百令膠囊對(duì)早期糖尿病腎病氧化應(yīng)激的影響

楊 磊 郭 娟 (南方醫(yī)科大學(xué)附屬鄭州人民醫(yī)院腎病移植科，河南 鄭州 450000)

百令膠囊對(duì)早期糖尿病腎病氧化應(yīng)激的影響

楊 磊 郭 娟1(南方醫(yī)科大學(xué)附屬鄭州人民醫(yī)院腎病移植科，河南 鄭州 450000)

百令膠囊;氧化應(yīng)激;糖尿病腎病

糖尿病腎病(DN)是糖尿病(DM)的常見(jiàn)并發(fā)癥之一，在DM病人發(fā)生率約為20% ～40%〔1，2〕，最終導(dǎo)致腎衰竭。由于DM腎臟病變?yōu)槁赃M(jìn)行性損害，癥狀出現(xiàn)較晚，一般出現(xiàn)尿蛋白時(shí)病程多在10年以上，一旦出現(xiàn)持續(xù)性蛋白尿，腎功能將不可遏制地進(jìn)行性下降〔3〕。因此，早期治療可以延緩DN進(jìn)展，減少醫(yī)療費(fèi)用。目前越來(lái)越多的證據(jù)表明氧化應(yīng)激在DN發(fā)病中起重要作用〔4〕。本文旨在觀察百靈膠囊對(duì)氧化應(yīng)激的影響以及氧化應(yīng)激與DN早期尿白蛋白排泄率的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 入選病例為2007年1月至2011年1月在我院腎病移植科入院的早期DN患者72例，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組36例和對(duì)照組36例，其中男48例，女34例，年齡54～72〔平均(64.8±10.2)〕歲。

1.2 方法

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 入選患者均符合1997年美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)/世界衛(wèi)生組織(ADA/WHO)糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)和分類標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)符合下列條件:根據(jù) Mogensen的 DN分期，UAER水平20～200μg/min為早期DN患者。各組治療前后肝功、腎功、血脂指標(biāo)比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P＞0.05)。另選擇30例正常人為健康組，排除急、慢性感染，急性心臟、肝臟、胃腸道及血液系統(tǒng)疾病，各種腎病、自身免疫性疾病，有毒物接觸史、輻射史、酗酒史及服用免疫抑制劑者。

1.2.2 治療方案 全部患者使用胰島素控制血糖，同時(shí)給予降壓、降血脂、抗血小板聚集、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶受體拮抗劑等糖尿病綜合治療。實(shí)驗(yàn)組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用百令膠囊(杭州中美華東制藥有限公司)每次5粒，3次/d口服。

1.2.3 檢測(cè)方法 用羥胺法檢測(cè)超氧化物歧化酶(SOD)，硫代巴比妥酸比色法檢測(cè)丙二醛(MDA)，試劑盒均由南京建成生物研究所提供，用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清晚期蛋白氧化產(chǎn)物(AOPPs)，試劑由武漢中美科技公司提供，用固相三明治免疫法、挪威Axis-shield公司提供的試劑盒檢測(cè)UEAR。分別測(cè)定對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組治療前和治療3個(gè)月后血漿MDA、AOPPs、SOD和24 h UAER。另選擇30例正常人為健康組，測(cè)定健康組的 MDA、AOPPs、SOD 和24 h UAER。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，所有數(shù)據(jù)均采用±s表示，治療前后及兩組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)，組間比較用單因素方差分析。

2 結(jié)果

2.1 百令膠囊對(duì)早期DN氧化應(yīng)激的影響 對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組治療前較健康組血漿MDA、AOPPs顯著升高(P＜0.01)，SOD較健康組顯著降低(P＜0.01);實(shí)驗(yàn)組治療后3個(gè)月MDA、AOPPs較治療前下降(P＜0.05)，SOD較治療前升高(P＜0.05)。對(duì)照組治療后3個(gè)月MDA、AOPPs較治療前下降，但差異無(wú)顯著意義(P＞0.05)，SOD較治療前有所升高，差異無(wú)顯著意義(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 百令膠囊對(duì)24 h UAER的影響 對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組治療前24 h UAER較健康組顯著升高(P＜0.01);實(shí)驗(yàn)組治療后3個(gè)月24 h UAER較治療前下降(P＜0.05);對(duì)照組治療后3個(gè)月，24 h UAER較治療前下降，但差異無(wú)顯著意義(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

2.3 血清氧化應(yīng)激指標(biāo)與UAER的相關(guān)性分析 相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，血清中MDA、AOPPs與24 hUAER的相關(guān)系數(shù)分別為0.84、0.75(P＜0.05)，均呈顯著正相關(guān);而SOD與24 h UAER的相關(guān)系數(shù)為－0.76，P＜0.05，呈顯著負(fù)相關(guān)。

表1 治療前后各組MDA、AOPPs、SOD、24 h UAER變化情況(±s)

表1 治療前后各組MDA、AOPPs、SOD、24 h UAER變化情況(±s)

組別 n MDA(nmol/ml) AOPPs(μmol/L) SOD(U/ml) 24 h UAER(mg/d)健康組 30 3.899±0.545 21.678±3.093 108.750±8.610 13.8±1.4對(duì)照組 治療前 36 4.823±0.526 70.797±12.401 80.465±5.371 276.5±13.2治療后3個(gè)月 36 4.435±0.347 68.372±12.538 82.123±5.746 235.5±29.4實(shí)驗(yàn)組 治療前 36 4.853±0.493 70.629±11.814 81.426±4.346 279.3±30.4治療后3個(gè)月 36 3.738±0.513 62.974±12.516 86.850±4.936 135.8±26.6

3 討論

目前關(guān)于DN的發(fā)病機(jī)制尚未完全明了。普遍認(rèn)為反應(yīng)性氧化物過(guò)多是造成DN各種損害的共同機(jī)制〔1〕。生理情況下，組織細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的產(chǎn)生和清除保持平衡，氧化應(yīng)激是指機(jī)體活性氧(ROS)的產(chǎn)生增加和清除(ROS)的能力降低，由此導(dǎo)致ROS的生成和清除失衡。糖尿病時(shí)，高糖環(huán)境可誘導(dǎo)細(xì)胞多種代謝紊亂，包括多元醇途徑、己糖胺代謝途徑、蛋白激酶C(PKC)激活等;而且，還有次生的AOPPs和糖基化蛋白產(chǎn)物(AGEs)的繼發(fā)作用，引起腎臟嚴(yán)重而持久的細(xì)胞氧化應(yīng)激。近年研究發(fā)現(xiàn)，高糖刺激腎臟腎素血管緊張素系統(tǒng)活化、進(jìn)而促進(jìn)腎臟嚴(yán)重氧化應(yīng)激反應(yīng)，可能發(fā)揮了更為重要的病理作用〔2～4〕。

長(zhǎng)期的高血糖環(huán)境引起蛋白的糖基化反應(yīng)增強(qiáng)和抗氧化應(yīng)激功能減低，同時(shí)長(zhǎng)期的高氧化應(yīng)激水平引起體內(nèi)氧化應(yīng)激產(chǎn)物過(guò)多，導(dǎo)致難以控制的脂質(zhì)過(guò)氧化作用，引起腎皮質(zhì)脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA生成增多〔5〕。MDA可與含游離氨基酸的蛋白質(zhì)發(fā)生交聯(lián)，使血管基膜增厚〔6〕。AOPPs是在氧化應(yīng)激過(guò)程血清白蛋白氧化生成的蛋白交連物，是各種蛋白質(zhì)氧化終末產(chǎn)物的總稱，Soliman〔7〕指出，DM及DN患者的血清AOPPs高于健康人群，張蕾〔8〕報(bào)道，終末期DN患者血清AOPPs明顯高于DM患者。氧自由基的增加可能會(huì)致腎小球?yàn)V過(guò)膜上的負(fù)電荷丟失，腎小球的濾過(guò)屏障受損，使帶有負(fù)電荷的白蛋白易于從腎小球?yàn)V過(guò)膜溢出，尿蛋白排出量增加，在早期表現(xiàn)為尿微量白蛋白的升高。SOD特異性地清除氧自由基，是防御內(nèi)外環(huán)境中超氧離子損傷的重要酶，構(gòu)成機(jī)體對(duì)自由基損傷的第一道防線，糖尿病患者體內(nèi)SOD活性明顯下降。

百令膠囊為冬蟲(chóng)夏草菌絲經(jīng)生物工程方法精制而成的發(fā)酵蟲(chóng)草菌糖，主要成分有腺苷、多種氨基酸、甘露醇、糖及多種維生素、微量元素等。其中腺苷可使SOD升高，清除自由基，降低脂質(zhì)過(guò)氧化物，保護(hù)患者腎臟免受損害，改善腎血流，抑制血小板聚集，穩(wěn)定溶酶體膜，并促進(jìn)腎細(xì)胞的修復(fù)，對(duì)抑制DN的發(fā)生發(fā)展，改善微循環(huán)，阻斷和減輕腎微細(xì)血管病變，減少尿白蛋白的排泄，改善腎功能起著非常重要的作用。多種維生素和微量元素是人體必需的，可供DN患者補(bǔ)充所需或直接參與調(diào)節(jié)機(jī)體血糖、蛋白質(zhì)、脂肪、SOD等的代謝〔9〕。

本文資料發(fā)現(xiàn)，DN患者血清中MDA和AOPPs含量顯著高于對(duì)照組，SOD活性顯著低于對(duì)照組，表明DN患者氧化應(yīng)激明顯增強(qiáng)。而使用百令膠囊治療3個(gè)月后，患者血清中氧化應(yīng)激指標(biāo)如MDA、AOPP明顯降低，SOD升高，同時(shí)尿白蛋白排泄率明顯減少，提示百靈膠囊可有效抑制DN患者的氧化應(yīng)激，減少尿蛋白的排泄，值得臨床推廣使用。

1 郭 芳，周國(guó)英.中西醫(yī)結(jié)合治療早期糖尿病腎病進(jìn)展〔J〕.實(shí)用中醫(yī)藥雜志，2006;22(3):186-7.

2 Wei XF，Zhou QG，Hou FF，etal.Advanced oxidation protein products induce mesangial cell perturbation through PKC-dependent activation of NADPH oxidase〔J〕.Am J Physiol Renal Physiol，2009;296(2):427-37.

3 Shi XY，Hou FF，Niu HX，et al.Advanced oxidation protein products promote inflammation in diabetic kidney through activation of renal nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase〔J〕.Endocrinology，2008;149(4):1829-39.

4 Li HY，Hou FF，Zhang X，et al.Advanced oxidation protein products accelerate renal fibrosis in a remnant kidneymodel〔J〕.JAm Soc Nephrol，2007;18(2):528-38.

5 Cetinkaya A，Kurutas EB，Buyukbese MA，et al.Levels of malondialdehyde and superoxide dismutase in subclinical hyper-thyroidism〔J〕Mediators Inflamm，2005;20(1):57-9.

6 Descamps-Lalscha B，Jungers P，Witko-Sarsat V.Immune system dysregulation in uremia:role of oxidative stress〔J〕.Blood Purif，2002;20(5):481-4.

7 Soliman GZ.Blood lipid peroxidation(superoxide dismutase，malondialdehyde，glutathione)levels in egyptian type 2 diabetic patients〔J〕.Singapore Med J，2008;49(2):129-36.

8 張 蕾.糖尿病腎病患者晚期氧化蛋白產(chǎn)物與超氧化物歧化酶檢測(cè)的臨床意義〔J〕.中華實(shí)用診斷與治療雜志，2008;22(12):898-9.

9 潘慧娟.百令膠囊治療慢性腎衰竭臨床觀察〔J〕.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2007;20(3):345-6.

R589.1

A

1005-9202(2012)16-3518-02;

10.3969/j.issn.1005-9202.2012.16.082

1 南方醫(yī)科大學(xué)附屬鄭州人民醫(yī)院檢驗(yàn)科

楊 磊(1969-)，女，副主任醫(yī)師，碩士，主要從事腎小球疾病診治研究。

〔2011-11-17收稿 2011-12-10修回〕

(編輯 袁左鳴)