高效價冷凝集素引起血型鑒定困難1例

馮素芳

患者，男，62歲，漢族，既往無輸血史，有糖尿病史，2011年4月因發熱，便血，下肢疼痛入我院治療。血常規:HB:58 g/L，RBC:1.93×1012/L，申請懸浮紅細胞2 U，血漿400 ml。復檢血型時發現正反定型不一致，正定型為AB型，反定型與A細胞，B細胞，O細胞均凝集，正反定型不符，經近一步檢測，證實為AB型，正反定型不一致是由于其自身含有冷凝集素所致。

1 血型血清學檢查

1.1 試劑與儀器 抗A、抗B單克隆血清(長春博德，批號:20100712);反定型試劑紅細胞:自制;篩選試劑紅細胞(長春博訊，批號:20110206);抗Ig-G，C3d、抗IgG、抗C3d(上海醫藥，批號:20100608);凝聚胺試劑(珠海貝索，批號:110053);抗人球蛋白交叉配血卡(長春博訊，批號:20100608);BASO-2002-2離心機。FYQ型免疫微柱孵育器、TD-3A型血型血清學離心機(長春博研)。37℃水浴箱。

1.2 血型鑒定 取干燥潔凈的試管三支，分別加入抗A、抗B、抗AB血清各兩滴，再分別加入患者3%紅細胞懸液一滴，混合;另取干燥清潔的試管3支，各加入患者血清2滴，再分別加入A、B、O型3%紅細胞懸液1滴，混合;另取一只試管，加入患者血清2滴及患者紅細胞懸液1滴，混合。1 000 r/min，1 min。鏡下觀察。將患者正反定型試管均放入37℃水浴箱中10 min，取出輕輕混勻觀察記錄結果。

1.3 吸收冷凝集素 用37℃0.9%氯化鈉溶液洗滌患者紅細胞3次，然后用患者的血清與等體積3洗后的壓積紅細胞混合，置4℃冰箱中過夜，次日將該血清與A細胞，B細胞，0細胞及自身細胞在20℃反應，記錄結果。

1.4 直接抗人球蛋白實驗 取潔凈干燥試管三支，分別加入抗-IgG，C3d、抗-IgG、抗-C3d血清各1滴，各加入患者洗滌3次后配制的3%紅細胞懸液1滴，混合，1 000 r/min，離心1 min。

1.5 抗體篩選試驗 按照不規則抗體篩查操作說明書進行。

1.6 冷凝集素效價測定［1］將患者血清經連續倍量稀釋，分別加入3%O型紅細胞1滴，混勻，置于4℃反應，1 000 r/min，離心1 min，記錄結果。

1.7 交叉配血實驗 與AB型獻血者在室溫(20℃)聚凝胺配血中，主側出現凝集，次側無凝集，配血不相和，放37℃ 10 min，取出試管輕輕混合觀察結果，主側凝集消失，配血相合。在微柱凝膠配血法中，主側和此側均相合。

2 結果

2.1 ABO血型鑒定結果 見表1。

表1 高效價冷凝集素患者血型鑒定

2.2 直接抗人球蛋白試驗 抗-IgG，C3d:2+、抗-IgG:1+、抗C3d:1+。

2.3 不規則抗體篩選實驗陰性。

2.4 用處理后的患者血清，紅細胞做凝聚胺交叉配血試驗，主次側均無凝聚，無溶血。

3 討論

高效價冷凝集素是患者體內產生了抗自身紅細胞的嗜異性冷抗體。此抗體為IgM類，在體外4℃或室溫條件下可與自身紅細胞或ABO系統其它各個血型的紅細胞發生非特異性凝集反應，不規則抗體可呈強陽性。一般健康人血清中含少量冷凝集素，效價很低，一般在1∶16以下。這種抗體在32℃以下(0～4℃)時活性最強，能與紅細胞結合，當溫度升高時凝集的紅細胞呈可逆性散完全散開，可迅速從紅細胞表面解離，因此不引起非特異性凝集，但在某些病理情況下，自身免疫性貧血，淋巴系統惡性腫瘤、支原體肺炎、EB病毒感染及某些腫瘤等會表達高效價［2］。本例患者直抗實驗結果陽性，在室溫自身對照陽性。37℃自身對照無凝聚，無溶血，提示患者血清中存在自身冷抗體。首先將患者的紅細胞用37℃0.9%氯化鈉溶液洗滌3遍，用洗滌后紅細胞在4℃條件吸收患者血清中高效價冷凝集素至自身對照和直抗陰性時進行正反血型鑒定和交叉配血實驗。本患者血型鑒定為AB型RhD(+)。給其AB型RhD(+)懸浮紅細胞2 U，血漿400 ml，適當加溫緩慢輸注，無不良反應。

寒冷凝集素所致凝集現象應與ABO亞型引起弱凝集相區別，不規則抗體篩查與鑒定實驗可排除血清中含有其他不規則抗體。高效價冷凝集素所致同型配血不合多為弱凝集，37℃水浴后凝集消失。亞型同型配血也為弱凝集，但37℃水浴后凝集不消失，交叉配血不合，需進行抗體鑒定實驗，輸血需選擇抗原陰性，交叉配血相合的紅細胞輸注。本例患者無輸血史，家族史，不規則抗體篩查陰性，正反定型不一致是由其自身冷抗體造成。

1 劉達莊主編.免疫血液學.第1版.上海:上海科學技術出版社，2002.214-218.

2 蘭炯采.冷激素綜合征三例報告.中國輸血雜志，1993，6:99.