顯微鏡與血細胞計數儀在血小板計數中的檢測作用與影響分析

何少雄 葉旭英

廣東省博羅縣人民醫院檢驗科，廣東博羅 516100

顯微鏡與血細胞計數儀在血小板計數中的檢測作用與影響分析

何少雄 葉旭英

廣東省博羅縣人民醫院檢驗科，廣東博羅 516100

目的觀察顯微鏡和血細胞計數儀在血小板計數檢測中的結果差異。方法使用血細胞分析儀和顯微鏡，嚴格按規定操作檢測標本得出結果，并對結果差異存在統計學意義的標本用血涂片法驗證對照。結果當血小板正常時，兩種方法的檢測結果比較，差異無統計學意義；當血小板升高時，兩種方法的檢測結果比較，差異無統計學意義。對照血涂片法所測值與二者都無相關性，無法比較哪種方法更準確。當血小板降低時，兩種方法的檢測結果比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；尤其是當并發高脂血癥時，血涂片驗證法與顯微鏡手工法相關性更高（P＜0.05），血細胞分析儀法的測量誤差比較明顯。結論在血小板計數在正常值范圍內時，兩種檢測方法都很準確，但前者更加簡單、方便和迅速；當在病理情況下時，尤其是血小板嚴重減少和出現形態改變時，兩者都會出現測量誤差，但顯微鏡手工法相對準確些。在臨床檢查時，先使用細胞分析儀進行定性檢查，若有異常應用顯微鏡手工法做重復檢查，提高結果準確性。

血小板計數；細胞分析儀；顯微鏡

血小板參與初期的凝血過程，能促進止血和凝血，在止血、傷口愈合、炎癥反應、血栓形成和術中出血等生理和病理過程中有重要作用；并且，血小板計數還與多種血液科疾病密切相關，對各種血液疾病和其相關疾病的診斷和鑒別診斷具有重要意義。輸注血小板價格昂貴，且可能誘發感染和免疫反應，血液病和需要輸注血小板的患者，更需要準確的血小板實驗室檢測來判斷輸注是否必要。因此，血小板的準確檢測有相當重要的臨床價值。筆者所在科室對自2011年2月～2012年2月期間，來院體檢的健康人群和有關疾病就診的患者共400例血液標本，對其中血小板計數異常的152例進行顯微鏡鏡檢和血細胞分析儀檢測[1]，并報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2011年2月～2012年2月，來筆者所在醫院體檢的健康人群和有關疾病就診治療的患者400例，對其中血小板計數結果異常的152例患者；其中男78例，女74例；年齡14～79歲，平均（34.2±3.5）歲。所有被檢測者血液均采用顯微鏡和全自動細胞分析儀兩種方法檢測。

1.2 儀器和試劑

使用普朗醫療器械公司生產的XFA6000Intelligent智能化全自動血液細胞分析儀和儀器原廠配套的試劑。顯微鏡（上海光學儀器廠，萬能工具顯微鏡19JC）和草酸銨溶液（上海笛拍化學品技術有限公司，×100）[2]。

1.3 方法

血細胞分析儀法：采用XFA6000 Intelligent智能化全自動血液細胞分析儀，嚴格按照操作規范操作，1 h內完成待測標本中的血小板、紅細胞、白細胞數測定。

顯微鏡手工法：取血細胞分析儀法的同一待測標本20μL，加入0.38 mL草酸胺稀釋液，10 min后顯微鏡下計數并計算血小板數。

對兩者之間的結果進行統計學分析，存在統計學差異的再用血涂片法進行驗證對照。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 兩種方法檢測血小板計數結果比較

當血小板正常時，兩種檢測方法的結果差異無統計學意義；當血小板升高時，兩者存在較大差距，對照血涂片法所測值與二者都無相關性，無法比較哪種方法更準確。當血小板降低時，血涂片驗證法、細胞分析儀計數法與顯微鏡手工法檢測結果的差異有統計學意義（P＜0.05）。顯微鏡計數法的結果與血涂片驗證值更接近。見表1。

2.2 組間血小板異常檢出率比較

組間兩種方法血小板異常檢出率比較，使用血細胞分析儀法檢出率高于顯微鏡法，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表1 細胞分析儀法和顯微鏡法血小板計數結果比較（×109/L）

表2 組間計數結果檢出率比較[n（%）]

3 討論

血小板的檢測是血液分析的重要組成部分，本資料研究中使用的細胞分析儀使用的是光學法和阻抗法聯合對血小板的數目及體積進行計數，并根據信號的不同繪出血小板體積分布直方圖。以低角度前向光散射和高角度散射兩個測量系統同時測量1個血小板，根據低角度光轉換能量的大小測量單個血小板體積與總數。雖然紅細胞和血小板的體積差異明顯，按由于兩者所使用的仍然是同一種分析系統，通過設定閾值將兩者的光電信號分開，這就不可避免的造成了體積較大的血小板的脈沖信號進入紅細胞區，小體積的紅細胞的脈沖信號進入血小板區；造成了不可避免的測量的隨機誤差。現在，各大儀器生產商也在積極提升技術，提高測量結果的準確性。如：掃流技術、鞘流技術、浮動界標技術、延時計數和擬合曲線等技術，然而仍然會有各種隨機因素影響測量結果的準確性[3]。

血小板是骨髓中巨核細胞脫落下的直徑1～8μm的圓盤形的細胞碎片，成群分布于紅細胞之間，與紅細胞體積差異很大，自動細胞分析儀法依據此來區分紅細胞和血小板。血小板計數在正常值為（100～300）×109/L之內時，細胞分析儀法和顯微鏡法的測量結果無統計學差異；細胞分析儀相比于顯微鏡法不僅操作簡便，快速，相對準確，而且不會由于操作者不同產生較大系統誤差。此時，全自動細胞分析儀法優于顯微鏡手工法。

當血小板計數＜100×109/L低于正常值時，可出現出血時間延長，皮膚黏膜紫癜，手術后出血；當其數值低于20×109/L時，可引起自發性出血。引起血小板減少的常見原因有：家族遺傳性疾病，血小板生成障礙如再生性障礙性貧血、急性白血病、急性放射疾病等，此時血小板計數明顯降低，剩余的少量血小板也存在情況不等的形態異常，此外病理狀態下生成的一些與血小板體積形態相當的顆粒，導致了細胞分析儀檢測準確率的下降。此時顯微鏡手工法檢測的準確率高于細胞分析儀[4]。

而血小板增多可分為原發性和特發性增多，前者主要見于骨髓增生性疾病和家族遺傳性疾病。根據調查結果，此時顯微鏡法與細胞分析儀法二者雖存在統計學差異但無法確定哪一個更可靠，因為顯微鏡手工法也可能由于計數板面積太小，凝血系數增加使血小板分布不均都可能導致其結果的不準確。

綜上所述，血細胞分析儀檢測法和顯微鏡手工檢測法都存在其局限性和優點。在血小板計數在正常值范圍內時，兩種檢測方法都很準確，但前者更加簡單、方便和迅速；當在病理情況下時，尤其是血小板嚴重減少和出現形態改變時，兩者都會出現測量誤差，但顯微鏡手工計數法相對準確些[5]。在臨床檢查時，先使用細胞分析儀進行定性檢查，若有異常應用顯微鏡手工法做重復檢查，提高結果準確性。

[1]李永軍.顯微鏡與血細胞計數儀在血小板計數中的檢測作用與影響[J].中外醫療，2011，30（33）：82.

[2]范欣，張忠亮.血細胞計數儀血小板計數假性降低的原因分析[J].職業與健康，2005，21（12）：1958-1959.

[3]榮愛國，馮素萍.自動血液細胞分析儀與顯微鏡的關系探討[J].山西醫科大學學報，2001，32（1）：86-87.

[4]傅立強，桑列勇，童海明，等.不同血液分析儀測定機采血小板計數結果的比較分析 [J].檢驗醫學，2010，25（10）：794-796.

[5]鞏惠蕓，顧曉菁.相差顯微鏡血小板計數法對血液分析儀測定“血小板計數減少”結果的復核作用[J].檢驗醫學，2004，19（6）：524，527.

R446.113

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2095-0616（2012）12-112-02

2012-04-06）