慢性心力衰竭病人外周血炎性因子和Th1/Th2細(xì)胞因子變化與心功能關(guān)系的臨床研究

古錫欽

廣東省梅州市五華縣人民醫(yī)院，廣東梅州 514400

慢性心力衰竭（Chronic Heart Failure,CHF）是由多種原因引起心臟結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生變化，進(jìn)而導(dǎo)致心室射血和（或）充盈功能低下，并出現(xiàn)相應(yīng)的臨床表現(xiàn)的綜合征，它是大多數(shù)心血管疾病的最終歸宿和死亡原因。在我國，慢性心力衰竭患者將近400萬人[1]，有約50%的患者會在5年內(nèi)死亡[2]。

越來越多的證據(jù)表明，炎癥在心力衰竭的發(fā)生和發(fā)展中起著重要的作用[3]。研究表明，在心力衰竭的患者的血清炎性標(biāo)志物如TNF-α、IL-18和CPR等均升高，且與心力衰竭的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[4]，但是到目前為止，仍然沒有足夠證據(jù)證明可以利用炎性標(biāo)志物去指導(dǎo)心力衰竭的治療[5]。該實(shí)驗(yàn)研究心力衰竭患者血清標(biāo)志物和細(xì)胞因子與心功能的關(guān)系，旨在為心力衰竭的炎癥因子變化提供科學(xué)依據(jù)，并為臨床治療療效提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

觀察組60例，其中男性32例，女生28例，平均年齡為（52.7±6.9）歲，其中NYHAⅡ級 18例 ，NYHAⅢ級23例，NYHAⅣ級19例；對照組50例，其中男性23例，女性27例，平均年齡為（54.1±7.2）歲。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

入選的110病例分別來自某市人民醫(yī)院，參照陳灝珠主譯[美]《臨床心臟病學(xué)》充血性心力衰竭診斷的主要標(biāo)準(zhǔn)和次要標(biāo)準(zhǔn)，并根據(jù)美國紐約心臟病學(xué)會（NYHA）分為心功能分為4級。觀察組應(yīng)符合慢性心力衰竭的診斷標(biāo)準(zhǔn)，NYHA心功能分級在Ⅱ～Ⅳ級，年齡介于40～80歲的患者，排除梗阻性心肌病、瓣膜病、縮窄性心包炎、大量心包積液、肺栓塞、急性心肌梗死，感染性心內(nèi)膜炎，以及合并嚴(yán)重的肝、腎功能不全，內(nèi)分泌系統(tǒng)、造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病者。對照組選擇在以上醫(yī)院體檢的健康人，年齡介于40～80歲。

1.3 觀察指標(biāo)和方法

入院后當(dāng)天進(jìn)行對患者進(jìn)行心功能分級。分別采集患者和健康人上肢肘靜脈血4mL,離心分離血清，采用ELISA法檢測CRP、TNF-α 和 IL-6。選擇 IFN-γ/IL-4代表 Th1/Th2比值，分別采用ELISA法檢測。檢測程序：①加樣：標(biāo)準(zhǔn)曲線設(shè)置：以一條8孔設(shè)置，每孔加入樣品稀釋液100μL，取樣品100μL至A孔依次稀釋至G孔(第7孔)，第8孔為空白對照，各孔濃度依次為：2000，1000，500，250，125，62.5，31.3，0pg/mL ， 必要時置復(fù)孔。余各孔依次加入陰性血清及待測樣品各100μL。②將反應(yīng)板置37℃120min。③洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌6次向?yàn)V紙上印干。④每孔加酶標(biāo)抗體工作液100μL。⑤將反應(yīng)板置37℃45～60min。⑥洗板：同前。⑦每孔加OPD底物工作液100μL置37℃暗處反應(yīng)5～10min。⑧每孔加入50μL終止液混勻。⑨于490nm處測吸光值，換算出中因子表達(dá)量。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

2.1 心力衰竭與健康人血清CRP、TNF-α和IL-6水平

心力衰竭患者外周血CRP、TNF-α和IL-6顯著升高，且與心功能的密切相關(guān)，表現(xiàn)為隨著心功能的惡化，上述炎性因子升高越明顯。見表1。

表1 兩組血清CRP、TNF-α和IL-6水平比較(±s)

表1 兩組血清CRP、TNF-α和IL-6水平比較(±s)

注：* 與對照組相比，P＜0.05；△與 NYHAII級相比，P＜0.05；★與 NYHAIII級相比，P＜0.05。

組別 例數(shù)CRP(mg/L)TNF-α(ng/L) IL-6(ng/L)NYHAII級NYHAIII級NYHAIV級對照組18 23 29 50 6.21±1.89*★6.89±2.02*7.57±2.11*△3.57±1.15△★13.97±3.24*★16.23±3.59*18.55±3.61*△4.31±2.09△★19.27±4.26*★25.78±4.89*△34.44±6.12*△8.25±1.26△★

3.2 心力衰竭與健康人外周血Th1/Th2比值

心力衰竭患者外周血Th1/Th2比值明顯升高，隨著心功能的惡化，其升高趨勢越明顯，提示T細(xì)胞亞群Th1/Th2比值與心功能關(guān)系密切，與心功能的惡化程度呈正相關(guān)。見表2。

表2 兩組外周血Th1/Th2比值比較（±s）

表2 兩組外周血Th1/Th2比值比較（±s）

注：* 與對照組相比，P＜0.05；△與 NYHAII級相比，P＜0.05；★與 NYHAIII級相比，P＜0.05。

組別 例數(shù)IFN-γ(pg/mL)IL-4(pgL/mL) IFN-γ/IL-4 NYHAII級NYHAIII級NYHAIV級對照組18 23 29 50 68.63±8.24*★73.91±10.14*82.44±11.58*△48.21±7.52△★39.57±5.88★35.31±5.47*34.56±4.92*△45.11±6.97△★1.73±1.26*★2.09±1.31*2.38±1.40*△1.07±0.12△★

3 討論

Th1，Th2型細(xì)胞是CD4+T輔助細(xì)胞的兩個亞群。Th1細(xì)胞主要分泌細(xì)胞因子IL-2，IFN-γ等，具有免疫殺傷作用。Th2細(xì)胞主要分泌細(xì)胞因子 IL-4，IL-5，IL-6，IL-9，IL-10 及 IL-18，具有免疫抑制作用[6]。正常情況下，Th1/Th2細(xì)胞因子相互介導(dǎo)，相互抑制，處于平衡狀態(tài)，當(dāng)兩者之間的比例失衡時往往會引起多種疾病的發(fā)生。Th1及其分泌的細(xì)胞因子代表促炎作用，Th2及其分泌的細(xì)胞因子代表抑炎作用[7]。

炎癥與心力衰竭的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[8]，該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果亦表明，心力衰竭的患者外周血清中一些常見的炎性因子水平明顯升高，且與心功能的惡化程度呈正相關(guān)。Th1/Th2的失衡也就是機(jī)體促炎作用和抑炎作用的失衡，當(dāng)Th1/Th2的比值上升時，促炎作用大于抑炎作用，機(jī)體呈現(xiàn)出明顯的炎癥狀態(tài)。在該實(shí)驗(yàn)的觀察中，心力衰竭患者Th1/Th2比值上升，說明患者機(jī)體內(nèi)炎癥活動明顯，炎癥的發(fā)生與心衰兩者相互影響，相互促進(jìn)。

在臨床治療中，監(jiān)測血清炎癥因子如CRP、IL-6和TNF-α等的變化，以及Th1/Th2細(xì)胞的改變，對于判斷心衰患者的病情發(fā)展和嚴(yán)重程度均有重要的參考價(jià)值，然而，目前臨床上仍然沒有足夠證據(jù)證明可以利用炎性標(biāo)志物去指導(dǎo)心力衰竭的治療[5]。

[1]何文俊,張濤,蔣學(xué)俊,等.炎癥因子與慢性心力衰竭[J].中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2011，5（2）：457-460.

[2]顧東風(fēng),黃廣勇,何江,等.中國心力衰竭流行病學(xué)調(diào)查及其患病率[J].中華心血管病雜志,2003,31(1):3-6.

[3]Wrigley Benjamin J,Lip Gregory YH,Shantsila Eduard.The role of monocytes and inflammation in the pathophysiology of heart failure[J].European Journal of Heart Failure,2011,13(11):1161-1171.

[4]周素平.炎癥和心力衰竭[J].心血管病學(xué)進(jìn)展，2007，28(3):493-496.

[5]Biykem Bozkurt,Douglas L,Mann,et al.Biomarkers of inflammation in heart failure[J].Heart Failure Reviews,2010,15(4):331-341.

[6]Ismail Tabasum,Shafi Syed,Gupta Amit,et al.Study of the adjuvanticity of lysine lipopeptides;carbamate analogs elicit strong Th1 and Th2 response to ovalbumin in mice[J].International Immunopharmacology,2011,11(11):1855-1863.

[7]Yang Xia,Qian Feng,He Hai-Yang,et al.Effect of thymosin alpha-1 on subpopulations of Th1,Th2,Th17,and regulatory T cells(Tregs)in vitro[J].Brazilian Journal of Medical and Biological Research，2012,45(1):25-32.

[8]于榮波,徐偉麗,曹磊.心力衰竭患者血清炎癥因子變化與心功能的關(guān)系[J].山東醫(yī)藥，2009，49（33）：67-68.