Fascin在乳腺浸潤性導管癌中的表達及臨床意義

[摘要] 目的 檢測Fascin在乳腺浸潤性導管癌中的表達情況，并探討其臨床意義。方法 用免疫組織化學法檢測72例乳腺浸潤性導管癌及配對癌旁組織中Fascin蛋白的表達和定位，以21例乳腺良性病變（10例乳腺纖維腺瘤、5例單純性乳腺導管上皮增生和6例乳腺小葉增生）做為對照，收集病例臨床病理資料，統計分析浸潤性導管癌中Fascin的表達變化及與臨床病理參數的相關性。結果 Fascin蛋白在浸潤性導管癌、癌旁乳腺組織、乳腺良性病變中的表達陽性率分別為26.39%（19/72）、0.14%（1/72）和0%（0/21），浸潤性導管癌中Fascin蛋白的表達明顯高于癌旁乳腺及乳腺良性病變（P值均<0.01）；浸潤性導管癌中Fascin的表達與臨床TNM分期、腫瘤病理分級和淋巴結轉移相關（P值均<0.05）；ER或PR陰性的浸潤性導管癌病例Fascin表達陽性率更高（P值均<0.05）。結論 Fascin蛋白的檢測對評價乳腺浸潤性導管癌生物學行為和預后具有一定的參考價值，也有望成為一個乳腺癌的治療靶點。

[關鍵詞] Fascin；乳腺腫瘤；免疫組織化學

[中圖分類號] R737.9 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2012）04-0076-03

The expression of fascin protein and its clinic significant in breast invasion ductal carcinoma

GU Donghua1 ZHENG Qingling2 XU Wei1 DONG Jishun1 PING Jinliang1

1. Department of Pathology， Huzhou Central Hospital in Zhejiang Prorince， Huzhou 313000， China; 2. Medical College of Huzhou Teachers College， Huzhou 313000， China.

[Abstract] Objective To investigate the expression of fascin protein and its clinic significant in breast invasion ductal carcinoma (IDC). Methods The expression of fascin protein in 72 cases of IDC and matched normal breast tissue nearby cancer， and 21 cases of breast benign disease tissues were detected by immunohistochemistry EnVision. The results statistically analyzed with the clinical pathologic data. Results The positive rate of fascin protein expression were much greater in IDC(26.39%， 19/72) than those of normal breast tissue nearby cancer (0.14%， 1/72) and breast benign disease(0%， 0/21) (P ＜ 0.01). the expression of fascin protein in IDC was correlated with TMN stage， lymph node metastasis and histopathological grade (P ＜ 0.05). The negative correlation between fascin and ER or PR was found in IDC (P ＜ 0.01). Conclusion Fascin can be used as important parameters for judgement of biological behaviour and prognosis of IDC， and targeting Fascin gene might be a novel therapeutic strategy of IDC in future.

[Key words] Fascin; Breast tumor; Immunohistochemistry

Fascin是一種細胞骨架蛋白，能促進細胞膜的突起并增加細胞的運動能力。Fascin在間葉及神經組織中表達較高，在成熟的上皮組織中低水平表達或缺失，但很多癌組織中Fascin表達上調，并且與腫瘤的侵襲、轉移能力相關[1]。本研究中通過免疫組織化學法檢測乳腺浸潤性導管癌中Fascin的表達情況，并探討其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象和資料

實驗所用組織標本取自湖州市中心醫院2005~2010年間外科改良根治的72例原發浸潤性導管癌及配對癌旁乳腺檔存石蠟組織塊。所有患者術前均未接受過放化療及生物治療，均為女性，年齡28~65歲，中位年齡44歲，其中34例伴有淋巴結轉移，臨床TNM分期按美國癌癥聯合委員會（AJCC）標準，Ⅰ-Ⅱ期47例，Ⅲ-Ⅳ期25例；組織切片由兩名高年資病理醫生按WHO分級標準進行病理分級。另選取21例乳腺良性病變（10例乳腺纖維腺瘤、5例單純性乳腺導管上皮增生和6例乳腺小葉增生）做為對照，所有組織均經4%中性甲醛固定，常規脫水浸蠟，常溫保存。

1.2 免疫組織化學

免疫組織化學采用EnVision二步法；小鼠抗人Fascin（工作濃度l：100）、ER及PR單克隆抗體（工作濃度均為l：200）以及EnVision試劑盒均為丹麥Dako公司產品。石蠟切片厚度4 μm，工作程序參照試劑盒說明書進行，簡述如下：切片脫蠟至水，微波修復抗原，3%H2O2阻斷內源性過氧化物酶活性，TBS漂洗3×5 min，滴加一抗，37℃孵育1h，TBS漂洗3×5 min，EnVision試劑37℃孵育30 min，TBS漂洗3×5 min，3，3-二氨基聯苯胺（DAB）顯色，蘇木精襯染、脫水透明、封片。用TBS代替一抗做為空白對照，組織中血管內皮細胞及間質成纖維細胞做為陽性內對照。

1.3 免疫組化結果評定

采用雙盲閱片，染色評分參照Hashimoto等標準[2]，Fascin蛋白以胞質或胞膜出現棕黃或棕紅色顆粒為陽性信號，以同一組織樣本中血管內皮細胞染色強度為中等，染色強度低于內皮細胞為弱，高于內皮細胞為強，每張切片隨機選5個200倍視野觀察，計算陽性細胞百分率；Fascin染色評分：（-）為無染色，（1+）為小于10%的細胞中-強染色或所有細胞均為弱染，（2+）為10%-50%細胞中至強染色，（3+）為大于50%細胞中至強染色。ER及PR以胞核出現棕黃或棕紅色顆粒為陽性信號，并用陽性細胞百分率評定等級：≤5%為（-），5%～25%為（1+），25 %～50%為（2+），≥50 %為（3+）。

1.4 統計學分析

應用SPSS13.5軟件對數據結果進行統計分析，組間比較使用χ2檢驗，以P < 0.05具有顯著性差異。

2 結果

2.1 Fascin在乳腺癌組織中的表達

Fascin在72例浸潤性導管癌中陽性表達例數為19例（26.39%），表達信號主要定位在腫瘤細胞膜或細胞質（圖1），癌旁間質中血管及成纖維細胞呈陽性（圖1、2）；癌旁正常乳腺組織導管上皮基本不表達Fascin蛋白，只有一例呈弱陽性表達（1/72，0.14%）；乳腺良性病變中Fascin表達均陰性（0/21，0%）。浸潤性導管癌組織中Fascin蛋白表達陽性率與癌旁乳腺組及乳腺腺病組差異具有顯著性（P值均 < 0.01）。

2.2 Fascin蛋白表達與乳腺癌臨床病理指標的關系

見表1。根據實驗結果及臨床資料統計分析顯示，Fascin蛋白表達與浸潤性導管癌的病理分級具有相關性，病理分級為1~2級的病例中Fascin表達陽性率明顯低于3級（P < 0.05），TNM分期為Ⅲ~Ⅳ期的病例組Fascin陽性率也明顯高于Ⅰ～Ⅱ期組（P < 0.05）；并且Fascin表達與淋巴結轉移情況具有相關性，淋巴結轉移組Fascin陽性率明顯高于未轉移組（P < 0.05）；Fascin表達與患者的年齡、腫瘤大小無明顯相關性。

2.3 Fascin蛋白表達與ER、PR的相關性

根據免疫組化結果，把乳腺癌分為ER陽性組、ER陰性組以及PR陽性組、PR陰性組，組間對比分析發現，ER陰性Fascin陽性率為43.75%（14/32），明顯高于ER陽性組的12.5%（5/40），PR陰性Fascin陽性率為44.12%（15/34），明顯高于PR陽性組的10.53%（4/38），Fascin表達與ER、PR表達呈負相關性（P均 < 0.01）。

3 討論

Fascin蛋白是一種結構獨特、進化保守的細胞骨架蛋白，可與F-肌動蛋白結合，定位于細胞質張力纖維和細胞膜皺褶邊緣的絲狀偽足、微棘的核心肌動蛋白束中，在細胞遷移、粘附及信息傳遞中發揮重要作用[1]。Fascin在血管、成纖維細胞、樹突細胞中表達水平較高，但在人體正常上皮中處于很低的水平[1]。近年研究表明，Fascin在多種上皮源性的腫瘤組織中的表達明顯增加，而且與腫瘤的侵襲和轉移能力相關，預示著更差的預后，例如口腔鱗癌、腸腺癌、胰腺癌、卵巢癌[3-6]等，提示Fascin基因在上皮性腫瘤的發生、發展中可能發揮重要作用。

乳腺癌是女性人群中發生率和死亡率都非常高的惡性腫瘤。高翔等[7]在上皮性惡性腫瘤和正常上皮組織的對比組織學實驗中發現，乳腺癌中Fascin表達明顯高于正常乳腺組織，提示Fascin在乳腺癌的發生和發展中發揮一定作用。本研究的免疫組化結果顯示，癌旁乳腺及乳腺腺病組織中Fascin基本不表達，乳腺浸潤性導管癌中Fascin的表達明顯增高。統計分析發現，分化越差（病理分級3級）的病例Fascin的表達明顯高于分化好（病理分級1~2級）的病例，TNM分期為Ⅲ~Ⅳ期組病例中Fascin的表達明顯高于Ⅰ~Ⅱ期組，提示Fascin基因對乳腺癌的發展可能起著一定促進作用，Fascin表達陽性可能預示不良預后；而且淋巴結轉移陽性病例Fascin表達陽性率更高，說明Fascin基因很可能是促進腫瘤轉移的重要因素。

乳腺癌中ER、PR陽性的患者對內分泌治療具有較好的療效，而且具有相對較好預后。我們把乳腺癌病例分為ER、PR陰性和陽性兩組，結果發現無論ER還是PR，陰性組的Fascin表達明顯高于陽性組，此結果與Yoder等[8]人的文獻報道相一致，說明Fascin和ER、PR之間可能存在一種相互影響的調節機制，但具體機制還有待于深入研究。

綜上所述，本研究結果表明乳腺浸潤性導管癌組織中Fascin蛋白表達上調，且與腫瘤的組織分化程度、淋巴結轉移及臨床TNM分期相關，Fascin表達與ER、PR呈負相關，檢測Fascin對評價乳腺浸潤性導管癌生物學行為和預后具有一定的參考價值，也有望成為乳腺癌的一個治療靶點。

[參考文獻]

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（收稿日期：2011-10-31）