VEGF-D和VEGFR-3在胃癌淋巴轉移中的表達

朱朝勇 (青海紅十字醫院腫瘤內科，青海 西寧 810000)

胃癌患者淋巴轉移直接影響患者預后，也是引起患者死亡的主要因素。其中血管內皮生長因子-D(VEGF-D)是特異性淋巴管生成因子，與腫瘤淋巴轉移關系較為緊密。VEGF受體-3(VEGFR-3)特異存在于淋巴管內皮細胞，臨床中常用于標記淋巴管，以更好觀察新生淋巴管情況用于淋巴管計數〔1〕。VEGF-D常與VEGFR-3結合，誘導毛細淋巴管生長，引起腫瘤中淋巴管增殖，發生淋巴結轉移〔2〕。本文分析 VEGF-D和VEGFR-3與腫瘤轉移的關系，旨在探索胃癌淋巴轉移機制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇我院2010年4月至2012年4月收治的60例胃癌患者手術切除標本，其中男32例，女28例，年齡25～84〔平均(52.3±2.4)〕歲，所有患者均確診為胃腺癌，其中45例患者有不典型增生，所有患者術前均未給予其他治療。胃癌和黏膜組織均術中切除后立即取材，置于－80℃液氮中保存，將病灶和淋巴結行蘇木精-伊紅(HE)染色病理檢查，并進行TNM分期。

1.2 檢測方法 分別取癌灶、癌旁、正常黏膜組織(同一患者的正常黏膜組織，距癌灶周邊至少5 cm)和部分胃癌標本，采用ELISA試劑盒檢測VEGF-D和VEGFR-3，嚴格按照說明書操作。胃癌組織的VEGF-D和VEGFR-3檢測值以絕對表達水平為主，其中腫瘤與正常黏膜組織檢測比值為相對比值(T/N)。

1.3 結果判定 VEGF-D和VEGFR-3陽性物質呈棕黃色細顆粒狀，淋巴管內皮細胞VEGFR-3染色陽性呈棕黃色。

1.4 統計學方法 應用SPSS17.0統計軟件進行分析，計量資料采用±s表示，計數資料使用組間的χ2檢驗。

2 結果

2.1 VEGF-D和VEGFR-3在胃癌組織和正常黏膜組織中的表達 VEGF-D在胃癌組織中表達低于正常胃黏膜組織，VEGFR-3在胃癌組織中的表達明顯高于正常黏膜組織(P＜0.05)。見表1。

表1 VEGF-D和VEGFR-3在胃癌組織和正常黏膜組織中的表達(±s，pg/ml，n=60)

表1 VEGF-D和VEGFR-3在胃癌組織和正常黏膜組織中的表達(±s，pg/ml，n=60)

與胃癌組織比較:1)P＜0.05

組別VEGF-D VEGFR-3胃癌組織190.5±22.5 2 421.8±157.6正常黏膜組織 234.6±26.71) 1 872.2±244.81)

2.2 VEGF-D和VEGFR-3表達與胃癌淋巴轉移表達的關系VEGF-D在胃癌組織中的表達水平，與患者的組織學類型、TNM分期、淋巴結轉移、淋巴結分期、轉移淋巴結數有關，與腫瘤大小、年齡、浸潤深度無密切關聯。VEGFR-3在胃癌組織中表達，與組織學類型、淋巴結分期、TNM分期、淋巴結轉移有關，與其他無密切關聯性。見表2。

表2 VEGF-D和VEGFR-3水平與胃癌淋巴轉移的關系(±s，pg/ml)

表2 VEGF-D和VEGFR-3水平與胃癌淋巴轉移的關系(±s，pg/ml)

病理 n VEGF-D VEGF-D≤1＞1VEGFR-3VEGFR-3(T/N)≤1 ＞1腫瘤大小(cm)＜5 37 188.2±28.6 23 14 2 147.7±157.6 18 19≥5 23 264.8±26.9 9 14 2 879.3±245.2 10 13組織學類型分化型 15 112.5±27.4 12 3 1 865.8±754.3 9 6未分化型 45 274.3±35.6 23 24 2 874.2±354.7 22 23年齡(歲)＜65 35 345.8±59.6 19 16 2 365.6±542.3 20 15≥65 25 198.2±54.7 14 11 2 478.8±456.2 10 15浸潤深度T1～T2 10 271.5±84.6 8 2 2 305.6±536.7 5 5 T3～T4 50 223.4±49.7 30 20 2 673.5±456.6 27 23淋巴結分期N0 22 173.6±26.7 18 4 1 924.6±337.8 18 4 N1 16 187.4±35.9 9 7 2 438.7±443.7 4 12 N2 22 208.9±23.8 6 16 2 965.7±358.9 5 17轉移淋巴結數0枚 19 183.5±42.7 15 4 1 965.5±257.9 15 4 1～6枚 17 219.3±39.7 8 9 2 732.9±453.3 5 12≥7枚 24 245.5±37.9 9 15 2 624.9±257.6 8 16 TNM分期Ⅰ+Ⅱ 21 147.6±45.9 17 4 1 687.6±249.6 17 4Ⅲ+Ⅳ 39 284.6±33.7 17 22 2 789.3±358.4 9 30淋巴結轉移無 22 186.3±45.4 18 4 1 886.4±423.7 18 4有 38 253.4±38.5 18 20 2 745.6±386.4 13 25 VEGFR-3≤1 33 29 4＞1 27 5 22

3 討論

胃癌常通過淋巴轉移，腫瘤細胞能直接浸潤病灶周圍組織，通過對淋巴結轉移進行有效評估，有利于制定治療方案，改善預后〔3〕。研究發現，胃癌組織存在大量新生淋巴管、微淋巴管等淋巴組織，腫瘤組織生長過度會破壞淋巴管結構，擠壓淋巴管，使淋巴管數目減少，引起管腔變窄〔4〕。

VEGFR-3是第一個被驗證為毛細淋巴管內皮細胞特異性的標志物，VEGFR-3失活后，陽性淋巴管會擴大腫瘤周圍淋巴管，導致腫瘤淋巴管轉移〔5〕。VEGFR-3在胃癌早期存在于人體組織和淋巴管內皮細胞，晚期存在于淋巴管中，在早期血管生成過程中的作用較明顯;VEGFR-3血管表達逐漸減少后，僅在淋巴皮內皮細胞表達。VEGFR-3是 VEGF-D的受體，受VEGF-D的誘導，因此利用VEGFR-3標注淋巴管有利于探究淋巴轉移的分子機制〔6〕。通過VEGFR-3定位淋巴管的特異性，通過觀察淋巴管組織學類型、TNM分期、濃度梯度，有利于進一步確定胃癌淋巴轉移中的表達。本文研究中，VEGFR-3在胃癌組織中表達與患者組織學類型、淋巴結分期、TNM分期、淋巴結轉移有關，與其他無密切關聯性。

VEGF-D可以與內皮細胞受體VEGFR-3結合，刺激內皮細胞增殖，引起微淋巴管增生，加速腫瘤細胞轉移，常誘導腫瘤內形成淋巴管，播散淋巴結〔7〕。本文研究中，VEGF-D在胃癌組織中表達低于正常胃黏膜，表明VEGF-D對胃癌發展起著重要作用，VEGF-D會通過誘導淋巴管生成參與腫瘤發展變化。VEGF-D陽性表達的胃癌組織中，會刺激胃癌組織淋巴生成〔8〕。同時，VEGF-D與患者的組織學類型、TNM分期、淋巴結轉移、淋巴結分期、轉移淋巴結數有關，與腫瘤大小、年齡、浸潤深度無關，表明VEGF-D高表達增強了癌細胞轉移的特性〔9，10〕。

VEGFR-3與配體VEGF-D結合，誘導內皮細胞增殖，對新生淋巴管內皮細胞及血管調控起著調節作用。本文研究表明VEGF-D陽性胃癌組織中，受體VEGFR-3的表達也較高，表明VEGF-D高表達與腫瘤淋巴轉移關系密切。同時，VEGF-D又促進激活淋巴管內皮細胞VEGFR-3受體，導致淋巴管增生，增大內皮細胞間的縫隙，使腫瘤細胞進入淋巴管。VEGF-D激活VEGFR-3受體，從而導致胃癌組織淋巴管增生，引起腫瘤細胞通過淋巴管擴散，誘發淋巴結轉移。

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