何靜妹 朱占蘭 馬善源 殷海波 陳玉萍 沈蘭鳳 王 斌
1.徐州醫學院基礎學院(指導老師),江蘇徐州 221004;2.徐州醫學院醫學技術學院醫學檢驗專業08級檢驗班,江蘇徐州 221004
隨著科技的發展,電腦走入了人們的生活和工作,豐富了生活,方便了學習,提高了工作效率,人們通過人機對話,消除了時空界限。在生活和工作中,越來越多的人自覺離不開電腦。而人們使用電腦主要是通過雙手手指敲擊鍵盤來獲得信息或工作,因此,一旦鍵盤攜帶細菌,尤其是致病菌或危險菌(耐藥菌或多重耐藥菌),可以通過手-鍵盤-手的方式,造成交叉感染或環境污染。作為大學的專職教師自然辦公離不開電腦,離不開敲擊鍵盤,本次研究選取本校專職教師辦公用電腦鍵盤,原因在于醫學院校老師衛生意識強,而且辦公室電腦作為學校公共資產,可以在小范圍內互相使用,這就存在交叉感染或污染的潛在可能,那么,鍵盤上所攜細菌對抗生素的敏感性如何?是否存在危險菌即致病菌或耐藥菌甚至多重耐菌?以提醒人們要衛生用電腦和健康用電腦。
2010年7 月19 ~23 日,隨機抽樣分析我校專職教師辦公室電腦鍵盤50個,無菌采集每個鍵盤的空格鍵、大鍵盤的回車鍵(Enter)、刪除鍵(Delete)、鼠標左鍵、Esc 鍵、小鍵盤的小數點鍵和F7鍵上的標本。
無菌采樣的標本,進行人工分離培養與鑒定。首先,在實驗室超凈工作臺中,將標本接種于普通瓊脂培養,37℃孵育18~24h,觀察細菌生長情況,進行菌落計數,革蘭染色,并進行增菌培養,以期進一步做生化鑒定。采用的細菌微量生化試管及氧化酶試紙/試劑等均購置于杭州微生物試劑有限公司。查閱《醫學細菌生化試驗鑒定手冊》相關內容[1]鑒定出菌種。對分離的398株細菌進行抗菌藥物敏感性分析,選用標準質控菌株金黃色葡萄球菌ATC25923和大腸埃希菌ATC25922。采用紙片瓊脂擴散法即 Kirby-Bauer(K-B)K-B 法,37℃孵育 18~24h,準確讀取抑菌圈直徑,依據美國臨床實驗室標準委員會(NCCLS)標準和解釋,作出“敏感”(susceptible,S)、“耐藥”(resistant,R)、“中介”(intermediate,I)的判斷。選擇實驗室常用抗生素藥敏紙片,有丁胺卡那霉素(AN)30ug/mL,慶大霉素(GM)10ug/mL,氨芐青霉素(AM)10ug/mL,鏈霉素(S)10ug/mL。藥敏紙片購置于溫州市康泰生物有限公司。均在有效期內。
采集50個鍵盤共400個鍵,其中,常用鍵:空格鍵、退格鍵(Backspace)大鍵盤的回車鍵(Enter)、刪除鍵(Delete)、鼠標左鍵,菌落計數共計約1.2×106 cfu/mL;不常用鍵:Esc鍵、小鍵盤的小數點鍵和F7鍵,合計菌落計數約6.9×105 cfu/mL;每個鍵盤上平均檢出約3~7種不同的細菌。表1為50個鍵盤采樣所分離的細菌情況。

表1 50個鍵盤采樣所分離的細菌情況
2.2 分離細菌的藥物敏感結果
400 個鍵盤分離菌量排前5位的細菌的對AN、GM、AM和S的藥敏結果,見表2。本次實驗共對分離的398株細菌進行抗菌藥物敏感性分析,結果:398株細菌對丁胺卡那霉素(AN)有387株敏感,5株中介,6株耐藥;對慶大霉素(GM)398株均敏感,不存在耐藥株或中介株;對氨芐青霉素(AM)有317株敏感,22株中介,59株耐藥;對鏈霉素(S)有 349株敏感,13株中介,36株耐藥。 平均耐藥率約為 6.34%((6+0+59+36)/4/398),平均中介率為2.51%((5+0+22+13)/4/398),平均敏感率為 91.14%((387+398+317+349)/4/398)。多重藥物敏感試驗結果:有20株細菌同時對兩種或三種抗生素表現耐藥或中介。其中,同時耐AM和S的細菌為:球形芽胞桿菌、粘質沙雷菌、嗜熱脂肪芽胞桿菌、假白喉棒狀桿菌、側孢芽胞桿菌和塵埃芽胞桿菌共分離10株;同時耐AN和AM的細菌有短形芽胞桿菌1株;檢查出一株表皮葡萄球菌同時耐AM、AN和S;一株球形芽胞桿菌同時耐AN、S和對AM中介。

表2 分離菌量排前5位細菌的藥敏結果
本次研究隨機抽樣我校專職教師辦公室電腦鍵盤50個,無菌采樣400個鍵,分離培養出的細菌主要為球形芽胞桿菌、表皮葡萄球菌、塵埃芽胞桿菌、藤黃微球菌、枯草桿菌、假白候棒狀桿菌、干燥棒狀桿菌、嗜熱脂肪桿菌、蠟樣芽胞桿菌、巨大芽胞桿菌、干燥棒狀桿菌等,分離到霉菌共111株,占分離率的28%,分離出一株金黃色葡萄球菌。在分離的細菌中以革蘭陽性菌為主,尤其是芽胞桿菌,如球形芽胞桿菌、塵埃芽胞桿菌、枯草桿菌、嗜熱脂肪桿菌、蠟樣芽胞桿菌、巨大芽胞桿菌等。芽胞對外界的理化因素有強大的抵抗力,再加上電腦鍵盤上相對干燥,對營養要求較高的細菌如乙型溶血鏈球菌、肺炎鏈球菌等往往不利于長期存活,而對營養要求不高的腸道桿菌,如大腸埃希菌、志賀菌或沙門菌等因抵抗力弱,也不利于在鍵盤上長期存活。除非像一些公共網吧,個別人邊操作電腦邊進食,鍵盤上會留有食物殘渣、水分,利于細菌生長繁殖,發現存在革蘭陰性桿菌如大腸埃希菌、銅綠假單胞菌等[2-3]。我們在對教師電腦鍵盤采樣時,發現我校專職教師辦公室用的電腦鍵盤普遍都比較干凈,不潮濕,沒有食物殘渣,有些鍵因長期不注意有些浮塵,總之,給我們留下較好的印象,不愧為是醫學院的專職教師,有較強的衛生意識。但即使是這樣一群人使用的電腦鍵盤,我們也從分離出了一些致病菌,如金黃色葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌等,其他大多為條件致病菌。值得重視的是鍵盤上所攜帶的細菌中存在耐藥菌,盡管比例不高,但絕不能視而不見,尤其是還存在多重耐藥菌的問題,一旦造成感染,給臨床治療往帶來極大困難[4]。如果人們不加重視,不注意衛生用電腦和健康用電腦,往往會因多人使用同一臺電腦,通過手-鍵盤-手的方式感染鍵盤上的細菌,并可以通過其他方式在人群中互相傳播,一旦機體抵抗力下降所致的感染,往往用藥是個麻煩,難于控制感染,甚至會奪取生命。
本次研究藥敏試驗所選用的抗生素,氨芐青霉素為廣譜青霉素類,抗菌作用于干擾細菌細胞壁的肽聚糖合成,細菌主要依靠細胞壁維持菌體固有形態,并保護細菌抵抗低滲環境。所以,氨芐青霉素對革蘭陽性菌和革蘭陰性菌均有殺菌作用,為繁殖期殺菌劑;而慶大霉素、鏈霉素和丁胺卡那霉素都屬于氨基糖苷類抗生素,作用于細菌唯一的細胞器——核糖體,通過干擾細菌蛋白質的合成起殺菌作用,為靜止期殺菌劑。這些抗生素也是人們感染最常常使用的抗生素。本次研究我們在醫學院校老師辦公室電腦鍵盤上發現存在致病菌、耐藥菌及多重耐藥菌,盡管量不驚人,但提醒人們在電腦給我們帶來豐富多彩的生活和工作的同時,不要忽視其中存在的潛在危險,要做到衛生用電腦,健康用電腦,定期清潔和消毒電腦鍵盤;廠家可以考慮生產出帶消毒功能的鍵盤來,通過多方努力營造安全使用電腦的氛圍。
[1]J.F.麥克法丁[英].醫學細菌生化試驗鑒定手冊[M].北京:人民衛生出版社,1985.
[2]張莉霞,王大靖,瞿秀玲.醫院使用中電腦鍵盤微生物污染情況調查[J].醫藥產業資訊,2005,7:52.
[3]孫同瑞.網吧電腦微生物生物污染與消毒方法研究現狀[J].安徽預防醫學雜志,2005,11(1):47.
[4]胡必杰,陳雪華,倪才妹,等.醫院感染菌對12種抗菌藥物藥敏結果與評價[J].中華醫院感染學雜志,1999,9(2):118-120.