全自動血培養系統檢測1425份標本結果分析

【摘要】 目的 分析本院血培養分離病原菌種類及耐藥性，為臨床提供用藥依據。方法 血液標本在BACT／ALERT3D60全自動血培養儀中培養，利用全自動微生物鑒定儀VITEK-32進行細菌鑒定及藥敏實驗，少數細菌藥敏實驗采用K-B法。結果 2010年1月～2010年12月在送檢的1425份血培養標本中，共分離出病原菌104例，陽性率為7.30%；其中革蘭陽性菌54例，革蘭陰性菌43例，真菌7例，分別占總數的51.92%，41.35%，6.73%。結論 及時了解血培養結果可以對臨床抗感染治療提供依據，提高治愈率，降低病死率?！娟P鍵詞】 血培養； 病原菌； 耐藥性Analysis of the results of 1425 blood culture specimens in automatic blood culture system SHEN Jian-ping.The First Hospital of Anqin，Anqing 246003，China【Abstract】 Objective To analyze the bacterial distribution and the drug resistance from blood culture in our hospital in order to provide a basis for clinical treatment.Methods 1425 blood samples were calculated and identified with the BACT/ALERT3D60 system and VITEK-32 system. The drug resistance test of a few samples used K-B method.Results Form January 2010 to December 12，104 strains of pathogenic bacterial were isolated form 1425 blood cultures，including 54 Gram-positive bacteria strains（51.92%），43 Gram-negaitive bacteria strains（41.35%）and 7 fungi strains（6.73%）. The total positive rate is 7.30%.Conciusion Understanding the blood culture results promptly can provide the basis for clinical antimicrobial therapy， and improve the cure rate， reduce mortality.【Key words】 Blood culture； Pathogenic bacteria； Drug resistance 由于現代醫學的飛速發展，各種高效抗生素的廣泛應用、耐藥菌株不斷產生和播散、醫院感染率不斷上升，臨床敗血癥的患病率明顯增加，血培養已成為血液細菌感染診斷和危重患者病情監測的重要手段?，F從本院2010年1月～2010年12月送檢的1425份血培養標本中，共分離出104例陽性細菌分布和對常用抗生素耐藥性進行分析，以此為臨床治療提供參考。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 菌株來源 2010年1月～2010年12月醫院送檢的1425份血培養標本中分離的104株致病菌。質控菌株大腸桿菌（ATCC25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、假銅綠單胞菌（ATCC27853）購自衛生部臨床檢驗中心。1.1.2 儀器與試劑 由生物梅里埃公司的BACT／ALERT3D60全自動血培養儀及其配套的血培養瓶；分離用培養基、M-H培養基購自鄭州安圖綠科生物工程公司，抗菌藥敏紙片購自杭州天和微生物試劑有限公司。VITEK-32全自動微生物分析儀及所應用的鑒定卡GPI、GNI+和藥敏卡GNS-448、GPS-119等均購自法國梅里埃公司。1.2 方法1.2.1 陽性培養瓶的處理儀器報警指示陽性時，及時轉種血平板、巧克力平板及麥康凱平板，同時涂片做革蘭染色，并將鏡檢結果通知醫生，作為初級報告。1.2.2 細菌培養及鑒定 嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》^［1］執行操作，鑒定及藥敏用VITEK-32全自動分析儀及配套的鑒定藥敏卡、部分菌株采用K-B瓊脂擴散法，依據CLSI標準判斷藥物敏感、耐藥。2 結果2.1 2010年1月～2010年12月1425份血培養標本共分離出104份陽性標本，陽性率為7.30%；在分離細菌中，革蘭陽性菌54例，革蘭陰性菌43例，真菌7例，分別占總數的51.92%，41.35%，6.73%。所分離菌中，大腸埃希氏菌占首位，占22.12%，依次為表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、金黃色葡萄球菌等。病原菌分類及構成比見表1。2.2 革蘭陽性球菌的耐藥性 在葡萄球菌中，甲氧西林耐藥株分別占金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、均為100%，耐藥率見表2。2.3 革蘭陰性桿菌對抗菌藥物的耐藥性 產ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌分別占大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的59.09%和50.00%，其耐藥率見表3。2.4 真菌耐藥性 在檢出7例中僅1例真菌孢子對氟康唑耐藥，對兩性霉素B、伊曲康唑、酮康唑均敏感。表1 血培養陽性細菌種類及構成比表2 革蘭陽性球菌對抗菌藥物耐藥率（%）表3 革蘭陰性桿菌對抗菌藥物耐藥率（%）3 討論本研究所分離的104株致病菌中，革蘭陽性球菌的比例高于革蘭陰性桿菌，其中大腸埃希菌占首位，占22.12%，其次最常見的為表皮葡萄球菌（19.23%），和溶血葡萄球菌（7.69%）。標本主要來源于兒科敗血癥患兒，可能與新生兒免疫功能不全，病原菌容易感染有關^［2］。葡萄球菌中，甲氧西林耐藥株（MRS）分別占金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌均為100%。MRS所占的比例極高，是由于MRS均含有mecA基因，mecA檢測結果和表型檢測有較好的相關性；MRS產生青霉素結合蛋白PBP 2a和β-內酰胺酶，故對青霉素和頭孢類藥物表現出極高的耐藥性。藥敏結果顯示，葡萄球菌存在多重耐藥現象；可能與近年來廣譜抗生素的廣泛應用，破壞個體的微生態平衡，條件致病菌增殖，細菌耐藥性增加有關^［3］。葡萄球菌對青霉素和紅霉素的耐藥率均為100%，對慶大、苯唑西林、四環素、鹽酸克林霉素、氨芐西林、復方新諾明的耐藥率也較高；本研究中僅發現1例耐萬古霉素的表皮葡萄球菌，對呋喃妥因、莫西沙星均敏感。呋喃妥因、莫西沙星及萬古霉素可作為臨床治療MRS感染的保留藥物。革蘭陰性桿菌分離率較高的是大腸埃希菌（22.12%）和肺炎克雷伯菌（3.85%），所分離菌中，大腸埃希氏菌占首位，其中59.09%的大腸埃希菌和50.00%的肺炎克雷伯菌產超廣譜β-內酰胺酶（ESBL-s）。ESBL-s主要見于腸桿菌科細菌，是目前腸桿菌科細菌（尤其是肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌和產酸克雷伯菌），對廣譜頭孢菌素產生耐藥性的最主要原因，它由質粒介導，可使細菌對青霉素和1、2、3代頭孢菌素以及單環菌素耐藥，但對頭孢霉素、碳青霉烯及酶抑制劑復合制劑敏感。兩者對亞胺培南、美羅培南和哌拉西林/三唑巴坦的耐藥率最低，其次阿米卡星、頭孢西丁，對其他抗生素則顯示較高的耐藥性。真菌在這次研究陽性株中，所占比例較小，占6.73%；在檢出7例中僅1例真菌孢子對氟康唑耐藥，而對兩性霉素B、伊曲康唑、酮康唑均敏感；分析原因可能是與患者本身免疫功能減退有關^［4］。ChristiansenKJ 等^［5］的研究顯示，耐藥菌的檢出率呈增加的趨勢，聯合一個地區的細菌培養及藥敏結果，特別是耐藥的細菌，選用對病原微生物敏感的抗生素，有助于減少耐藥菌在該地區的傳播。本研究統計結果顯示，血培養檢出菌種類復雜、耐藥率高，由于抗生素的不合理使用，細菌耐藥性在逐年上升，以致出現了一種可抗絕大多數抗生素的耐藥性超級細菌（NDM-1）。因此，限制抗生素的超限度使用，臨床醫生應加強血液感染患者血液中病原菌的檢查，合理選用抗生素，以利于疾病的治療。參 考 文 獻［1］ 葉應妮， 王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程.第3版.江蘇：東南大學出版社， 2006: 5641.［2］ 葉惠芬，李紅玉.賴福才，等.廣州地區菌血癥常見病原菌及耐藥性調查.中華醫院感染學雜志，2002，12（9）：707-708.［3］ 馮嗣青，張榮艷，陳國安，等.多發性骨髓瘤患者社區感染和院內感染間的差異.臨床血液學雜志，2006，19（5）：279-280.［4］ 屈玲，府偉靈，徐永濤，等.166例真菌感染分離鑒定及藥敏試驗結果分析.中華醫院感染學雜志，2004，14（1）：110-112.［5］ Chrisitiansen K J，Turnidge J D，Bell J M，et al.Prevalence of antimicrobial resistance in Enterococcus isolates in Australia，2005：report from the Australian Group on Antimicrobial Resistance.Commun Dis Intell，2007，31：392-397.（收稿日期：2011-05-19）（本文編輯：車艷）