急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群Th3細(xì)胞的改變及臨床意義

[摘要] 目的 探討調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群Th3細(xì)胞在急性冠脈綜合征（ACS）發(fā)病中的作用。 方法 32例急性心肌梗死（AMI）、37例不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）和31例穩(wěn)定型心絞痛（SAP）患者為研究對(duì)象，采用流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞，并計(jì)算Th3細(xì)胞比例（CD4+ TGF-β1+/CD4+ T細(xì)胞），ELISA檢測(cè)血漿中Th3相關(guān)細(xì)胞因子TGF-β1的表達(dá)水平。 結(jié)果 SAP組Th3細(xì)胞比例和TGF-β1表達(dá)水平顯著高于AMI組和UAP組，相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05）；而AMI組和UAP組Th3細(xì)胞比例和TGF-β1表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05）。Th3細(xì)胞的比例與TGF-β1的表達(dá)水平呈正相關(guān)（r=0.547，P ＜ 0.01）。 結(jié)論 Th3細(xì)胞下調(diào)可能與ACS的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)，Th3細(xì)胞可能成為預(yù)防和治療ACS新靶點(diǎn)。

[關(guān)鍵詞] 急性冠脈綜合征；Th3細(xì)胞；調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群；TGF-β1

[中圖分類號(hào)] R541.4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2012）04-0050-02

The alteration and its clinical significance of regulatory T cell subsets Th3 cells in patients with acute coronary syndrome

XIN Jun

Department of Cardiology， the First People's Hospital of Jiande City， Zhejiang Province， Jiande 311600， China

[Abstract] Objective To investigate the alteration of regulatory T cell subsets Th3 cells in patients with acute coronary syndrome (ACS). Methods All of 32 cases of patients with acute myocardial infarction (AMI)， 37 cases of patients with unstable angina pectoris (UAP)， 31 cases of patients with stable angina pectoris (SAP) were studied. The peripheral blood mononuclear cells of plasma were tested by flow cytometry， and calculated the proportion of Th3 cells (CD4+ TGF-β1+/CD4+ T cells). The expression of plasma Th3 cytokine TGF-β1 was detected by ELISA. Results The proportion of Th3 cells and TGF-β1 expression of the SAP group were higher than that of the AMI group and UAP group， and the differences were significant (P ＜ 0.05); The proportion of Th3 cells and TGF-β1 expression had no significant difference between AMI group and UAP group (P ＞ 0.05). There was positive correlation between the proportions of Th3 cells and TGF-β1 expression (r = 0.547， P ＜ 0.01). Conclusion The down-regulation of the Th3 cells may involve in the occurrence and disease progression of ACS. Th3 cells may become a new target for prevention and treatment of ACS.

[Key words] Acute coronary syndrome; Th3 cells; Regulatory T cell subsets; TGF-β1

冠脈綜合征已成為當(dāng)前最嚴(yán)重的流行病之一，也是造成全球范圍內(nèi)死亡的最主要原因。在我國(guó)，急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）的發(fā)病率和死亡率呈快速增長(zhǎng)趨勢(shì)。ACS是由急性心肌缺血引起的急性冠脈事件的總稱，包括不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）、ST段抬高型心肌梗死（STEMI）、非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）和心源性猝死（SCD）[1]。ACS發(fā)病急、變化快，是臨床常見的心血管急重癥[2]。冠狀動(dòng)脈粥樣斑塊破裂及急性血栓形成是ACS的主要發(fā)病機(jī)制[3]，同時(shí)炎癥在粥樣斑塊的形成和發(fā)展以及斑塊的穩(wěn)定性方面起重要作用。ACS患者存在著Th1細(xì)胞活性升高、Th2細(xì)胞活性降低，Th1/Th2的失衡是ACS的主要表現(xiàn)[4]。而有關(guān)Th3是否與冠狀動(dòng)脈粥樣斑塊的不穩(wěn)定性以及和ACS發(fā)生、發(fā)展有關(guān)還不清楚。本研究通過檢測(cè)ACS患者血清外周血Th3細(xì)胞/CD4+ T細(xì)胞比例和Th3相關(guān)細(xì)胞因子TGF-β1表達(dá)水平，探討Th3與ACS的發(fā)生、發(fā)展之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2008年10月～2011年10月我院住院診治的100例冠心病患者為研究對(duì)象，均符合診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。排除以下病例：心臟瓣膜病、心臟衰竭以及周圍血管疾病者，伴有腦卒中、嚴(yán)重的肝腎、惡性腫瘤者，有敗血癥和其他炎癥性疾病者，排除安裝有心臟起搏器和有過類固醇藥物史者。100例患者分為三組：急性心肌梗死（AMI）組：32例，其中男19例，女13例，年齡32～85歲，平均（58.12±11.79）歲，入選的AMI患者證實(shí)心肌梗死，肌鈣蛋白I水平和肌酸激酶同工酶水平顯著升高；不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）：37例，其中男22例，女15例，年齡31～84歲，平均（57.79±12.16）歲，入選的UAP患者明顯胸痛，心電圖提示ST段變化和/或T波倒置、有明顯的缺血性心電圖變化；穩(wěn)定型心絞痛（SAP）組：31例，其中男18例，女13例，年齡33～86歲，平均（58.18±12.80）歲，入選的SAP患者出現(xiàn)典型的勞力性胸部不適并伴有ST段壓低＞1 mm。三組患者的年齡及性別構(gòu)成比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05）。

1.2 檢測(cè)方法

所有患者均于入院次日空腹12 h后平臥位取肘靜脈血5 mL置入肝素鈉抗凝管內(nèi)（所采血時(shí)間均在發(fā)病24 h以內(nèi)）。（1）外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離按文獻(xiàn)方法進(jìn)行[6]，流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞，計(jì)算Th3細(xì)胞比例（CD4+TGF-β1+/CD4+T細(xì)胞）。（2）血樣以3 000 r/min，離心，分取血漿，保存于-80℃冰箱待測(cè)，Th3相關(guān)細(xì)胞因子TGF-β1的表達(dá)水平采用ELISA試劑盒分別檢測(cè)，人TGF-β1 ELISA試劑盒為Bender MedSystems公司產(chǎn)品。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)用SPSS 13.0軟件進(jìn)行分析，檢測(cè)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，均數(shù)之間的比較用秩和檢驗(yàn)，多組均數(shù)間采用單因素方差分析，采用Pearson作相關(guān)性檢驗(yàn)，P ＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組外周血Th3細(xì)胞比例和TGF-β1表達(dá)水平的比較

流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，SAP組Th3細(xì)胞比例顯著高于AMI組和UAP組，相比較有顯著性差異（F = 8.162，P = 0.001）；而AMI組和UAP組Th3細(xì)胞比例比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z = 0.392，P = 0.285）。ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示，SAP組TGF-β1表達(dá)水平顯著高于AMI組和UAP組，相比較有顯著性差異（F = 9.667，P = 0.000）；而AMI組和UAP組TGF-β1表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z = 0.287，P = 0.298）。見表1。

2.2 Th3細(xì)胞比例和TGF-β1表達(dá)水平之間的相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson作相關(guān)性分析結(jié)果顯示，Th3細(xì)胞的比例與TGF-β1的表達(dá)水平呈正相關(guān)（r = 0.547，P ＜ 0.01）。

3 討論

目前有關(guān)冠心病的發(fā)病機(jī)制研究較多，免疫細(xì)胞和炎癥因子在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的各個(gè)環(huán)節(jié)中發(fā)揮著重要的作用，炎性反應(yīng)和免疫異常是導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈粥樣斑塊不穩(wěn)定的最主要的因素之一[7]。T淋巴細(xì)胞是介導(dǎo)免疫應(yīng)答的主要免疫細(xì)胞，按照T淋巴細(xì)胞的功能可以分為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、細(xì)胞毒性T細(xì)胞和輔助性T細(xì)胞等。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是通過分泌具有免疫抑制作用的細(xì)胞因子來發(fā)揮其抑制作用。有研究報(bào)道[8]，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞主要有兩大類亞群，一類是CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，它是固有的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞；另一類是Th1、Th3、CD8+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，它們是誘導(dǎo)產(chǎn)生的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。其中Th3細(xì)胞是具有免疫抑制調(diào)節(jié)功能的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群，Th3與Th1、Th2的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群不同，它具有抑制與調(diào)節(jié)免疫效應(yīng)細(xì)胞的增殖與分化，可以抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生等作用。

國(guó)內(nèi)的研究報(bào)道認(rèn)為[9]，Th1、Th2調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的過度活化可以通過Th3抑制來調(diào)節(jié)，使Th1/Th2保持平衡，表明Th3細(xì)胞可能與冠心病發(fā)生有關(guān)，是冠心病的保護(hù)性因素，進(jìn)一步推測(cè)下調(diào)Th3細(xì)胞的表達(dá)可能與不穩(wěn)定型心絞痛的發(fā)生有關(guān)。國(guó)內(nèi)外的研究報(bào)道[10]，Th3通過高分泌TGF-β1而維持機(jī)體自免，而TGF-β1在動(dòng)脈硬化的形成過程中有著重要的作用，目前已證實(shí)TGF-β1是非法重要的炎癥免疫調(diào)節(jié)因子和斑塊穩(wěn)定因子[11]。

本研究結(jié)果顯示，SAP組Th3細(xì)胞比例和Th3相關(guān)細(xì)胞因子（TGF-β1）表達(dá)水平均顯著高于AMI組和UAP組，而AMI組和UAP組Th3細(xì)胞比例和TGF-β1表達(dá)水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05）。可以看出，SAP組存在Th3的比例和Th3相關(guān)細(xì)胞因子的高表達(dá)水平，提示Th3細(xì)胞可能與斑塊的穩(wěn)定有關(guān)，是斑塊穩(wěn)定的重要調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，Th3細(xì)胞比例下調(diào)可能與斑塊不穩(wěn)定和ACS的發(fā)生有關(guān)。分析其可能的機(jī)制：隨著ACS外周血Th3細(xì)胞比較的下降，對(duì)Th1細(xì)胞的抑制作用減弱，Th1細(xì)胞表現(xiàn)為功能性亢進(jìn)，此時(shí)通過Th1下游一系列的細(xì)胞因子的協(xié)同作用而導(dǎo)致ACS的發(fā)生和發(fā)展。本研究結(jié)果顯示，Th3細(xì)胞的比例與TGF-β1的表達(dá)水平呈正相關(guān)。進(jìn)一步證實(shí)Th3細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子TGF-β1水平與ACS患者的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。

綜上所述，Th3細(xì)胞可能是ACS的保護(hù)性因素，Th3細(xì)胞下調(diào)可能與ACS的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)，Th3細(xì)胞可能成為預(yù)防或者治療ACS新靶點(diǎn)。然而，目前有關(guān)Th3細(xì)胞參與ACS發(fā)生和發(fā)展的機(jī)制還不清楚，需要我們進(jìn)一步深入研究。

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（收稿日期：2011-11-18）