血清總蛋白測(cè)定方法及臨床意義

李晶

血清總蛋白測(cè)定方法及臨床意義

李晶

目的探討雙縮脲法測(cè)定血清總蛋白方法與臨床意義。方法血清TP均采用雙縮脲法測(cè)定，由于蛋白質(zhì)分子中的肽鍵(-CONH-)可與雙縮脲試劑即堿性銅溶液反應(yīng)，形成紫色化合物，其紫色深淺與樣品中蛋白質(zhì)濃度成正比。結(jié)果 TP增高常見于脫水和血液濃縮，多發(fā)性骨髓瘤。TP減低常見于血漿水分增加，肝功能障礙，消耗性疾病、營(yíng)養(yǎng)不良、廣泛燒傷、腎病綜合征、潰瘍性結(jié)腸炎、大量反復(fù)放胸腔積液和腹水。

雙縮脲法;血清總蛋白

血清總蛋白(TP)為血清中所含各種蛋白質(zhì)的總稱，雙縮脲法能很準(zhǔn)確地測(cè)定血清TP，其精密度也很高。雙縮脲反應(yīng)可作為血漿蛋白總量測(cè)定的理想方法，從測(cè)定的吸光度值計(jì)算出蛋白質(zhì)含量［1］。吸光度的大小與試劑的組分、pH值、反應(yīng)溫度有關(guān)?，F(xiàn)對(duì)雙縮脲法測(cè)定血清總蛋白(TP)的臨床方法及意義進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 選取臨床檢驗(yàn)60例檢測(cè)者，其中男30例，女30例，年齡19～75歲。

1.2 操作 高脂血癥、高膽紅素血癥及溶血標(biāo)本，應(yīng)作“標(biāo)本空白管”;即取血清0．1ml加雙縮脲空白試劑5ml，以測(cè)定管吸光度減去標(biāo)本空白管吸光度為測(cè)定管的標(biāo)準(zhǔn)吸光度。

2 臨床意義

血清(漿)中蛋白質(zhì)的肽鍵(-CO-NH-)在堿性溶液中能與2價(jià)銅離子作用生成穩(wěn)定的紫紅色絡(luò)合物。此反應(yīng)和2個(gè)尿素分子縮合后生成的雙縮脲(H2N-OC-NH-CO-NH2)在堿性溶液中與銅離子作用形成紫紅色的反應(yīng)相似，故稱之為雙縮脲反應(yīng)。這種紫紅色絡(luò)合物在540nm處有明顯吸收峰，吸光度在一定范圍內(nèi)與血清蛋白含量呈正比關(guān)系，經(jīng)與同樣處理的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液比較，即可求得蛋白質(zhì)含量。通過血清蛋白的測(cè)定，可以間接了解機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)情況，并協(xié)助某些疾病的診斷，所以血清蛋白測(cè)定是臨床生化檢驗(yàn)重要項(xiàng)目之一。凡分子中含有兩個(gè)甲酰氨基(-CONH2-)的化合物都能與堿性銅溶液作用，形成紫色復(fù)合物，這一反應(yīng)稱雙縮脲反應(yīng)［1］。蛋白質(zhì)分子中有許多肽腱(-CONH-)，都能起此反應(yīng)，而且各種血漿蛋白顯色程度基本相同，紫色復(fù)合物在540nm有吸收峰，并與蛋白含量成正比，通過與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)蛋白比較可求出血清總蛋白含量。因此，在嚴(yán)格控制條件下，雙縮脲反應(yīng)可作為血漿蛋白總量測(cè)定的理想方法，從測(cè)定的吸光度值計(jì)算出蛋白質(zhì)含量。吸光度的大小與試劑的組分、pH值、反應(yīng)溫度有關(guān)。

新鮮血清蛋白是血清固體成分中含量最多的一類化合物。嬰兒時(shí)稍低，3歲時(shí)即可達(dá)到成人水平。60歲后稍減低(約2g/L)。性別差異沒有臨床意義。依照測(cè)定方法的不同，可將血清蛋白分成近百種不同組分。血清蛋白具有維持血液正常膠體滲透壓和pH、運(yùn)輸多種代謝物、調(diào)節(jié)被運(yùn)輸物質(zhì)的生理作用和解除其毒性、免疫作用以及營(yíng)養(yǎng)作用等多種功能。血清蛋白不僅存在于血清內(nèi)，也分布于各種細(xì)胞外液，并不斷進(jìn)行互相交換。

雙縮脲法能很準(zhǔn)確地測(cè)定血清TP，其精密度也很高。干擾物質(zhì)較少，但血紅蛋白1g/L能引起 TP值3g/L的增加;嚴(yán)重脂濁血清可引起測(cè)定值偏高，應(yīng)進(jìn)行處理后測(cè)定，可采用乙醚或丙酮對(duì)三酰甘油進(jìn)行提取，這個(gè)過程頗為麻煩，在臨床檢驗(yàn)中不太可行;若采用雙試劑的雙縮脲法，在自動(dòng)生化分析儀上設(shè)計(jì)兩點(diǎn)法得到結(jié)果，可部分去除三酰甘油干擾。臨床上采用右旋糖酐治療時(shí)對(duì)血清TP測(cè)定可造成較大正干擾，但若試劑中的酒石酸鉀鈉濃度低于5g/L或高于15g/L，即不會(huì)產(chǎn)生影響，目前國(guó)內(nèi)TP測(cè)定試劑中酒石酸鉀鈉濃度多數(shù)大于15g/L。血清總蛋白濃度增高，血清中水分減少，使總蛋白濃度相對(duì)增高。凡體內(nèi)水分的排出大于水分的攝入時(shí)，均可引起血漿濃縮，尤其是急性失水時(shí)(如嘔吐、腹瀉、高熱等)變化更為顯著，血清總蛋白濃度有時(shí)可高達(dá)100～150g/L。又如休克時(shí)，由于毛細(xì)血管通透性的變化，血漿也可發(fā)生濃縮。慢性腎上腺皮質(zhì)功能減退患者，由于鈉的丟失而致繼發(fā)性水分丟失，血漿也可出現(xiàn)濃縮現(xiàn)象。血清蛋白質(zhì)合成增加。大多發(fā)生在多發(fā)性骨髓瘤患者，此時(shí)主要是球蛋白的增加，其量可超過50g/L，總蛋白則可超過100g/L。血清總蛋白濃度降低，血漿中水分增加，血漿被稀釋。如因各種原因引起的水鈉潴留。營(yíng)養(yǎng)不良和消耗增加。長(zhǎng)期食物中蛋白質(zhì)含量不足或慢性腸道疾病所引起的吸收不良，使體內(nèi)缺乏合成蛋白質(zhì)的原料，或因長(zhǎng)期患消耗性疾病，如嚴(yán)重結(jié)核病、甲狀腺功能亢進(jìn)和惡性腫瘤等，均可造成血清總蛋白的濃度降低。合成障礙，主要是肝功能障礙。肝臟功能嚴(yán)重?fù)p害時(shí)，蛋白質(zhì)的合成減少，以白蛋白的下降最為顯著。蛋白質(zhì)丟失［2］。嚴(yán)重燙傷時(shí)，大量血漿滲出，或大出血時(shí)，大量血液的丟失;腎病綜合征時(shí)，尿液中長(zhǎng)期丟失蛋白質(zhì);潰瘍性結(jié)腸炎可從糞便中長(zhǎng)期丟失一定量的蛋白質(zhì)，這些均可使血清總蛋白濃度降低。

［1］ 葉應(yīng)嫵，王毓三．全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程．第2版．南京:東南大學(xué)出版社，1997:155-156.

［2］ 蒲吉常，等．雙縮脲法測(cè)定血清總蛋白脂血的干擾及排除方法．陜西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，1993，8(1):50.

150000黑龍江省醫(yī)院南崗分院檢驗(yàn)科