高效液相色譜法測定鹽酸林可霉素預混劑中林可霉素的含量

朱曦　劉引蘭　董文婷

摘要:獸藥鹽酸林可霉素預混劑含量測定收載于《進口獸藥質量標準》1999年版,是采用生物效價管碟法測定,該方法操作步驟復雜,影響因素多,檢測時間長。參考《中國獸藥典》2010年版收載的鹽酸林可霉素檢測方法,利用HPLC法進行檢測,使用C18色譜柱,柱溫(30±5)℃,以0.05mol/L硼砂溶液∶甲醇(1∶1)為流動相,檢測波長為214nm。林可霉素峰與林可霉素B峰分離良好,林可霉素峰與相鄰雜質峰的分離度符合要求,變異系數(RSD)小于1.5%。結果表明通過高效液相色譜法(HPLC)能快速準確地測定獸藥鹽酸林可霉素預混劑中林可霉素的含量。

關鍵詞:高效液相色譜;鹽酸林可霉素預混劑;含量測定

中圖分類號:S859.79+6文獻標識碼:B文章編號:1007-273X(2012)10-0004-02

鹽酸林可霉素(Lincomycin Hydrochloride)又稱潔霉素,化學式C18H34N2O6S,為林可胺類藥物,屬窄譜抗生素。作用機理為抑制細菌細胞蛋白質的合成,有較好的抗革蘭氏陽性菌作用,特別是對葡萄球菌、溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌有較強的抑制作用,但其作用效果不及青霉素類和頭孢類[1]。臨床主要用于敏感菌引起的各種感染,如呼吸系統、免疫系統、皮膚及泌尿系統等組織的感染。用作飼料添加劑時可促進肉雞和育肥豬生長,提高其飼料利用率。隨著獸藥行業的發展,其監督制度日益完善,為了適應獸藥生產單位質量自控與監督檢驗機構逐漸增加的監督檢驗任務的需要,本試驗利用高效液相色譜(HPLC)檢測原理,建立了快速、準確的用高效液相色譜(HPLC)法測定獸藥鹽酸林可霉素預混劑中林可霉素含量的方法。

1材料與方法

1.1主要儀器與試劑

2結果

2.1適應性試驗結果

適應性試驗結果表明林可霉素與林可霉素B兩峰完全分離,相鄰之間的分離度為4.35(表1)。色譜峰峰形較好,兩峰系統適應性良好(圖1)。積分基線在同一水平,表明其積分穩定,樣品主峰保留時間與標準品主峰保留時間一致,說明所測物質相同。由于樣品是預混劑,物質成分復雜,雜質峰容易影響主物質峰,此方法中樣品主峰與雜質峰分離較好(圖2)。空白溶液中主峰出峰時間無雜質峰和溶劑峰,表明流動相及溶劑對本方法無干擾。

3結論

本試驗建立了高效液相色譜(HPLC)法測定獸藥鹽酸林可霉素預混劑中林可霉素的含量。試驗結果表明,樣品溶液與對照品溶液出峰時間一致,積分穩定,林可霉素峰與林可霉素B峰分離度達到規定要求,與雜質峰完全分離,系統穩定性好。該方法測出樣品峰面積的對數與濃度呈良好的線性關系,平均回收率為97.9%,相對標準偏差(RSD)為1.0%。采用本法檢測與國內現行的《進口獸藥質量標準》所采用的抗生素微生物測定法(生物效價法)相比,檢測結果相對一致,且本法具有快速、簡便、準確、穩定性和重現性好、能夠批量檢驗等優點。適用于實際生產、質量監督等過程中對鹽酸林可霉素預混劑中林可霉素含量的測定,為該產品的質量控制與分析提供了有力的技術保障。

參考文獻:

[1]中國獸藥典委員會.獸藥使用指南化學藥品卷[S].北京:中國農業出版社,2005.

[2]中華人民共和國農業部.進口獸藥質量標準[S].北京:中國農業出版社,1999.

[3]中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典[S].北京:中國農業出版社,2010.