機(jī)械損傷致家兔盆腔粘連模型的建立*

周曉娜， 李靜平， 楊麗娟， 牛紅萍

(云南中醫(yī)學(xué)院， 云南 昆明 650500)

本實(shí)驗(yàn)成功地建立了家兔盆腔粘連模型動(dòng)物模型。通過肉眼觀察、病理學(xué)、血液檢查等觀察盆腔粘連模型的復(fù)制，發(fā)現(xiàn)盆腔粘連病變組織造模方法、感染方式、病變特點(diǎn)與盆腔粘連相似，值得進(jìn)一步借鑒使用。現(xiàn)報(bào)道如下：

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 家兔，體重2.5～3 kg，雌性，未孕。10只，由云南省中醫(yī)學(xué)院動(dòng)物房提供。

1.2 主要器材 醫(yī)用脫脂棉：徐州利爾康衛(wèi)生材料有限公司出品；醫(yī)用逢合針：，批號(hào)P-1010509，上海醫(yī)用逢合針廠有限公司；醫(yī)用非吸收性外科縫合線：批號(hào)100412，揚(yáng)州市金環(huán)醫(yī)療器械廠；持針鉗、眼科鑷等手術(shù)器械均為上海醫(yī)療器械(集團(tuán))有限公司手術(shù)器械廠；手術(shù)刀片，上海第二醫(yī)科大學(xué)杜行醫(yī)用器械廠；0號(hào)砂紙。

1.3 藥品 戊巴比妥鈉鹽：DS179，北京鼑國(guó)昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司；75%乙醇消毒液：批號(hào)100810，昆明南天化工藥業(yè)有限公司出品；0.9%氯化鈉注射液：批號(hào)D101123N1，昆明南疆制藥有限公司；碘酊：批號(hào)100401，昆明利健消毒制品有限公司；2%強(qiáng)化戊二醛消毒劑，批號(hào)20100519，上海利康消毒高科技有限公司。

2 方法

健康成熟的家兔10只，用3%戊巴比妥鈉鹽溶液麻醉家兔，去毛備皮，在無(wú)菌條件下于下腹正中切開2 cm，暴露兩側(cè)宮角及輸卵管，以0號(hào)細(xì)砂紙摩擦子宮及輸卵管的漿膜層，致漿膜層明顯擦傷出血。于60瓦日光燈下(距宮角及輸卵管20 cm)干燥20 min，還納于腹腔，逐層縫合。術(shù)后第14天剖腹，肉眼觀察盆腔是否有粘連帶形成，病理檢查是否有炎癥病變和血液檢查盆腔微循環(huán)情況。再向輸卵管-卵巢方向注射5%鎂藍(lán)溶液，同時(shí)捏緊子宮兩側(cè)，觀察輸卵管通暢程度(輸卵管通暢的判斷：通暢—注入鎂藍(lán)液無(wú)壓力，見傘端有鎂藍(lán)液溢出，輸卵管無(wú)局部膨大；不暢—注入鎂藍(lán)液有壓力，輸卵管先膨大，再見有鎂藍(lán)液溢出；阻塞—注入鎂藍(lán)液壓力大，輸卵管不脹，無(wú)鎂藍(lán)液自傘端溢出，有時(shí)見宮角部有藍(lán)染。如壺腹部膨大而傘端無(wú)鎂藍(lán)液溢出則為輸卵管遠(yuǎn)端阻塞)[1～2]。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 肉眼觀察盆腔粘連情況 術(shù)后第14天剖腹，肉眼發(fā)現(xiàn)子宮、輸卵管、大網(wǎng)膜全部粘連在一起，大量纖維結(jié)締組織合成，部分輸卵管增粗，整個(gè)盆腔損傷、充血，有膿性分泌物覆蓋。

3.2 病理改變 取增粗的輸卵管及盆腔結(jié)締組織作病理檢查，光鏡下見大量纖維結(jié)締組織明顯增生，血管擴(kuò)張充血，見大量炎性細(xì)胞，有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞；輸卵管管腔擴(kuò)大，黏膜皺襞和肌層充血、水腫。電鏡下細(xì)胞核核膜不清，染色質(zhì)內(nèi)線粒體腫脹，線粒體固縮。無(wú)纖毛細(xì)胞胞膜破壞，線粒體固縮，胞核密度模糊不清。

3.3 觀察血液流變學(xué) 測(cè)家兔的血液黏度、血漿黏度及血沉和正常家兔比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說明盆腔內(nèi)血液微循環(huán)障礙、組織缺氧。

3.4 觀察輸卵管通暢程度 雙側(cè)輸卵管通暢1只；雙側(cè)通而不暢1只，雙側(cè)阻塞2只，一側(cè)通暢、一側(cè)阻塞2只；一側(cè)通暢，一側(cè)通而不暢2只。一側(cè)通而不暢，一側(cè)阻塞2只。

4 討 論

4.1 技術(shù)要求 此模型制作過程中，在摩擦漿膜層時(shí)，因家兔盆腔組織脆弱，故要求用力輕，不能損傷子宮和輸卵管肌肉層，盡量不影響輸卵管管腔和子宮腔的組織結(jié)構(gòu)，以達(dá)到只是盆腔粘連而無(wú)宮腔粘連的目的；摩擦面要覆蓋整個(gè)子宮及輸卵管的漿膜層，使整個(gè)盆腔全部粘連。如果需要的粘連面積小，則可以減少摩擦面積。

4.2 造模機(jī)制 盆腔粘連形成主要是由于損傷引起漿膜表面的炎性反應(yīng)伴間質(zhì)喪失，產(chǎn)生炎性細(xì)胞和血液滲出。滲出物在3天以上不溶解，其中發(fā)生纖維細(xì)胞增生，引起粘連形成[1]。

4.3 意義 異物刺激的機(jī)械損傷是引起盆腔粘連的原因之一。盆腔粘連發(fā)生在2/3開腹術(shù)患者中。目前多認(rèn)為是由手術(shù)創(chuàng)傷、感染、異物反應(yīng)、組織缺血等引起的炎癥反應(yīng)[3]。該方法可造成明確的盆腔粘連模型，或并伴有輸卵管的異常。該復(fù)制方法簡(jiǎn)便易行，成功率高，可復(fù)制性強(qiáng)，筆者曾用此方法復(fù)制模型來觀察多途徑中藥外治法治療盆腔粘連的作用，效果滿意。進(jìn)一步證實(shí)了模型的可重復(fù)性和實(shí)用性。盆腔粘連目前是臨床常見疾病，復(fù)制該模型為臨床深入開展盆腔粘連的治療提供借鑒方法。

[1]尤昭玲.婦產(chǎn)科實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2007：93～94.

[2]黃河玲 兔慢性輸卵管炎動(dòng)物模型的建立[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2000，20(9)：1982～1983.

[3]張巧利，呂淑蘭，余姍姍.腹腔粘連、慢性盆腔痛與粘連松解術(shù).中國(guó)婦幼健康研究[J]，2006，17(3)：224～226.