摘要目的:探討乙型肝炎患者血清HBV DNA含量與HBV血清標志物的關系。方法:對比分析306例乙肝患者的HBVM和HBV DNA的檢測結果。HBVM用ELISA法定性檢測,HBV DNA用熒光定量PCR法檢測。結果:HBsAg(+)/HBeAg(+)組HBV DNA的陽性率明顯高于HBsAg(-)/HBeAg(-)組(P<0.01);HBsAg HBeAg抗HBc陽性組和HBsAg HBeAg陽性組的HBV DNA陽性率最高,分別為97.6%和100%;其次是HBeAg抗HBe抗HBc陽性組和HBsAg抗HBc陽性組,分別為66.7%和68.7%;其余各抗體陽性組HBV DNA的陽性率較低。結論:HBV DNA是評價HBV感染的直接證據,與HBV血清標志物聯合應用,對于乙肝的臨床診治和預后判斷具有重要意義。
關鍵詞 乙肝DNA 熒光定量PCRHBV血清標志物ELLSA
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.09.247
傳統的肝功能和乙型肝炎病毒血清標志物的檢測,只是反應機體對HBV感染的免疫狀態,為判斷患者病情和傳染性及臨床治療提供重要的依據。本文用該技術檢測HBV-DNA的同時,用ELISA法檢測乙肝血清標志物多種結果模式的HBV-DNA結果進行分析,并對大三陽患者治療情況的HBV-DNA作跟蹤檢測,探尋乙型肝炎實驗診斷新模式。對306例乙肝患者的HBVM和HBV DNA檢測結果進行了對比分析,結果報告如下。
資料與方法
2010年2月~2011年6月收治乙型肝炎患者306例,男174例,女132例,年齡13~68歲,抽靜脈血2ml,2小時內分離血清。
儀器試劑及方法:①HBV DNA定量:采用實時熒光定量PCR法,儀器為SLAN熒光PCR檢測儀,試劑操作嚴格按說明書進行。②HBV血清標志物:用ELLSA法檢測。
結果
各組HBV DNA陽性率比較見表1~3。
討論
乙型病毒性肝炎,簡稱乙肝,是一種由乙型肝炎病毒引起的疾病。乙肝主要在中國及其他一些亞洲國家中流行。目前中國人口中約有1/10是乙肝病毒攜帶者,多數無癥狀,其中1/3出現肝損害的臨床表現。乙肝的特點為起病較緩,以亞臨床型及慢性型較常見。無黃疸型HBsAg持續陽性者易慢性化。乙肝主要通過血液、母嬰和性接觸進行傳播。乙肝疫苗的應用是預防和控制乙型肝炎的根本措施。乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒(HBV)引起的、以肝臟炎性病變為主并可引起多器官損害的一種病。本病廣泛流行于世界各國,主要侵犯兒童及青壯年,少數患者可轉化為肝硬化或肝癌。因此,它已是威脅人類健康的世界性疾病,也是我國當前流行比較廣泛一種病。乙型病毒性肝炎無一定的流行期,1年4季均可發病,但多屬散發。近年來乙肝發病率呈明顯增高趨勢。
乙肝病毒S基因編碼的多肽稱為S蛋白(HBsAg),C基因編碼的多肽稱為核心蛋白(HBsAg),前C基因的C基因連續編碼,則產生e抗原前蛋白,在肝細胞內質網中形成HBeAg,HBeAg不是乙肝病毒顆粒成分。一般認為,HBsAg(+)HBeAg(+)提示HBV復制活躍和傳染性強,HBsAg、HBeAg轉陰,抗,HBsAg及抗HBeAg的出現是機體清除HBV的標志,并且提示機體具有對HBV的免疫力。研究表示,HBsAg(+)/HBeAg(+)組的HBV DNA陽性率明顯高于HBsAg(-)/HBeAg(-)組(P<0.01),HBsAgHBeAg抗HBc陽性組及HBsAgHBeAg陽性組的HBV DNA陽性率分別高達97.6%和100%,這從基因水平上進一步證實了HBsAg和HBeAg確實是反映HBV復制的可靠指標。但同時也應注意到,HBsAg和HBeAg轉陰后,部分病例病毒復制。HBeAg(-)組中,有61.7%HBV DNA呈陽性,尤其在HBsAg抗HBe抗HBc陽性組和HBsAg抗HBc陽性組中,HBV復制呈活躍狀態,陽性率分別為66.7%和68.7%,這種現象可能與HBV前C/C基因突變有關。前C基因變異,使HBeAg不能形成,但病毒本身復制不受影響,造成HBeAg陰性的HBV,使患者血中的HBV水平居高不下,所以,這部分人群具有很高的傳染性。HBsAg(-)組中有%HBV DNA呈陽性,可能是由于HBV S區突變異導致抗原性改變,使HBsAg不能被檢出。綜上所述用ELISA法檢測HBV血清學標志物時,受乙肝病毒突變株及方法靈敏度的影響,可能產生假陰性結果,造成對乙肝患者的漏診、誤診,所以建議聯合應用HBV DNA定量檢測以明確診斷,必要時還可以進行HBV變異株檢測及肝細胞活檢。
參考文獻
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