雙抗體夾心一步法及兩步法測HBsAg 的結果分析①

晏紅

(江油市第二人民醫院檢驗科 四川江油 621701)

HBsAg的酶免疫檢驗方法根據反應模式分為“一步法”和“兩步法”。“一步法”是將待測樣品和酶標記抗體同時加入到反應孔中進行反應,從反應開始到反應結束大約需要1個小時,而“兩步法”則是先將樣品加入到反應孔中,待反應結束后再加入酶標記抗體,從而使得待測樣品的“捕獲反應”和酶標記抗體的“酶聯反應”分開進行,從反應開始到結束大約需要2個小時。兩步法較一步法相比大大延長了檢測時間,降低了檢測效率,不利于基層醫院的廣泛推廣。由于HBeAg多見于HBsAg陽性的患者血清,HBeAg的檢出是HBV在體內復制及血清具有強感染性的一個指標,血中HBsAg的滴度越高HBeAg的檢出率亦越高[1]。HBeAg陽性可以作為一步法測HBsAg是否出現鈎鐮效應的一個判斷指標。

1 資料與方法

1.1 一般資料

已診斷為慢性乙肝患者的血清標本200份來自我院2010年門診及住院病人以及肝病醫院,372份血液標本來自我院2010年體檢者,186份陰性對照標本來自我院門診體檢者。

1.2 試劑與儀器

試劑由北京萬泰生物藥業有限公司提供;酶標儀KHBST——360,洗板機DNX——9620A系北京普朗新技術有限公司產品。

1.3 方法

嚴格按照雙抗體夾心“一步法”及“兩步法”的操作規程進行操作。

2 結果

(1)2種方法檢測758份血清HBsAg結果,見表1

(2)2種方法的靈敏度、特異度、假陽性率、假陰性率[2]結果(表2)

表1 2種方法檢測758份血清HBsAg結果

表2 2種方法的靈敏度、特異度、假陽性率、假陰性率結果

3 討論

將372例體檢者標本分別用一步法和兩步法檢測,其陽性結果和陰性結果個數及其對應標本的結果是完全吻合的;另外將其中24例陽性標本檢測其HBeAg結果均為陰性。而上述200例乙肝患者標本用一步法測出陰性的2例再進一步檢測HBeAg,發現其HBeAg為陽性,這便是一步法因鈎鐮效應引起的HBsAg假陰性。從上表還可以知道一步法和兩步法檢測的特異度和假陽性率均相同,即二者的誤診率均為零。因此本人認為,2011年國家強制將兩步法取代一步法,雖然一定程度降低了鈎鐮效應提高了檢出率,但大大延長了HBsAg的檢測時間降低了檢測效率,這是檢驗同仁們不愿看到的;為了提高檢測效率,方便就診較遠的同志能當天取得報告,同時發現鈎鐮效應引起的假陰性,可以用一步法聯合檢測HBeAg。當然對于足以引起鈎鐮效應的高濃度的HBsAg,為了有利于臨床診療和治療效果的監測,可以用靈敏度更高的電化學發光和時間分辯熒光免疫檢測進行定量或半定量。由于電化學發光和時間分辯熒光免疫檢測大大增加了檢測成本,加重了就醫負擔,對于需治療的乙肝患者進行臨床治療效果的監測來說是很必要的,但對于絕大多數不用臨床治療的乙肝攜帶者及健康體檢者來說卻是沒有多大的必要。本人通過大量臨床實踐認為,對于兩對半檢測的標本可以先用一步法檢測其HBsAg,如果HBeAg陽性而HBsAg為陰性則是因抗原濃度太高致鈎鐮效應引起的假陰性,此時可以用靈敏度更高的電化學發光和時間分辯熒光免疫檢測進行定量或半定量以準確測出其HBsAg的含量,便于臨床治療及療效觀察;而對于隨診及體檢兩對半者只需進行雙抗體夾心一步法檢測HBsAg就可以了;這樣既降低了檢測成本,同時也大大縮短了檢測時間,適合在基層醫院廣泛開展。

[1]許化溪.病原生物學檢驗—理論與臨床[M].北京:人民衛生出版社,2007.

[2]馬斌榮.醫學統計學[M].第4版.北京:人民衛生出版社,2006.