UF-50全自動尿沉渣分析儀對尿液有形成分檢測結果干擾因素分析

楊秀清，高 蕾，李 程，秦晨曦，李雪蓮，袁小美

尿沉渣檢驗有較高的臨床診斷價值，是尿液分析的重要內容。UF-50全自動尿沉渣分析儀因操作簡便、重復性好等特點在臨床檢驗中的應用越來越廣泛。但尿液成分具有多樣性、復雜性的特點，有些成分的大小、形態以及性質相近，UF-50分析儀均無法正確識別與分類，因而會對所有檢測項目產生干擾，導致某些檢測結果的假陽性或假陰性，且與尿干化學分析結果不一致［1-2］。本文對UF-50全自動尿沉渣分析儀對尿液有形成分檢測結果的干擾因素進行分析，旨在為臨床提供更加可靠的診斷依據。

1 UF-50全自動尿沉渣分析儀檢測尿液有形成分的機制

UF-50全自動尿沉渣分析儀利用流式細胞計數法(FCM)技術來獲得尿液中的細胞前向散射光及前向熒光的強度參數，在對細胞進行熒光染色后，每個細胞都暴露在高度密集的激光束照射之下，單個細胞會按不同角度發出熒光和散射光。系統將對這些電信號進行分析，按照熒光強度和散射光強度生成二維散點圖，以便對各種有形成分進行識別。從前向散射光的發光強度可獲知細胞的大小和表面狀態等，從染色細胞發出的熒光可獲知細胞表面和胞質內的性狀，以及細胞核的性質。

2 尿液有形成分檢測及干擾因素

2.1 管型 UF-50全自動尿沉渣分析儀根據管型內容物染色后產生的熒光強度來區分病理管型和透明管型，不能作病理管型的分類［3］。

2.1.1 假陽性原因:管型檢測的假陽性率最高［4］。主要原因有:①由于管型、上皮細胞及黏液絲的形態、大小、染色性有許多相似之處，導致儀器不能準確區分。尤其是合并感染時黏液絲和上皮細胞增多，會造成管型的假陽性增高［5］。大量精子堆積在一起形成類柱狀體，與管型相似，分析儀測出的強散射光信號和強熒光信號為假管型［6］。②有時少量白細胞聚集成膿細胞或黏附于黏液絲上，其前向散射光強度、熒光強度等測定信號偏離尿白細胞的信號范圍，也可被誤認為管型［7］。③另外尿液變質、尿pH值＞9，應用嘧啶類、青霉素類等藥物，尿液中含有較多分泌物時尿蛋白可出現假陽性。因此，腎病患者的尿液不適合用干化學過篩檢驗，對于尿蛋白陽性的尿液標本，必須輔以鏡檢［8］。

2.1.2 假陰性原因:管型檢測假陰性率較低。鏡下可見少量透明管型時會導致管型檢測假陰性。可能是由于管型短小使前向散射光強度降低，熒光脈沖較少、較低而導致漏檢［4］。某些蛋白尿形成的管型短小或斷裂而被漏檢［9］。尿蛋白和尿管型的主要成分是白蛋白，尿干化學反應主要對白蛋白敏感，而對球蛋白不敏感。某些尿蛋白陽性的病例儀器不能確認是否存在管型，必須鏡檢才能發現。尿管型與尿蛋白有一定的相關性，但并非平行關系［10］。

2.2 尿白細胞 尿白細胞檢測對泌尿系統感染等疾病的診斷有重要價值。尿白細胞種類較多、形態多樣、大小不一，因此其所產生的前向散射光強度及電阻抗等測定信號變化范圍較大，較易出現假陽性或假陰性，檢測過程中應加以注意。

2.2.1 假陽性原因:①大多數情況下，分析儀測定白細胞的結果與鏡下所見基本相符［11］，但某些原因如上呼吸道或尿路感染，特別是婦科疾病所引起的上皮細胞增多時，儀器會將某些上皮細胞誤認為白細胞，從而造成假陽性［10］。②尿液中某些成分如上皮細胞(尤其是腎小管上皮細胞)、大量非定形尿酸鹽結晶、成堆細菌顆粒等，其大小及染色敏感性與尿白細胞相似，測定信號與尿白細胞相近或重疊，儀器分析時誤將以上成分計數為尿白細胞，導致假陽性［7］。③尿液中含有真菌時也會對白細胞計數產生干擾。尿液中只含有真菌時，會造成真菌的假陰性和白細胞的假陽性。當尿液中同時含有白細胞和紅細胞時分為兩種情況，白細胞濃度低時，儀器對白細胞計數準確，對紅細胞的計數出現錯誤。當白細胞濃度高時，真菌對白細胞計數產生干擾，造成假陽性。提示尿液中有形成分組成和濃度對白細胞造成的干擾是不同的［12］。

2.2.2 假陰性原因:①腎移植患者發生排異反應、慢性扁桃體炎、慢性腎炎時，尿液中以淋巴細胞為主，干化學分析儀法檢測白細胞為陰性，鏡檢法檢測為陽性［2，13］。尿液中以單核細胞為主時也會出現此結果［2］。②有時少量尿液白細胞聚集成膿細胞或黏附于黏液絲，測定信號偏離尿白細胞信號范圍，可被誤認為管型等其他成分而被漏檢，造成假陰性。UF-50分析儀僅適用于過篩檢測，工作中必須用鏡檢法復檢，以免漏檢［4，7］。③黃疸尿也會造成白細胞假陰性，由于膽紅素的顏色與散射光及熒光的抵消作用影響，使白細胞計數隨黃疸程度增加而減少［14］。④低滲尿及堿性尿白細胞增大，而高滲尿及酸性尿白細胞萎縮，可能導致漏檢，造成假陰性［7］。

2.3 尿沉渣 尿沉渣檢測尤其是紅細胞的檢測對泌尿系統疾病的診斷、輔助診斷及治療有重要意義。UF-50分析過程中易受結晶、類酵母細胞及其他雜菌、精子等干擾，當儀器出現報警時，必須用鏡檢確認［15］。如結晶標志、類酵母細胞標志、精子標志出現(+)和(或)出現紅細胞信息異常時，必須鏡檢復核以排除假陽性結果［16-17］。

2.3.1 假陽性原因:①結晶對紅細胞結果影響很大。有研究表明50%假陽性源于結晶。由于尿中的草酸鈣結晶、非晶型鹽類結晶等與紅細胞大小、形態，熒光強度、染色敏感度和前向散射光強度均與紅細胞相似，故常被誤認為紅細胞而出現假陽性［18］。②也有研究認為，在影響檢測準確性的因素中細菌占首位(47．2%)［19］。主要原因可能是尿液中存在大量球菌和桿菌時，細菌可代謝產生一些有毒物質(如內毒素)，使細菌在尿液中結成堆，菌落大小與紅細胞相似，被誤認為紅細胞而產生干擾。有研究證實，一定濃度的細菌會使尿液紅細胞計數出現假陽性，其中葡萄球菌對紅細胞計數影響最明顯，可能與其形態排列有關，而革蘭陰性桿菌和腸球菌對紅細胞計數影響較小，但其濃度較大時會出現聚集排列，因此也會影響紅細胞計數［20］。有報道稱，利用UF-50全自動尿沉渣分析儀檢測時，金黃色葡萄球菌可影響其對尿紅細胞計數的測定結果，但并無規律，應輔以鏡檢確診［16］。當細菌濃度較高且聚集，大小與紅細胞相近時，散點分布與紅細胞有重疊，分析儀有可能將其誤認為紅細胞，造成紅細胞計數的假陽性。③酵母菌的影響。酵母菌形態、大小和前向散射光強度與紅細胞相似而被誤認為紅細胞［21］;類酵母樣細胞，由于草酸鈣結晶和類酵母樣細胞與尿液紅細胞具有相似的熒光或前向散射光特性［22］，降低了分析儀對紅細胞的識別能力。精子、卵磷脂小體、脂肪滴可影響紅細胞計數，精子雖然前向散射光強度小，熒光強度高，但其成堆時，儀器無法區分，散射光強度可能會與紅細胞接近而造成假陽性［18］。④標本含有大量細菌，超出儀器設定范圍，導致紅細胞計數的偏差;標本含有不完整管型被染色誤認為是紅細胞［18］。⑤尿干化學法檢測時，如果尿中有肌紅蛋白、次氯酸鹽、氧化型清潔劑或細菌尿時，可引起尿紅細胞假陽性［14］，尿液清潔度不夠或混濁時，尿液中的雜質易被誤認為是紅細胞，從而影響分析結果，出現假陽性［18］。

2.3.2 假陰性原因:紅細胞假性減低的主要干擾因素為患者本身的紅細胞具有高度異形性，其次是紅細胞附著在黏液絲上。當尿中出現血紅蛋白時，分析儀檢測潛血反應陽性，但是鏡檢為陰性。

2.3.2.1 紅細胞的形態異常:分析儀只能對尿中完整紅細胞有形成分進行檢測，對異形紅細胞如球形紅細胞、棘形紅細胞等會漏診［23］，導致假陰性。原因:①畸形紅細胞。某些畸形紅細胞大小僅為正常紅細胞的1/8～1/10，低倍視野根本無法看到，高倍視野僅見很小的環狀形，折光性弱;“鬼怪影”畸形，普通高倍視野隱約可見，位相鏡通過正負相對比可觀察;小球形畸形，細胞整體固縮，折光性強，胞膜增厚，易將這類紅細胞誤認為酵母菌或真菌孢子［24］;一個紅細胞出現多個芽孢，使胞體變小，芽孢在四周連接成花環形。②由于病變導致紅細胞膜改變，造成紅細胞的破裂及芽孢的脫落，血紅蛋白溢出，出現影細胞、紅細胞碎片、紅細胞高度異形性或聚集時易導致假陰性［18］。高倍視野下僅能觀察到形態不規則的小紅細胞碎片，由于形狀不規則且折光性弱，很容易將其看作其他雜質［24］。當UF-50全自動尿沉渣分析儀測定結果出現紅細胞陽性且為腎內科患者，必須進行顯微鏡復檢，以提高檢測的準確性［18］。

2.3.2.2 紅細胞附著在黏液絲上:UF-50全自動尿沉渣分析儀雖具有吹打自動混勻功能，但不能徹底混勻附著在黏液絲上的紅細胞團，尤其是吸樣時只能定量吸取，如未能吸到紅細胞團，就造成了紅細胞假性減低，白細胞假性減低也是此原因［1］。

2.3.2.3 干化學法檢測:當尿中存在大量維生素C，可影響尿紅細胞計數，使結果出現假陰性［10］。尿液中含有對熱不穩定的酶、菌尿及存放時間過長均可導致潛血陽性，而鏡檢紅細胞陰性［2］。陳舊尿液的標本，即便紅細胞溶解，分析儀也能打印出來，但顯微鏡下檢測不到［10］。

尿液分析儀潛血反應既能與完整的紅細胞發生陽性反應，也可與紅細胞溶解釋放的血紅蛋白發生陽性反應，而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的紅細胞。血管內溶血、上尿路出血時尿液分析儀潛血陽性，但尿沉渣鏡檢觀察不到紅細胞或僅見紅細胞碎片。當心肌或骨骼肌發生嚴重損傷尿液中還有肌紅蛋白時，分析儀檢測潛血陽性，鏡檢紅細胞陰性［2］。非發酵菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌對潛血結果影響較大，其中銅綠假單胞菌的影響最顯著。可能主要與其產生的細胞色素氧化酶有關，大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均可產生過氧化物酶，從而影響潛血結果的檢測，腸球菌和白假絲酵母菌不產生此類物質，故對結果影響不明顯［24］。

UF-50分析儀主要起過篩作用，而尿液中有形成分復雜，顯微鏡檢查可對有形成分進行最直觀的分析，因此，陽性標本應與鏡檢結合，從而避免儀器檢測造成的誤診、漏診，提高尿沉渣檢測的質量。

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