免疫印跡法在臨床TORCH項目檢測應用價值評價

【摘要】 目的 探討醫(yī)學檢驗中免疫印跡法指標分析在TORCH項目檢測中的檢測價值。方法 將我院2010年8月至2011年3月收治的100例需要免疫印跡法進行檢測患者為研究對象，用酶標IgE和生物素/抗生物素酶標IgE三種檢測支原體方法及酶標IgG檢測軍團桿菌Ⅰ型方法，進行了血清抗體測定。結(jié)果 篩選出的50例患者（皮膚點刺在+++以上）檢測陽性率為100%，眼結(jié)膜激發(fā)試驗檢測的敏感性為91.5%，特異性為92.3%，有效性為91.4%。其引發(fā)的癥狀一般較輕微，僅限于眼部和鼻部。結(jié)論 免疫印跡法指標可作為TORCH的檢測診斷指標，在一定程度可反應病情的嚴重程度，且操作簡便，值得臨床推廣。

【關(guān)鍵詞】 免疫印跡法；臨床TORCH項目；檢測；價值

變態(tài)反應疾病之一就是我們常見的過敏性疾病，這種過敏性疾病的最大發(fā)病人群就是兒童，這種疾病是一種慢性疾病，但是對于發(fā)病者的健康很不利，在國外的臨床研究中，通常就是利用點刺實驗來作為檢測方法。這種方法對于成年患者來說當然沒有問題，但是對于兒童來說就不太方便，可操作性也是大大的降低，因為點刺檢測有很大的痛感，會引起兒童的恐懼，所以臨床上難以實現(xiàn)，所以現(xiàn)在臨床上大多使用CPT無痛實驗，是一項可以替代或優(yōu)于皮膚點刺試驗適用于兒童的檢查的方法但得探討。眼結(jié)膜激發(fā)試驗（provocation tests）是模擬自然發(fā)病的條件，以少量致敏原誘發(fā)一次較輕的變態(tài)反應病發(fā)作，用以確定測試物是否為患者的致敏物[1]。經(jīng)相關(guān)研究證明，眼結(jié)膜激發(fā)試驗試驗較簡便、安全且易于觀察[2]。先將我院經(jīng)過血清特異性IgE檢測（sIgE）篩選出90例陽性患者為研究對象，評價此試驗方法在診斷呼吸道變態(tài)反應病因中的價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇我院從2009年12月到2011年12月收治的患兒60例，所有患兒中韓有女性患兒30例，男性患兒30例，所有患者的年齡在4到12歲不等，平均年齡為8.56歲。其中50例患兒的皮膚點刺和血清特異性IgE均顯示對屋塵螨和粉塵螨陽性（皮膚點刺在+++以上，屋塵螨和粉塵螨的特異性IgE均大于3.5kU/L）。50例患兒接受安脫達屋塵螨進行脫敏治療4-14個月。

1.2 實驗方法 點刺試驗方法與結(jié)果判定：點刺部位為前臂掌側(cè)，在受試部位編號，每種變應原間隔2-3㎝，并加上陰性和陽性對照。用標準點刺針垂直刺入真皮層，輕柔、壓力均勻地維持1s后垂直拔出點刺針，深度以刺破表皮而不出血為標準，每刺一下即換針。然后用柔紙吸除多余的溶液，主要不要混合相鄰液滴，于測試后20min判斷結(jié)果。如果呈現(xiàn)淡黃色皮丘，其周圍有紅斑，為陽性。皮膚反應強度與陽性對照相似時為+++；皮膚反應強于陽性對照相似時為++++，皮膚反應弱于陽性對照時標以+或++；皮膚反應與生理鹽水相同為陰性[3]。

1.3 評定標準 按照陜西科學技術(shù)出版社出版的《臨床醫(yī)學研究原理與方法》第六章“篩檢與診斷試驗的評價”中的理論和方法來確定眼結(jié)膜激發(fā)試驗的有效性、特異性和敏感性實驗的根據(jù)。

實驗的評價標準為：

①敏感性=S+病例中的CPT（+）數(shù)即TPS+病例數(shù) ；②特異性=S-病例中的CPT（-）數(shù)即TNS-病例數(shù) ；③有效性=TP+TNS+病例數(shù)-S-病例數(shù) 。S+病例為蠶絲誘發(fā)呼吸道變態(tài)反應的評分≥3分者，S-病例為蠶絲誘發(fā)呼吸道變態(tài)反應的評分<3分者，TP代表病例中的CPT陽性、TN代表病例中的CPT陰。

1.4 統(tǒng)計學處理 所有數(shù)據(jù)放入統(tǒng)計軟件SPSS13.0中進行計算，所有的資料都采用均數(shù)±標準差來進行表示，采用T來檢驗組間計量，統(tǒng)計學有意義，用P<0.05表示。

2 結(jié) 果

該組篩選出的螨變應原陽性50例患兒，sIgE陽性，但水平各不相同，IgG4水平較低，全部完成了眼結(jié)膜激發(fā)試驗進行檢查，治療前其中眼結(jié)膜激發(fā)試驗中顯示陽性者為49例，除1例有眼部過敏史，本組患者皮試≥（+++）者，眼結(jié)膜激發(fā)試驗的陽性率為100%（88/88）。另選的20例皮試陰性的健康對照者，眼結(jié)膜激發(fā)實驗的結(jié)果檢測呈陰性。特異性治療后，50例患者中經(jīng)全程治療有效45例，其中sIgE的治療前為55±45KU/ml，治療后為60±43KU/ml，無顯著性差異（t=1.5，P>0.05）；IgG4水平治療前為2500±1500KU/ml，治療后23500±14500KU/ml，呈顯著性差異，（t=32.8；P<0.05）；治療后45例皮膚點刺試驗成陰性，眼結(jié)膜激發(fā)試驗的檢測結(jié)果呈陰性。在治療4個月時，有14例患者的皮膚點刺試驗成陰性，眼結(jié)膜激發(fā)試驗的檢測結(jié)果呈陰性。

3 討 論

免疫印跡法（Western blotting）是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術(shù)相結(jié)合的雜交技術(shù)。在多種項目檢測中都有著顯著的應用價值。本文結(jié)果中篩選出的50例患者（皮膚點刺在+++以上）檢測陽性率為100%，眼結(jié)膜激發(fā)試驗檢測的敏感性為91.5%，特異性為92.3%，有效性為91.4%。其引發(fā)的癥狀一般較輕微，僅限于眼部和鼻部。提示免疫印跡法指標可作為TORCH的檢測診斷指標，在一定程度可反應病情的嚴重程度，且操作簡便，值得臨床推廣。

參考文獻

[1] 洪蘇玲，黃江菊.眼結(jié)膜激發(fā)試驗在鼻變態(tài)反應的臨床應用[J].重慶醫(yī)科大學學報，1998，23（2）：156-158.

[2] 喬秉善.變態(tài)反應實驗技術(shù)[J].北京：科學出版社，1996：129-133.

[3] 江玲，謝柏梅，王永興.眼結(jié)膜激發(fā)試驗在診斷呼吸道過敏疾病中的應用研究[J].西北國防醫(yī)學雜志，2004，25（6）：415-417.

[4] 李春蘭，馮明禮.變應原眼結(jié)膜激發(fā)試驗檢查同側(cè)鼻分泌物嗜酸粒細胞在呼吸變態(tài)反應中的意義[J].中國醫(yī)藥導報，2009，6（27）：18-20.