。紅棗是藥食同源食品，不僅含有豐富的營養成分，如蛋白質、脂肪、氨基酸及多種微量元素等［２－４］，同時，紅棗還是一種重要的中藥，含有很多藥效成分，其中，環磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）在大棗果肉中的含量為１０～３００ ｎｍｏｌ／ｇ，是所有已測動植物材料中最高的品種，比一般動植物材料中環磷酸腺苷含量高數千至數萬倍［５］，ｃＡＭＰ是核苷酸的衍生物，為蛋白激酶致活劑，是有機體中廣泛存在的一種重要的生理活性物質，頗具開發價值［６］。

寧夏屬于紅棗的傳統栽培區，靈武長棗、同心圓棗和中寧圓棗等地方品種已有近千年的栽培歷史，經長期自然選擇，形成了獨具特色的區域優良品種。本試驗以靈武長棗等特色優勢品種紅棗為研究對象，分析不同品種紅棗中ｃＡＭＰ的含量，并與山東大棗、陜北灘棗作比較，為紅棗優良品種選育及進一步深加工等提供一定的參考。

１ 材料與方法

１．１ 材料

寧夏紅棗分別采自寧夏靈武、同心、中寧三個縣市，山東大棗采自山東濰坊市，陜北灘棗采自陜西榆林市，樣品洗凈、放入恒溫箱烘干（６０ ℃）、去核、粉碎、過篩（４０目）、標號、裝入保鮮袋密封貯于冰箱中備用。

環磷酸腺苷標準品（中國生物制品鑒定所），甲醇為色譜純，磷酸二氫鉀為分析純（天津市科密歐化學試劑有限公司），實驗室用水為超純水。

１．２ 儀器

ＵＶ－２４５０紫外—可見分光光度儀（日本島津公司）；Ａｇｉｌｅｎｔ １１００高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；ＫＡ－２５０ ＤＥ型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；ＷＰ７００Ｐ２１微波爐（佛山市順德區格蘭仕微波爐電器有限公司）；索氏提取器（北京欣維爾玻璃儀器有限公司）；Ｌ／Ｌ-Ｓ型電子天平（上海梅特勒－托利多儀器有限公司）；ＲＥ－５２ＡＡ型旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）；ＳＨＢ－Ⅲ型循環水式多用真空泵（鄭州長城工貿有限公司）；ＤＺＦ－６０２０電熱干燥箱（鞏義市英峪予華儀器廠）。

１．３ 方法

１．３．１ 標準溶液的制備 準確稱取２．１00 0 ｍｇ環磷酸腺苷標準品，用少量甲醇溶解，定容至１０ ｍＬ，搖勻，即為０．２１０ ０ ｍｇ／ｍＬ的環磷酸腺苷標準溶液，備用。

１．３．２ ＨＰＬＣ檢測條件 取上述環磷酸腺苷標準溶液，檢測波長為２５８ ｎｍ，流動相：甲醇∶磷酸二氫鉀溶液（０．０５ ｍｏｌ／Ｌ）＝１０∶９０；流速：１．０ ｍＬ/ｍｉｎ；進樣量：１０ μＬ。

２ 結果與分析

２．１ 環磷酸腺苷標準曲線的繪制

分別取０．０５、０．１０、０．２５、０．５０和２．５０ ｍＬ的環磷酸腺苷標準液于５只試管中，加甲醇定容至１０ ｍＬ，采用高效液相色譜儀定量分析，以環磷酸腺苷含量為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制環磷酸腺苷標準曲線。得到環磷酸腺苷濃度Ｃ與吸光度Ａ關系曲線的回歸方程式：ｙ＝１９．４８６ｘ＋２７．２１７，Ｒ２=０．９９９ ３，環磷酸腺苷標準溶液標準曲線如圖１所示：

２．２ 提取方法的確定

稱取一定量的紅棗，分別采用不同的提取方法（冷浸法、冷浸加超聲法、熱回流法、索氏提取法、微波法和超聲法）進行提取，用高效液相色譜儀測定不同提取方法所得提取液中的環磷酸腺苷含量，確定最佳的提取方法，不同提取方法環磷酸腺苷提取率比較見圖２。因此，本試驗選擇索氏提取法作為紅棗中環磷酸腺苷的提取方法。

２．３ 提取時間的確定

考察不同提取時間對提取率的影響，分別提取１、２、４、６、８、１２和１４ ｈ，用高效液相色譜儀測定各提取液中環磷酸腺苷的含量，由圖３可知在提取時間為１２ ｈ時提取液中環磷酸腺苷含量趨于穩定，即１２ ｈ為最佳的提取時間。

２．４ 提取工藝參數的確定

在確定提取方法之后，確定提取溶劑、料液比、提取溫度和提取次數為主要影響因素，以環磷酸腺苷提取率為主要考察指標，確定了最佳的提取工藝：提取溶劑為水，料液比為１∶４０，提取溫度為１２０ ℃，提取時間為１２ ｈ。

２．５ 樣品中cＡＭＰ含量的測定

采用索氏提取法在最佳提取工藝下提取，高效液相色譜法測定寧夏地區幾種特色紅棗（靈武長棗、同心圓棗、中寧圓棗）及陜北灘棗、山東大棗樣品中環磷酸腺苷的含量，比較其品種、產地對紅棗中生物活性物質環磷酸腺苷的影響，環磷酸腺苷標準品及紅棗樣品色譜圖見圖４和圖５所示，不同品種紅棗中環磷酸腺苷含量比較結果如圖６所示。

３ 小結與討論

不同品種的紅棗中環磷酸腺苷含量存在一定差異，其含量由大到小依次為：靈武長棗（３３５．７ μｇ／ｇ）、中寧圓棗（１６９．０ μｇ／ｇ）、山東大棗（１６８．２ μｇ／ｇ）、陜北灘棗（１４０．８ μｇ／ｇ）、同心圓棗（１３９．５ μｇ／ｇ），研究結果為紅棗優良品種選育及進一步深加工等提供了一定的參考價值。

靈武長棗以其個大、味甜等享譽國內外，通過本研究發現，靈武長棗在藥用價值方面也具有一定的競爭優勢，研究結果為進一步推動靈武長棗走向國際市場提供了一定的科技支撐。

參考文獻：

［１］ 曲澤洲，王永蕙．中國棗樹志·棗卷［Ｍ］．北京：中國林業出版社，１９９３．２－６．

［２］ 寇曉紅，吳彩娥．中華大棗的營養食療價值與開發利用［Ｊ］．中國果菜，２０００（４）：４３－４４．

［３］ 雷昌貴，陳錦屏，盧大新．紅棗的營養成分及其保健功能［Ｊ］．現代生物醫學進展，２００６，６（３）：５６－５７．

［４］ 張榮泉，楊企錚．大棗化學成分研究［Ｊ］．中草藥，１９９２，２３（１１）：６０９．

［５］ 劉孟軍，王永慧．棗和酸棗１４種園藝植物ｃＡＭＰ含量的研究［Ｊ］．河北農業大學學報，１９９１，１４（４）：20－23．

［６］ 牟德華，朱艷麗，張艷芳，等．大棗環腺苷酸及其生物學功能［Ｊ］．食品科技，２００７，３２（５）：２７３－２７５．