酶聯(lián)法與乳膠法檢測(cè)乙肝病毒的比對(duì)試驗(yàn)

李家增 邰 怡

吉林鐵路疾病預(yù)防控制所通化市疾控站，吉林通化 135000

乙型肝炎（乙肝）是我國(guó)現(xiàn)階段重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題[1]。特別是隨著乙肝疫苗接種人群的加大，乙肝病毒抗體及其他標(biāo)志物的檢測(cè)已成為疫苗接種人群和病毒性肝炎人群的實(shí)際需求。我們微生物檢驗(yàn)科于2011年對(duì)來(lái)該所進(jìn)行健康體檢的中鐵九局1025例職工的血清標(biāo)本進(jìn)行了乙肝病毒標(biāo)志物（HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc）的檢測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

1025例血清標(biāo)本均來(lái)自中鐵九局健康體檢人群。

1.2 試劑

酶聯(lián)試劑購(gòu)自上海科華生物工程股份有限公司。乳膠試劑購(gòu)自艾康生物技術(shù)（杭州）有限公司。PCR試劑盒由上海愛(ài)復(fù)華科技開(kāi)發(fā)總公司生物技術(shù)開(kāi)發(fā)中心提供，以上試劑均在效期內(nèi)使用。

1.3 儀器

多功能酶標(biāo)儀型號(hào)為RT-2100C，由深圳雷杜公司生產(chǎn)。洗板機(jī)型號(hào)為RT_2600C，由深圳雷杜公司生產(chǎn)，PCR擴(kuò)增儀由美國(guó)PROMEGA公司生產(chǎn)。

1.4 方法

酶聯(lián)免疫法和乳膠法均按試劑盒說(shuō)明書操作。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用四表格資料的χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法檢測(cè)血清標(biāo)本中乙肝病毒標(biāo)志物的比對(duì)情況

詳見(jiàn)表1。

表1 兩種方法檢測(cè)血清標(biāo)本中乙肝病毒標(biāo)志物的比對(duì)情況[n(%)]

2.2 1025例血清標(biāo)本中酶聯(lián)法檢出HBsAg

41例，陽(yáng)性率為40%，乳膠法檢出HBsAg 40例，陽(yáng)性率為39%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)χ2檢驗(yàn)后，兩者對(duì)HBsAg的檢測(cè)能力無(wú)顯著性差異。檢出大三陽(yáng)9例，小三陽(yáng)22例，HBsAg與抗-HBc同時(shí)陽(yáng)性2例, HBsAg單純攜帶7例。抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc等標(biāo)志物的檢測(cè)兩種方法完全一致。在1025例的血清標(biāo)本中，有572例抗-HBs陽(yáng)性，表抗體陽(yáng)性率為55.8%，占總例數(shù)的一半以上。HBeAg陽(yáng)性率為0.8%，抗-HBe陽(yáng)性率為2.1%，抗-HBc陽(yáng)性率為3.2%，其中酶聯(lián)法檢出的一例HBsAg，用乳膠法反復(fù)檢測(cè)，結(jié)果始終為陰性，經(jīng)HBV-DNA測(cè)定，結(jié)果也是陰性，故該例被視為假陽(yáng)性[2]。本次試驗(yàn)乳膠法的靈敏度和特異度均為100%，酶聯(lián)法在本次試驗(yàn)中，靈敏度大于100，特異度99.9%。兩種試劑對(duì)乙肝病毒標(biāo)志物檢測(cè)能力良好。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)室在多年的工作實(shí)踐中，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)乳膠法出現(xiàn)假陽(yáng)性的現(xiàn)象，而且乳膠法多次實(shí)驗(yàn)相同的標(biāo)本重復(fù)性完全一致，該方法簡(jiǎn)單，易于操作，容易掌握,雖然不能定量檢測(cè)乙肝病毒血清標(biāo)志物的存在，但用于預(yù)防醫(yī)學(xué)及健康人群乙肝病毒標(biāo)志物的篩查還是首選的簡(jiǎn)便方法之一。本次試驗(yàn)出現(xiàn)的一例HBsAg假陽(yáng)性的結(jié)果，至今原因不明，用酶聯(lián)法反復(fù)檢測(cè)結(jié)果始終為陽(yáng)性，也可能是操作手法，也可能是試劑的原因，有待探討。洗板機(jī)洗版，經(jīng)常發(fā)生堵針現(xiàn)象，所以在洗版的時(shí)候，要密切觀察洗版過(guò)程，防止由于堵針造成的假陽(yáng)性或假陰性的現(xiàn)象。本次試驗(yàn)篩查出表抗體陽(yáng)性人數(shù)為572人，陽(yáng)性率為55.8%，這是本實(shí)驗(yàn)室歷年檢出表抗體陽(yáng)性人數(shù)最多的一年，可以證明大力普及乙肝疫苗接種措施是有效的。

[1] 莊輝.乙型肝炎流行病學(xué)研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊(cè)，2004，31（3）：133-135，138.

[2] 王羽，張宗久，趙明鋼.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006.