Cell SELEX技術篩選巨噬細胞源性泡沫細胞適配子的初步研究

[摘要] 目的 利用Cell SELEX技術篩選巨噬細胞源性泡沫細胞適配子。 方法 通過80 mg/L氧化性低密度脂蛋白誘導THP-1巨噬細胞為泡沫細胞；聚合酶鏈反應擴增文庫；生物素-鏈霉親和素磁珠分離法構建單鏈DNA文庫；以巨噬細胞源性泡沫細胞為靶細胞，巨噬細胞和血管平滑肌細胞為反篩細胞，利用Cell SELEX技術篩選與巨噬細胞源性泡沫細胞結合的寡核苷酸序列，并對最后一輪篩選結果進行克隆測序。 結果 PCR的退火溫度對PCR產物的量有顯著的影響，退火溫度由65℃提高為72℃時的產物量明顯增加。利用生物素-鏈霉親和素磁珠分離法獲得了純度高、產量大的ssDNA文庫；經過18輪篩選后，成功獲得了28個與預期大小相同的ssDNA序列。 結論 利用Cell SELEX技術篩選出了巨噬細胞源性泡沫細胞的適配子，為研發用于動脈粥樣硬化的早期無創診斷試劑和靶向治療藥物奠定了基礎。

[關鍵詞] Cell SELEX技術；巨噬細胞源性泡沫細胞；適配子；隨機ssDNA文庫

[中圖分類號] R392.3 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2012）24-25-04