自體骨髓干細胞移植治療腦卒中20例臨床研究

摘 要 目的：觀察20例腦卒中患者經自體骨髓干細胞移植后，其神經功能缺損積分、日常生活能力狀態變化及中醫證候各項積分值改變情況。方法：2009年10月～2010年11月收治符合腦卒中納入標準患者20例，通過腰穿蛛網膜下腔移植方式將分離后的自體骨髓干細胞［細胞計數為（2.8～1.2）×10¹⁰/L］移植腦內。結果：通過對自體骨髓干細胞移植治療腦卒中患者的臨床觀察，發現治療后患者的神經功能缺損積分、日常生活能力狀態及中醫證候各項積分值尤其是言語蹇澀、頭暈耳鳴、面紅目赤、腰膝酸軟均有不同程度的改善。結論：通過腰穿蛛網膜下腔移植方式移植自體骨髓干細胞治療腦卒中安全、方便、易為患者接受，并利于顱內多發和廣泛病變的治療。

關鍵詞 自體骨髓干細胞 腦卒中

隨著世界與我國人口老齡化的發展，我國腦血管疾病居三大死亡疾病（腦血管病、心臟病、癌癥）首位，其中腦卒中占80%，存活者約50%～70%遺留不同程度癱瘓和失語等后遺癥，嚴重威脅人類健康和生存，且缺乏有效的治療方法。近年來隨著干細胞研究的深入，發現骨髓干細胞是一組具有多向分化潛能和自我更新能力的細胞群，在生長和修復過程中起重要作用，為臨床醫學提供了一個發展新療法的機會。

資料與方法

一般資料：2009年10月～2010年11月收治符合腦卒中診斷標準患者20例，標準參考1995年中華醫學會第四次全國腦血管病學術會議修訂的《各類腦血管疾病診斷要點》^［1］、中醫辨證分型標準參考《中風病診斷與療效評定標準（試行）》^［2］。其中男12例，女8例，平均56.00±4.53歲，病程12.77±3.36天。入選病例均在經控制顱壓、腦細胞保護、基礎支持治療后，生命體征平穩，但仍遺留有較嚴重的神經功能缺損。設計采用自身前后對照方法。

骨髓干細胞采集及分離：取患者兩側髂后上棘為穿刺點，局部麻醉消毒，在無菌條件下，以18號骨髓穿刺針穿刺，抽取骨髓200ml，以7500U肝素抗凝，然后在本院干細胞實驗室采用密度離心法進行骨髓干細胞的體外分離及純化，得到細胞計數為（2.8～1.2）×10¹⁰/L，通過腰穿蛛網膜下腔移植方式移植腦內。

療效評定標準：參照中華醫學會第四次全國腦血管病學術會議通過的《腦卒中患者臨床神經功能缺損程度評分標準》進行綜合評價^［3］。臨床療效判定均按尼莫地平法計算，即（治療前積分-治療后積分）/治療前積分×100%。

統計學方法：所得數據采用SPSS13.0統計分析軟件處理，數據以X±S表示。P＜0.05為差異有顯著性。

結 果

神經功能缺損積分及日常生活能力狀態變化比較：治療后患者神經功能缺損積分以及日常生活能力狀態分級較治療前明顯降低（P＜0.01）。結果見表1。

中醫證候各項積分值比較：治療后患者中醫癥狀的各項積分值（除便秘外）均有改善，與治療前相比，差異有統計學意義（P＜0.01）。結果見表2。

術后護理

術后由于患者的免疫功能受到一定程度的損害，極易發生感染等并發癥，影響移植的療效。為此，及時開導患者，保持積極的心態配合治療，加強個人防護、臥床休息、減少活動，保持情緒穩定。

飲食上少量多餐，進食高熱量、高蛋白、高維生素、易消化的飲食，忌辛辣刺激性食物。保證充足的水分，定期檢查電解質的變化，及時予以糾正，以防發生電解質失衡。并加強臨床觀察，注意患者體溫、心率、心律、血壓等變化，早預防早發現早處理。

討 論

腦卒中主要是腦動脈系統病變引起腦局部循環障礙導致以肢體功能損害為主要表現的各種功能障礙，并可出現各種復雜的臨床綜合征^［4］。其治療的關鍵在于挽救缺血半暗帶區瀕臨死亡的神經元和促進損傷后神經功能的恢復。而來源于骨髓的干細胞相對容易分離培養、體外可大量擴增、遺傳背景相對穩定、體內植入反應弱，易于接受外源基因的導入和表達，直接取材于患者本人，傳代擴增并定向分化為靶細胞后再回輸給患者本人，安全性高，沒有異體排斥反應，并且避免了胚胎干細胞研究的倫理學爭論，而被認為是一種較為理想的組織工程和基因載體細胞。因此，作為一種新型種子細胞，骨髓干細胞在神經系統疾病的細胞治療和基因治療中有潛在的廣泛應用前景。

骨髓干細胞對腦損傷的修復作用在大量的動物實驗中已經得到肯定，并已證實移植的神經干細胞可以定向遷移到損傷灶及其周圍區域，促進損傷灶的修復^［5］，重建損傷的神經環路。此外，神經干細胞還具有低免疫原型和良好的組織相容性等特點^［6～7］。神經干細胞的以上特性為移植治療腦卒中后遺癥提供了可能。

張怡然等^［8］應用神經干細胞移植治療1例臨床神經功能缺損程度評分為34分的大面積腦梗死患者。移植術后2個月患者能下床活動，扶杖行走，神經功能缺損程度評分為18分。黃月^［9］、劉永海^［10］等研究認為神經干細胞能提高Bcl-2和降低Bax蛋白表達，明顯改善腦缺血大鼠的神經功能。王金偉等^［11］將大鼠骨髓源性神經干細胞移植入蛛網膜下隙出血大鼠枕大池。結果發現，移植治療的大鼠神經功能較對照組明顯改善。Bang^［12］等把30例大腦中動脈栓塞合并嚴重神經功能缺陷的患者隨機分為兩組，神經干細胞移植組患者在移植后6～12個月中Barthel指數和Rankin評分持續穩定地好轉。Mezey等^［14］研究認為，骨髓來源的干細胞能夠遷移到受損的腦組織區域并分化生成不同的腦組織，從而促進神經恢復^{［13～15］}。外源性的細胞移植能促進損傷腦組織血管再生，以減輕腦組織缺氧缺血損傷程度^［16］。神經干細胞移植后可填充因損傷造成的空洞，分化出的神經元能與宿主細胞之間可以形成突觸樣結構，修復損傷區域受損的神經環路^［17］。

通過對自體骨髓干細胞腦脊液途徑移植治療腦卒中患者的臨床觀察，發現治療后患者的神經功能缺損積分、日常生活能力狀態及中醫證候各項積分值尤其是言語蹇澀、頭暈耳鳴、面紅目赤、腰膝酸軟均有不同程度的改善，而這些治療效果是患者接受傳統的康復治療手段所沒有實現的，且與腦實質移植相比較，腦脊液途徑移植更為安全、方便、易為患者接受，并利于顱內多發和廣泛病變的治療^［18］。

隨著神經干細胞移植治療腦卒中的深入研究，為患者神經功能缺損修復帶來進一步的希望。但傷后何時進行移植能夠達到最佳效果尚無定論^［19］。且尚缺乏適合臨床應用的標準化技術方案、統一的功能評價指標、療效分析及安全性評價。

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表1 患者神經功能缺損積分和日常生活能力狀態變化比較（X±S）

注：與治療前相比，^△△P＜0.01

表2 中醫證候積分變化比較（X±S）

注：與治療前相比，^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01