人為因素對(duì)血液分析的影響

瞿 巍

湖北省十堰市衛(wèi)生局東風(fēng)分局職業(yè)病防治中心，湖北十堰 442000

血液分析作為一基礎(chǔ)檢查項(xiàng)目由于其操作簡便、快捷目前已作為臨床診斷、治療及體檢、觀察病情的一重要指標(biāo)。自動(dòng)化儀器的使用讓血液分析在效率上有了很大程度的提高，因此而被廣泛應(yīng)用于各實(shí)驗(yàn)室成為血液細(xì)胞有形成分（紅細(xì)胞RBC、白細(xì)胞WBC、血小板PLT）分析的基礎(chǔ)手段。它作為血常規(guī)檢驗(yàn)的一個(gè)新的飛躍越來越受到臨床醫(yī)務(wù)工作者和臨床實(shí)驗(yàn)室的青睞，在各大實(shí)驗(yàn)室中占據(jù)著重要的地位。但隨著現(xiàn)代化儀器的使用，它在提高效率的同時(shí)也存在一定的弊端，然而儀器畢竟是儀器再現(xiàn)代化、自動(dòng)化的儀器都是靠人來完成其操作，在儀器的使用過程中人為因素更起著至關(guān)重要的作用。現(xiàn)就血液常規(guī)檢驗(yàn)中容易出現(xiàn)的問題和差錯(cuò)做如下分析。

1 分析樣品準(zhǔn)備

血液樣品的采集應(yīng)盡可能使用真空采血管靜脈采集，這樣才能反映患者的實(shí)際情況，也可以避免樣品中混入組織液等其它液體引起的細(xì)胞聚集。靜脈穿刺是否順利、規(guī)范都會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成一定的影響，如果操作較慢、采血不順利血液處于半凝狀態(tài)將會(huì)影響計(jì)數(shù)結(jié)果。血液樣品采集后要立刻混勻且動(dòng)作需輕緩以防劇烈振蕩造成細(xì)胞破裂、微小氣泡和溶血，這些都直接影響分析結(jié)果。

抗凝劑使用國際化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（ICSH）推薦的對(duì)細(xì)胞形態(tài)和計(jì)數(shù)影響較小的抗凝劑EDTA- K2（1.5 mg/mL），日常工作中由于檢驗(yàn)項(xiàng)目多、采血難度等原因抗凝劑的比例常會(huì)略高（2 mL抗凝管采血量只有1～1.5 mL），這樣勢(shì)必造成細(xì)胞腫脹、破裂等形態(tài)改變而使分析結(jié)果發(fā)生變化，因此采血時(shí)應(yīng)盡量按比例要求采集2 mL。

現(xiàn)在的實(shí)驗(yàn)室血液常規(guī)分析自動(dòng)化分析儀越來越占據(jù)著主導(dǎo)地位，而儀器的工作狀態(tài)將直接影響分析結(jié)果的正確與否，所以人工的儀器保養(yǎng)和儀器維護(hù)顯得格外重要。首先要做好定期的儀器校準(zhǔn)、質(zhì)控、開機(jī)時(shí)的背景計(jì)數(shù)檢測(cè)、每日樣品測(cè)試前的質(zhì)量控制，保證整個(gè)管路的清潔暢通，做好日常清洗和定期維護(hù)，為了保證儀器的正常工作狀態(tài)最好使用滲透壓和離子強(qiáng)度達(dá)到規(guī)定的與儀器相配套的試劑，這樣會(huì)避免很多不必要的干擾[1]。其次應(yīng)將儀器放置于一個(gè)不受振蕩、磁場、潮濕、灰塵、溫度干擾的環(huán)境、地線接觸良好，這些都是保證儀器能正常運(yùn)行的前提。

2 血液分析測(cè)試

很多研究顯示血液從采集到上機(jī)測(cè)試最好在2 h以內(nèi)但也不能即刻檢測(cè)，應(yīng)放置5～15 min后上機(jī)較為理想[2]，這樣才能與抗凝劑充分混合，PLT的假性聚集（PLT離體后形態(tài)立即改變形成絲狀偽足相互纏繞形成可逆聚集體）發(fā)生解聚[3]，從而得到最真實(shí)的檢驗(yàn)結(jié)果。全血標(biāo)本需不斷混勻，為了防止標(biāo)本老化最好在6～8 h內(nèi)完成測(cè)試。上機(jī)前先用混勻振蕩器混勻再用手緩慢上下顛倒至少20次，以保證上機(jī)時(shí)血液與抗凝劑充分融合，檢測(cè)時(shí)要保證測(cè)試針在血液的液面以下，不能靠近管壁也不能接觸管底保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。標(biāo)本量較大時(shí)在檢測(cè)達(dá)到一定數(shù)量后必須進(jìn)行一次背景計(jì)數(shù)檢測(cè)，以免出現(xiàn)管路問題使背景值偏高影響后面樣品的測(cè)試。在檢測(cè)過程中往往會(huì)出現(xiàn)一些問題，如機(jī)器報(bào)警顯示計(jì)數(shù)錯(cuò)誤、WBC堵塞、RBC堵塞等這時(shí)需執(zhí)行自動(dòng)清洗，嚴(yán)重時(shí)要用專用清洗液對(duì)檢測(cè)部進(jìn)行清洗，以便洗去管路中的臟污雜質(zhì)解除堵塞。又如電腦顯示W(wǎng)BC計(jì)數(shù)為0、無法分類、PLT計(jì)數(shù)異常……出現(xiàn)這些問題有的是因?yàn)槭苤車h(huán)境影響溫度較低儀器工作異常、血液中的寒冷凝集素干擾使細(xì)胞無法正常計(jì)數(shù)，升高室溫或放置37℃水浴后即可改善。有的則是地線接觸不良導(dǎo)致線路異常造成干擾使儀器不能正常運(yùn)轉(zhuǎn)。還有的可能是儀器的管路或某部件出現(xiàn)故障需要專業(yè)人員檢修后才能解決。這些都要認(rèn)真觀察仔細(xì)分析排除干擾來解決分析中出現(xiàn)的問題。

3 結(jié)果分析處理

上機(jī)測(cè)試完成并不代表分析步驟的結(jié)束。一個(gè)工作認(rèn)真負(fù)責(zé)的檢驗(yàn)人員在測(cè)試完成后一定會(huì)仔細(xì)審查檢測(cè)結(jié)果，尤其對(duì)于那些異常結(jié)果和各項(xiàng)參數(shù)間出現(xiàn)矛盾的要結(jié)合檢驗(yàn)數(shù)據(jù)、直方圖的變化進(jìn)行分析，必要時(shí)進(jìn)行重復(fù)檢驗(yàn)。在排除其它因素干擾外仍有疑問的還可再次采血重新復(fù)檢，及時(shí)與臨床醫(yī)生和被檢對(duì)象溝通結(jié)合手工計(jì)數(shù)和顯微鏡檢查以便得到最真實(shí)的檢測(cè)結(jié)果。

血細(xì)胞由于體積小容易發(fā)生粘連、變性破壞等形態(tài)改變，分析測(cè)試受生理、病理、飲食、藥物、人為操作因素的干擾波動(dòng)較大，容易對(duì)結(jié)果造成一定影響。血液分析測(cè)試是由人工來進(jìn)行操作和控制，因此分析結(jié)果的準(zhǔn)確與否成敗關(guān)鍵主要是“人”的因素，分析檢驗(yàn)的過程中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)某些故障、疑問只要在工作中注意觀察，認(rèn)真分析報(bào)警和直方圖的變化，及時(shí)查找原因排除干擾。從樣品采集、抗凝、混勻、放置時(shí)間、上機(jī)測(cè)試、分析結(jié)果、儀器狀態(tài)等各操作環(huán)節(jié)著手認(rèn)真仔細(xì)就能發(fā)現(xiàn)問題結(jié)合實(shí)際去解決它，從而得到準(zhǔn)確、可靠的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)指導(dǎo)臨床，為醫(yī)生、病人提供滿意的檢驗(yàn)結(jié)果減少不必要的麻煩。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)實(shí)際需要、檢驗(yàn)對(duì)象、儀器性能、檢驗(yàn)水平等具體情況制定相應(yīng)的復(fù)查制度來排除人為因素對(duì)結(jié)果的影響。

[1] 從玉隆.當(dāng)代血液分析技術(shù)與臨床[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1997：39.

[2] 洪宗之.抗凝靜脈血放置時(shí)間對(duì)血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的影響[J].西醫(yī)結(jié)合雜志，2005，14（2）：23.

[3] 朱忠勇.準(zhǔn)確計(jì)數(shù)血小板方法學(xué)研究進(jìn)展[J].國外醫(yī)學(xué)：臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè)，2002，23（3）：131-132.