院內腸桿菌科細菌感染及其對碳青霉烯類藥物耐藥性的研究

陳靜波，崔清潭

（解放軍第三一三醫院檢驗科，遼寧 葫蘆島 125000）

院內腸桿菌科細菌如肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌是醫院感染的主要致病菌，其AmpC、ESBLs酶發生率高。碳青霉烯類藥有廣譜的抗菌活性和較好的通透性，是目前治療腸桿菌科細菌感染的最有效藥物［1－2］。然而，但隨著碳青霉烯類藥的應用，腸桿菌科細菌對碳青霉烯類藥物的耐藥菌株陸續被分離，使臨床上抗感染治療有了很大的挑戰［3］。我們選取2009年9月—2010年9月我院住院患者的送檢標本進行檢測分析，探討院內腸桿菌科細菌的感染并對碳青霉烯類藥物的耐藥性研究，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

選取2009年9月—2010年9月在我院住院病人的送檢標本600例，同一患者多次分離菌株只取1株。細菌鑒定板購自珠海黑馬生物工程有限公司，厄他培南（ETP）紙片（英國Oxoid公司）購自默沙東公司，含美羅培南（MER）藥物、MH瓊脂均購自法國生物梅里埃公司。

1.2 方法

1.2.1 菌種分離及鑒定 將待檢的標本接種于相應的培養基中，于35℃條件下培養1 d，然后分離純化，按照微生物檢驗操作常規進行檢驗。

1.2.2 K－B紙片擴散法 取0.5麥氏單位菌液，將菌液按照標準的K－B法涂抹于MH瓊脂上，抑菌圈邊應細菌生長，采用游標卡尺測量抑菌圈的直徑。在室溫下按照 M100－S19［4］放置15 min，表面干后將貼于瓊脂平板上。35℃下16 h～18 h，厄他培南1 mm參考的精密度評價標準：耐藥為抑菌圈的直徑少于14 mm；中介為抑菌圈直徑15～18 mm；敏感為抑菌圈直徑大于19 mm。

1.3 統計學分析

所有數據均采用SPSS 13.0統計軟件進行統計學處理，計數資料采用χ2檢驗。若P＜0.05，則差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 菌株分布情況 在600例標本中共分離腸桿菌科菌株369株，分離率為61.5%。其中大腸埃希菌106株，占26.00%；肺炎克雷伯菌92株，占17.5%；奇異變形菌63株，占7.50%；陰溝腸桿菌45株，占7.50%；產氣腸桿菌35株，占5.83%；褪色沙雷菌株28株，占4.67%。

2.2 對厄他培南的藥敏性 腸桿菌科細菌對厄他培南的藥敏性見表1。大腸埃希菌（106株）、奇異變形菌（63株）、肺炎克雷伯菌（92株）、陰溝腸桿菌（45株）、產氣腸桿菌（35株）和褪色沙雷菌（28株）對KB法厄他培南抑菌圈直徑分別是7～36 mm、22～36 mm、7～36 mm、12～30 mm、7～33 mm和19～36 mm，平均抑菌圈直徑范圍分別為26 mm、27 mm、20 mm、26 mm、21 mm和31 mm，敏感率分別為97.17%、92.06%、57.61%、94.29%、95.56% 和92.86%。2.3 對美羅培南的藥敏性 腸桿菌科細菌對美羅培南的藥敏性見表2。106株大腸埃希菌、63株奇異變形菌、92株肺炎克雷伯菌、35株產氣腸桿菌、45株陰溝腸桿菌和28株褪色沙雷菌對美羅培南的敏感率分別為96.23%、90.48%、78.26%、88.57%、93.33%和89.29%。

表1 腸桿菌科細菌對厄他培南的藥敏性（株，%）

3 討論

本研究結果顯示，在600例標本中共分離腸桿菌科菌株369株，分離率為61.5%。其中大腸埃希菌106株，占26.00%；肺炎克雷伯菌92株，占17.5%；奇異變形菌63株，占7.50%；陰溝腸桿菌45株，占7.50%；產氣腸桿菌35株，占5.83%；褪色沙雷菌株28株，占4.67%。106株大腸埃希菌、63株奇異變形菌、92株肺炎克雷伯菌、35株產氣腸桿菌、45株陰溝腸桿菌和28株褪色沙雷菌對厄他培南的敏感率分別為97.17%、90.48%、57.61%、94.29%、95.56%和92.86%；對美羅培南的敏感率分別 為 96.23%、96.83%、78.26%、88.57%、93.33%和89.29%。碳青霉烯類抗菌藥有較強的抗菌作用，廣泛抗菌譜及對β－內酰胺酶穩定性高，其對肺炎克雷伯菌、產ESBLs大腸埃希菌有高度抗菌作用［5－7］。本文常見的腸桿菌科細菌對碳青霉烯類藥物敏感性大于57%，除肺炎克雷伯菌外，其他細菌對厄他培南耐藥性均超過92%。厄他培南是一種新型的廣譜碳青霉烯類抗菌藥物（由美國默沙東公司最新研發），聯合青霉素結合蛋白抑制細菌細胞壁升成，阻滯細菌增長［8，9］。目前已廣泛使用自動化藥敏檢驗系統，但藥敏板條大多無厄他培南，阻礙了產KPC酶菌株的及時發現與控制。所以，應采用不同方法檢測腸桿菌科細菌對厄他培南的耐藥性。

表2 腸桿菌科細菌對美羅培南的藥敏性（株，%）

在臨床上，革蘭陰性腸桿菌科細菌是感染的主要病原菌，大腸埃希菌、奇異變形菌、肺炎克雷伯菌、產氣腸桿菌、陰溝腸桿菌及褪色沙雷菌為感染流行細菌，應加強阻滯該菌株的感染。

產KPC酶菌選擇的重點內容為測定腸桿菌科細菌對碳青霉烯類抗菌藥物的耐藥性，而藥敏方法測定KPC酶介導的碳青霉烯類抗菌藥物的耐藥性差異較大，明顯是產酶菌接種效應［10］，且菌量也不同。本文腸桿菌科細菌中的產氣腸桿菌、奇異變形菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、褪色沙雷菌對厄他培南的耐藥率分別為1.89%、4.76%、34.78%、0%、4.44%、0%；美羅培南的耐藥率分別為 3.77%、4.76%、19.57%、8.57%、6.67%、10.71%。說明除肺炎克雷伯菌外，腸桿菌科細菌對厄他培南的敏感性均高于美羅培南，但差異無統計學意義（P＞0.05）。若腸桿菌科細菌出現對厄他培南耐藥、中介，則對美羅培南耐藥。

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