磺胺脒片含量測(cè)定方法的研究

廣東省韶關(guān)市食品藥品檢驗(yàn)所（512028）何紹萍 陳華龍 羅蔚

磺胺脒片是磺胺類(lèi)藥，主要用于細(xì)菌性痢疾、腸炎等，收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品及制劑》第一冊(cè)[1]，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中采用永停滴定法測(cè)定其含量，其測(cè)定結(jié)果容易因?yàn)槿藛T的操作出現(xiàn)誤差、重現(xiàn)性差。本文采用HPLC法測(cè)定磺胺脒片的含量，該方法靈敏度高、專(zhuān)屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好、結(jié)果準(zhǔn)確，是一種行之有效的檢測(cè)方法，值得推廣使用。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1200型高效液相色譜儀，UV-2550紫外分光光度計(jì)（日本島津），XS105DU十萬(wàn)分之一電子天平（梅特勒托利多儀器有限公司），ZYT-1型自動(dòng)永停滴定儀。

附表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

附表2 含量測(cè)定結(jié)果（n=3）

1.2 試藥 甲醇：色譜純；水為純化水；其他試劑為分析純；磺胺脒對(duì)照品（供含量測(cè)定用，規(guī)格：約100mg，批號(hào)：100412-200401，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；磺胺脒片（廣東臺(tái)城制藥股份有限公司，規(guī)格：0.5g，批號(hào)：20090905、20101205、20110311）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：依利特Hypersil ODS2（5μm，4.6mm×200mm）；流動(dòng)相：水-冰醋酸-甲醇（69∶1∶30）；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：263nm；進(jìn)樣量：20μL；柱溫：25℃。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取磺胺脒對(duì)照品11.90mg，置100mL量瓶中，加甲醇適量，振搖使溶解，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；精密量取10mL，置另一25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品20片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于磺胺脒50mg），置50ml量瓶中，加甲醇適量，振搖使溶解，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取2mL，置另一50mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.3 方法學(xué)驗(yàn)證

2.3.1 線性關(guān)系考察 取上述對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣2，4，8，16，32μL，按上述色譜條件測(cè)定，以進(jìn)樣量（X）對(duì)峰面積（Y）進(jìn)行回歸，得回歸方程Y=25907.452X-1502.657，r=0.9998（n=5）。結(jié)果表明，磺胺脒進(jìn)樣量在0.0952～1.5232μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

2.3.2 專(zhuān)屬性試驗(yàn) 分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，測(cè)定。色譜圖見(jiàn)附圖。

2.3.3 精密度試驗(yàn) 精密吸取“2.2.1”中對(duì)照品溶液20μL，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)得磺胺脒峰面積的RSD為0.2%（n=5）。精密度良好。

2.3.4 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)樣品（批號(hào)：20090905）6份，分別按供試品溶液制備方法制備，測(cè)定磺胺脒含量，RSD為0.5%（n=6）。

2.3.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取供試品溶液，分別在0，2，4，6，8h進(jìn)樣20μL，測(cè)定磺胺脒峰面積。磺胺脒峰面積積分值RSD為0.3%（n=5），這表明供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定，說(shuō)明其穩(wěn)定性良好。

2.3.6 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱(chēng)取已知含量的樣品（批號(hào)：20090905，標(biāo)示含量97.4%）適量6份，分別精密加入磺胺脒對(duì)照品溶液適量，按“2.2.2”項(xiàng)中供試品溶液的制備方法制備，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)附表1。

2.4 樣品含量測(cè)定 取3批樣品按供試品溶液制備法制備，并按上述色譜條件測(cè)定峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算其含量，并將測(cè)得結(jié)果與原標(biāo)準(zhǔn)（《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品及制劑》第一冊(cè)）的永停滴定法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較比較，結(jié)果見(jiàn)附表2。

3 討論

3.1 HPLC法測(cè)定磺胺脒片的含量，簡(jiǎn)化了磺胺脒片的含量測(cè)定方法。

3.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 取磺胺脒對(duì)照品適量，用甲醇溶解，在200～400nm波長(zhǎng)掃描，磺胺脒在202nm與263nm處有均最大吸收，由于202nm已靠近紫外吸收區(qū)的末端，故采用了263nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.3 流動(dòng)相的選擇 比較了不同比例的甲醇-水、水-冰醋酸-甲醇、乙腈-0.025mol/L冰醋酸溶液作流動(dòng)相進(jìn)行試驗(yàn)[2][3]，結(jié)果表明，以水-冰醋酸-甲醇（69∶1∶30）為流動(dòng)相磺胺脒的峰形好，保留時(shí)間適中，柱效高。

3.4 永停滴定法對(duì)儀器的精度要求很高，精度不高則會(huì)對(duì)檢出限有一定的限制，終點(diǎn)讀數(shù)也會(huì)由于人員的操作容易出現(xiàn)誤差，造成重現(xiàn)性差。本文采用HPLC法測(cè)定磺胺脒片，方法簡(jiǎn)便準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。