蘭保強,王 麗,劉 瑛,覃 良,鄧聿胤
(廣西中醫藥研究院,廣西南寧530022)
慢性前列腺炎是成年男性的常見病、多發病,約有50%的男性在一生中的某個時期會受其影響[1],而且由于反復發作,容易引起一系列復雜的癥候群,出現精神抑郁及性功能障礙等癥狀,給患者造成極大的身心損害,嚴重影響其生活質量[2]。壯藥大火草 Anemone tomentosa為毛茛科植物[3],有清熱除濕,利尿通淋、益氣補腎的功效,民間用于治療慢性前列腺炎有較好的效果,為佐證其療效,更好地為臨床用藥提供科學依據,本文對其作了如下藥效學研究。
1.1 藥品與試劑 大火草供試樣品為無輔料的浸膏粉,每克干膏粉相當于生藥12.30 g,由本實驗室提取,臨用時用水配制成所需濃度供試驗用,試驗日給藥劑量用生藥表示(g·kg-1);阿司匹林,上海晶純試劑有限公司,批號:27383;地塞米松,浙江仙琚制藥股份有限公司,批號:100842;前列通片,廣州中一藥業有限公司,批號:P00054。
1.2 動物 健康成年Wistar大鼠,雄性,體重180~220 g;健康成年昆明種小白鼠,雄性,體重18~22 g,均由廣西醫科大學實驗動物中心提供。許可證號:SCXK桂2009-0002。飼養于20~25℃、相對濕度(60±10)%環境中,顆粒飼料喂養,自由飲水。
2.1 對小鼠耳廓腫脹的影響 將小鼠50只隨機分為模型組、阿司匹林組(0.2 g·kg-1)和大火草高、中、低劑量組(30、15、7.5 g·kg-1),每組10 只,給藥組連續灌胃給藥 3 d,每日1次,給藥體積20 mL·kg-1,模型組予等量蒸餾水。末次給藥后1 h,每只小鼠右耳前后均勻涂布二甲苯0.05 mL,左耳作對照。涂藥60 min后,處死動物,用直徑6 mm的打孔器將雙耳同部位切下,AEL-200電子天平稱重。以左、右耳片質量之差為腫脹度,采用方差分析法檢驗組間差異。結果:與模型組比較,大火草高劑量組和阿司匹林組小鼠耳廓腫脹程度均明顯減輕,差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01),提示大火草高劑量具有抗炎作用,見表1。
表1 對小鼠耳廓腫脹的影響(±s)

表1 對小鼠耳廓腫脹的影響(±s)
注:與對照組比較,*P <0.05,**P <0.01
組別 n 劑量(g·kg-1) 耳腫脹度(mg)模型組10 - 11.81 ±5.39阿司匹林 10 0.2 4.61 ±1.28**大火草高劑量 10 30 5.97 ±3.57*大火草中劑量 10 15 8.65 ±5.57大火草低劑量10 7.5 9.90 ±3.88
2.2 對醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性的影響 將小鼠50只隨機分為模型組、地塞米松組(0.002 g·kg-1)和大火草高、中、低劑量組(30、15、7.5 g·kg-1),每組 10 只,給藥組連續灌胃給藥3 d,每日1次,末次給藥后1 h,各組動物按0.1 mL/10 g體重尾靜脈注射1%伊文思蘭,同時腹腔注射0.9%醋酸0.2 mL/只。15 min后處死動物,用生理鹽水洗滌腹腔3次,并收集洗滌液,合并后用生理鹽水調整體積至10 mL,在600 nm波長下測定吸光度。結果:與模型組比較,大火草高劑量組和地塞米松組均能顯著降低光密度OD值,有顯著性差異(P<0.05或P<0.01),提示大火草能夠顯著拮抗醋酸引起的毛細血管通透性增加,見表2。
表2 對醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性的影響(±s)

表2 對醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性的影響(±s)
注:與對照組比較,*P <0.05,**P <0.01
組別 n 劑量(g·kg-1) 光密度OD值10 - 0.275 ±0.062地塞米松 10 0.002 0.085 ±0.044**大火草高劑量 10 30 0.209 ±0.045*大火草中劑量 10 15 0.228 ±0.043大火草低劑量模型組10 7.5 0.225 ±0.100
2.3 對小鼠棉球肉芽腫的影響 將小鼠50只隨機分為模型組、地塞米松組(0.002 g·kg-1)和大火草高、中、低劑量組(30、15、7.5 g·kg-1),每組 10 只。連續灌胃 3 d 后,于腋下植入一個10 mg無菌棉球.每日給藥1次,連續10 d。末次給藥24 h后處死動物,剝取棉球肉芽組織,置80℃烤箱中,烘干1.5 h后取出,稱重。采用方差分析法檢驗組間差異。結果:與模型組比較,大火草高劑量組和地塞米松組的肉芽重量明顯減輕,差異有統計學意義(P<0.01),提示大火草高劑量具有抗非特異性炎癥的作用,見表3。
表3 對小鼠棉球肉芽腫的影響(±s)

表3 對小鼠棉球肉芽腫的影響(±s)
注:與對照組比較,**P <0.01
組別 n 劑量(g·kg-1) 肉芽重量(mg)模型組10 7.5 65.22 ±10.10 10 - 67.85 ±7.35地塞米松 10 0.002 52.97 ±5.56**大火草高劑量 10 30 55.16 ±6.47**大火草中劑量 10 15 61.60 ±6.82大火草低劑量
2.4 對大鼠非細菌性前列腺炎的影響 采用角叉菜膠致大鼠非細菌性前列腺炎法[4],將大鼠60只隨機分為正常對照組、模型組、陽性藥前列通片組(0.70 g·kg-1)和大火草高、中、低劑量組(21、10.5、5.25 g·kg-1),每組 10 只。各組大鼠連續灌胃給藥7 d,每日1次,正常對照組與模型組予等容量蒸餾水。末次給藥后30 min,將大鼠用乙醚麻醉,無菌條件下剖開腹腔,在每鼠前列腺內注入滅菌的1.5%角叉菜膠0.05 mL,縫合切口,24 h后斷頭處死大鼠,取致炎前列腺組織50 mg加入200 mL白細胞稀釋液和200 mL生理鹽水中,充分混勻,鏡下記錄白細胞數和卵磷脂小體密度。結果:與正常對照組比較,模型組與其他組白細胞顯著升高,卵磷脂小體密度顯著降低,差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01);與模型組比較,大火草高、中劑量組和前列通片組的白細胞明顯減少,差異有顯著性(P<0.05或P<0.01),大火草高劑量組和前列通片組的卵磷脂小體密度明顯升高,差異有統計學意義(P<0.01)。提示大火草高劑量對大鼠非細菌性前列腺炎有明顯改善作用,見表4。
表4 各組前列腺內白細胞數及卵磷脂小體密度比較(±s)

表4 各組前列腺內白細胞數及卵磷脂小體密度比較(±s)
注:與對照組比較,*P <0.05,**P<0.01;與模型組比較,▲P <0.05,▲▲P<0.01
組別 n 劑量(g·kg-1)白細胞數(個·mg-1)卵磷脂小體密度(個·mg-1)10 - 49.23 ±15.96 313.16 ±67.79模型組 10 - 152.20±43.45** 101.09±37.37**前列通片 10 0.70 69.04±22.17*▲▲185.35±52.91**▲▲大火草高劑量 10 21 80.01±35.35*▲▲178.34±51.92**▲▲大火草中劑量 10 10.5 106.56±40.50▲ 121.53±33.33**大火草低劑量 10 5.25 128.36 ±19.86** 124.12 ±42.46正常對照**
慢性前列腺炎并非是一種獨立的疾病,此病屬于中醫學的“精濁”、“白淫”、“白濁”等范疇,多因濕熱留滯、瘀血阻絡、肝腎虧虛而成[5]。大火草針對此病機特點,行“清利濕熱,消濁通淋,活血化瘀”之功,使濕去熱清,瘀散絡通,促進腺管暢通。
本實驗研究結果顯示,大火草提取物灌胃給藥,高劑量對二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹有明顯的抗炎抑制效果,能抑制醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性的增加、抑制對小鼠棉球肉芽腫、抑制角叉菜膠所致大鼠非細菌性前列腺炎。提示大火草有明顯的抗前列腺炎作用,通過抑制炎癥早期的滲出性改變、抑制白細胞的增加、趨化和抑制炎癥晚期增生性改變,改善前列腺組織的慢性炎性病理改變等途徑來發揮抗炎作用,為該藥物的進一步開發利用提供了藥效學依據。
[1]Krieger JN,Riley DE,Cheah PY,et al.Epidemiology of prostatitis:new evidence for a world-wide problem[J].World J Urol,2003,21(2):70 -74.
[2]李炎唐.前列腺炎與相關疾病.泌尿外科學[M].濟南:山東科學技術出版社,1993.
[3]國家中醫藥管理局《中華本草》編委會.中華本草[M].上海:上海科學技術出版社,1999:1768,3166.
[4]郝吉雪,郭進,陳奇斌,等.前列安顆粒治療慢性前列腺炎的藥效學研究[J].現代中西醫結合雜志,2008,17(8):1152-1155.
[5]詹慧春,曹長恩,郝春梅,等.前列腺炎中醫藥治療的臨床研究近況[J].中醫藥信息,2001,18(5):22 -25.