胰腺癌組織Skp2與C-myc的表達及意義

李居劍 劉建生 王艷

·短篇論著·

胰腺癌組織Skp2與C-myc的表達及意義

李居劍 劉建生 王艷

細胞周期調節失控是腫瘤發生、發展的重要分子事件。S期激酶相關蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)是在細胞周期研究中發現的一種F-box蛋白，它通過調節泛素-蛋白酶途徑，參與細胞周期的調控[1]。而C-myc是一種原癌基因，是細胞從G0/G1期進入S期的“開關”，參與調控細胞增殖、分化及凋亡等[2]。有研究表明[3]，Skp2可活化C-myc靶基因，引起S期轉換，而C-myc也可通過激活cullin基因，導致Skp2基因表達增高，二者協同作用參與腫瘤的發生與發展。本研究檢測Skp2、C-myc蛋白在胰腺癌組織中的表達，探討其與臨床病理特征的關系。

一、資料與方法

1．病例資料：收集山西醫科大學第一醫院2003年1月至2010年12月間行手術切除并經病理證實的胰腺癌標本48例。患者術前均未行放化療治療，其中男26例，女22例，年齡31～77歲，平均(59±11)歲。取20例同期手術切除的癌旁胰腺組織作為對照。

2．免疫組化染色：鼠抗人Skp2單抗、鼠抗人C-myc蛋白單抗及二抗PV-6002均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。應用Envision免疫組化二步法檢測Skp2和C-myc蛋白表達。以PBS液代替一抗作陰性對照。

Skp2陽性染色主要位于胞核，C-myc陽性染色則位于胞質或胞核，陽性著色均為出現棕黃色顆粒。隨機觀察10個高倍鏡視野，參照Takeuchi等[4]方法，以陽性細胞百分數和染色強度評分。陽性細胞<10%為0分，10%～29%為1分，30%～59%為2分，60%～74%為3分，≥75%為4分。無染色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，深棕黃色為3分。兩分值相乘，>1為陽性，≤1為陰性。

3．統計學處理：應用SPSS17.0統計軟件進行分析。顯著性差異采用χ2檢驗，相關性分析采用Spearman等級相關分析。P<0.05為差異具有統計學意義。

二、結果

1．Skp2和C-myc蛋白在胰腺癌和癌旁胰腺組織中的表達：48例胰腺癌組織中Skp2的陽性表達率為79.2%(38/48)，顯著高于癌旁胰腺組織的20.0%(4/20)(χ2=20.927，P<0.01)。48例胰腺癌組織中C-myc的陽性表達率為77.1%(37/48)，顯著高于癌旁胰腺組織中的15.0%(3/20)(χ2=22.465，P<0.01，圖1)。

圖1Skp2(a)、C-myc(b)在胰腺癌組織中的表達(免疫組化 ×400)

2．Skp2和C-myc蛋白表達與胰腺癌臨床病理特征的關系：胰腺癌Skp2和C-myc表達均與性別、年齡、腫瘤大小及部位無關(P值均>0.05)，而與癌組織的分化程度、淋巴結轉移及臨床分期有關(P值均<0.05，表1)。

表1 Skp2、C-myc的表達與胰腺癌臨床病理特征的關系

3．胰腺癌Skp2和C-myc蛋白表達的相關性：38例Skp2表達陽性的胰腺癌組織中，33例C-myc陽性表達；10例Skp2陰性表達的胰腺癌組織中，6例C-myc表達陰性，Skp2與C-myc的表達呈顯著正相關(r=0.453，P<0.01)。

討論Skp2是泛素連接酶復合物(Skp1-Cullin-F-box,SCF)中的一種F-box蛋白，其作為SCF的底物識別亞基，特異性識別底物并誘導其泛素化降解來調控細胞周期。p27kip1蛋白是其主要的靶物質，對細胞G1～S期轉換具有抑制作用，p27kip1的降解可導致細胞惡性增殖[5]。Skp2蛋白在許多惡性腫瘤中均有異常升高，包括口腔鱗狀細胞癌、非小細胞肺癌、胃癌和肝癌等，且Skp2高表達患者較低表達者預后更差[6-8]。本實驗研究發現，Skp2在胰腺癌組織顯著高表達，且Skp2的表達與腫瘤分化程度、淋巴結轉移及臨床分期有關。提示Skp2與胰腺癌的侵襲、轉移能力具有一定的相關性。

C-myc是一種與細胞周期關系密切的原癌基因，其表達可使細胞獲能進入S期。C-myc對細胞具有雙重作用，既可刺激細胞增殖，也可促進細胞凋亡，同時C-myc的高表達還抑制細胞的分化，從而參與腫瘤的形成[9-10]。本實驗研究結果顯示，胰腺癌組織C-myc蛋白高表達，其表達與腫瘤分化程度、淋巴結轉移及臨床分期相關，提示C-myc與胰腺癌的發生發展亦有密切關系。

本研究結果還顯示，Skp2與C-myc在胰腺癌組織中的表達呈正相關性，提示二者的協同作用參與了胰腺癌的發生與發展，與Kim等11的結果一致。

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[11] Kim S, Herbst A, Tworkowski K, et al. Skp2 regulates Myc protein stability and activity. Mol Cell, 2003,11:1177-1188.

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2012.05.018

030001 山西省太原市，山西醫科大學第一醫院普外科

劉建生，Email:syyyljs@126.com

2011-11-04)

(本文編輯：呂芳萍)