2012年上半年焦作進境皮張炭疽監測調查

桂瑾　鐘曉鵬　張保軍

[摘要]前言：本文通過對焦作地區2012年上半年進境皮張抽樣進行炭疽監測調查，分析測定那些來源國家進境皮張中可能攜帶炭疽疫病，及炭疽疫病在進境皮張中是否存在隱性或潛在威脅。實驗室檢測：利用阿斯科利（Ascoh）實驗，對抽取的100份試驗樣品，涉及357585張，來源7個國家的進境皮張進行炭疽檢測及結果分析。討論：目前鹽潰的皮張攜帶炭疽的可能性相對較少，為進口皮張的檢疫監管提供了確鑿的試驗數據，在保障進境皮張安全的同時，對保障我國A-R，身體健康也具有重要的意義。

[關鍵詞]進境皮張檢驗檢疫炭疽監測

焦作地區進境皮張深加工業的發展是伴隨著我國改革開放的進程而逐步發展壯大起來的。目前主要品種包括鹽漬綿羊皮、鹽漬山羊皮及生牛皮等。根據河南出入境檢驗檢疫局統計，從近11年時間來全省進口皮張數量來看，每年焦作進口皮張數量約占全省進口皮張總量的90-97％左右，年出口創匯多達幾十億美元，現已發展成為亞洲最大的鞋里皮生產加工銷售基地和羊剪絨制品集散地。

炭疽桿菌病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患急性傳染病，是一種重要的人獸共患自然疫源性疾病，現已列為國家二類疫病，而皮張中又極易攜帶和傳播炭疽病，因此對進境皮張的炭疽檢疫監測工作是十分重要和必須的。

實驗室監測：現就2012年上半年焦作地區進境皮張情況進行檢疫監測調查，具體調查方法及實驗監測步驟如下：

一、調查方法

原則是根據來源國家、地區及進境皮張的品種等特點，涵蓋2012年上半年進境皮張的所有典型皮張。從指定批次進境皮張中，隨機選取有代表性樣品進行實驗室檢測。

二、檢測對象

抽取的有代表性進境皮張

三、實驗采用標準

SN／T1700-2006《動物皮毛炭疽Ascoli反應操作規程》

器材：高壓消毒器、50uL～200uL單通道移液器、普通冰箱、浸樣瓶、反應管、顯微鏡、超凈工作臺、恒溫培養箱、革蘭氏染色液等

四、藥品與診斷試劑

浸樣液、炭疽沉淀素標準抗原、炭疽沉淀素陽性血清、炭疽沉淀素陰性血清

五、方法及步驟

1在進境皮張專用原皮庫中，抽取指定批次的皮張，選擇根據國家質檢總局及SN／T2123-2008《出入境動物檢疫實驗樣品采集、運輸和保存規范》及GB／T18088-2000《出入境動物檢疫采樣》要求，隨機選取有代表性，優先采集有疑似病變部位，一般從每張皮的腿部或腋下剪取樣皮一塊約2cm2，裝入特制的樣品袋中，送實驗室檢測。

2將樣品及樣品袋放入高壓滅菌器中，103kPa12l℃消毒30min。

3高壓滅菌后，將消毒后的樣品去除脂肪，每5塊被檢皮樣為一組放入浸樣瓶中，并記錄樣品編號和相對應的浸皮瓶號。按質量：體積=1：10的比例加入皮浸液，在室溫下浸泡16～24h后，中性濾紙過濾，其澄清液為被檢樣品。

4對照試驗

4.1炭疽沉淀素陽性血清對照試驗

在一支加有100uL-200uL1：5000標準炭疽抗原的反應管中，徐徐加入等量的炭疽沉淀素陽性血清，抗原液面與血清接觸面必須清楚。15分鐘內判定結果。

4．2炭疽陰性血清對照試驗

在一支加有100uL-200uL標準炭疽抗原的反應管中，徐徐加入等量的1：5000炭疽沉淀素陰性血清，抗原液面與血清接觸面必須清楚。15分鐘內判定結果。

5樣品試驗

反應管中加入100uL-200uL的炭疽沉淀素陽性血清，作陽性血清對照反應管。同時另取一反應管加入等量的1：5000炭疽陰性血清，作陰性血清對照反應管。

將等量被檢皮樣抗原徐徐加入到試驗反應管和陰性血清對照反應管中，使之形成清晰的界面。15分鐘內判定結果。

六、結果的判定

1炭疽沉淀素陽性血清對照試驗：兩界面出現清晰、致密的白色沉淀環。

2炭疽陰性血清對照試驗：兩界面無白色沉淀環出現。

3被檢樣品試驗

3．1陰性血清對照反應管：應呈陰性反應，兩界面無白色沉淀環出現。

3．2對照實驗成立后判定結果：

陰性反應：反應管中陽性血清與被檢樣品浸泡液界面清晰，并且沒有出現白色沉淀環。

陽性反應：反應管中陽性血清與被檢樣品浸泡液界面清晰，并且出現致密的、明顯的白色沉淀環。

可疑反應：反應管中陽性血清與被檢樣品浸泡液界面清晰，并且出現模糊、疏松、不明顯的白色沉淀環。

七、檢測結果分析

上半年在進口皮張進行檢驗檢疫的過程中，抽取了100份試驗樣品進行炭疽檢測及結果分析，涉及皮張數量357585張，來源7個國家。從100批進境皮張炭疽檢測結果來看，抽取的樣品中未發現其攜帶疑似炭疽病菌。

從以上圖表中可以看出，澳洲進口皮張占抽檢樣品的86％，美國等其他國家總共占14％。作為“騎在羊背上的國家”澳大利亞來說其畜牧業在世界上是非常有名的，畜牧業發展水平非常高，其國家的檢疫要求也非常嚴，焦作進口澳大利亞皮張量占全國總進口綿羊皮量的70％左右。

從以上表中可以看出，鹽漬綿羊皮占抽樣皮張批次的92％，鹽干羊皮。和鹽漬牛皮總共占8％。從皮張的腌制方法來看，鹽漬綿羊皮比鹽干羊皮的炭疽發生風險較低，因炭疽桿菌繁殖體對日光、熱和常用消毒劑都很敏感，其芽孢的抵抗力很強，在煮沸10min后仍有部分存活，在干熱150℃

可存活30～60min，在濕熱120℃40min可被殺死。芽胞也可在動物、尸體及其污染的環境和泥土中存活多年。新鮮腌

制的羊皮比風干后的羊皮發生炭疽感染的機率更低。

討論：

1皮張加工業是焦作地區少數民族傳統產業，隨著國際經濟的發展及國內環保、勞動保護等方面的加強，同時產品價格上漲的幅度相對于原皮的上漲影響較低，直接導致目前原皮生產的利潤越來越低，目前企業為了降低生產成本，開始試著從其他一些國家進口皮張，這就加大了檢驗檢疫執法把關的難度，無形中也給皮革制造業帶來的許多新的風險和疫情隱患。

2炭疽桿菌在外界環境條件下易形成芽抱，抵抗力很強，特別在動物皮張上長期存在。若生產加工染疫皮張，炭疽桿菌有可能會從皮膚侵入，引起皮膚炭疽，使皮膚壞死形成焦痂潰瘍與周圍腫脹和毒血癥，亦存在引起肺炭疽或腸炭疽的可能性。

3通過對2012年上半年炭疽檢測結果分析來看，進境皮張中攜帶炭疽病的可能比較低，但也不排除攜帶的可能性，因抽到的畢竟是少量的，不可能做到進境皮張的逐張檢疫檢測。

4經過鹽漬的進境皮張一般至少鹽漬半個月以上，這也從另外一個方面降低了炭疽芽孢的存活幾率。

5通過分析進境國家，可以看出澳大利亞的進境皮張占70％以上，其國家對出口皮張的除害處理技術比較成熟，檢疫要求比較嚴格，且澳大利亞為無炭疽疫病國家，相對攜帶炭疽疫病的風險較低。

6對進境皮張的炭疽監測工作可以將檢測重點放在一些進口量較少、畜牧業相對落后的、歷史上爆發過炭疽病的、我國首次進口該國皮張的國家或地區。

7目前進行的炭疽阿斯科利（Ascoli）實驗只是對炭疽病進行初篩實驗，不排除假陰性的現象，因為炭疽在皮張中絕大多數都是以芽胞的形式存在，其具有毒力強、高潛能、可視性低，在干燥的室溫環境中可存活20年以上等特點，因此給進境皮張的炭疽檢測工作帶來了許多困難。

8在與外商簽訂貿易合同時，應注明我國的檢驗檢疫相關要求。