高鹽致高血壓大鼠腦干基底部和血漿ET、CGRP含量變化的研究

摘要：目的：本實驗動態(tài)測定高鹽飲食致高血壓大鼠不同時期腦干基底部和血漿 ET、CGRP含量的變化。方法：把4%NaCl液體500ml裝在500ml水瓶子中，讓2 月齡Wistar 大鼠每天自由飲用，共持續(xù)10周時間。即可形成高血壓動物模型，該模型動物同時伴有心臟肥厚，血管壁中層增厚等血管重構(gòu)現(xiàn)象。10周后宰殺大鼠，打開腹腔通過腹主動脈采取血液5ml置于冰箱內(nèi)冷藏待遇^[1]。然后開顱取出腦干，用放射免疫酶聯(lián)法測試ET、CGRP含量。結(jié)果：2月齡大鼠經(jīng)過10周高鹽飲食后導(dǎo)致高血壓，其腦干和血漿中的ET含量均明顯高于同齡Wistar 鼠（WR）（P<0.01） ，而 CGRP含量均明顯低于同齡WR（ P<0.01）。而12月齡大鼠腦干和血漿中的ET含量均明顯高于2月齡大鼠。結(jié)論：①高鹽飲食可以導(dǎo)致高血壓；②高水平的E T含量和較低的CGRP含量可能與高血壓的形成和發(fā)展有關(guān)；③老齡化也是高血壓一個不容忽視的原因。

關(guān)鍵詞：ET CGRP 高血壓 高鹽飲食【中圖分類號】R4 【文獻標(biāo)識碼】A 【文章編號】1008-1879（2012）12-0016-02

1 材料與方法

1.1 實驗動物。2月齡Wistar大鼠（ WR）100只，體重90～140g，12月齡Wistar大鼠（ WR）50只，體重100～160g，購自西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心， 將2月齡Wistar大鼠（ WR）隨機分為2組，即：對照組50只，造模組50只，12月齡Wistar大鼠（ WR）50只裝在一個籠子內(nèi)。3組大鼠分裝在3個大的動物飼養(yǎng)籠中，在同一條件下，用顆粒型普通大鼠飼料喂養(yǎng)，飲用自來水，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。

1.2 高鹽飲食高血壓動物模型建立。將3組大鼠同樣喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上，給造模組50只WR每天加入4 %NaCl液體500ml， Wistar 大鼠每天自由飲用，共持續(xù)10周時間^[3]。

1.3 樣本收集及測定。10周實驗結(jié)束后，將所有大鼠，用20%烏拉（0.6ml/100mg）胸腔內(nèi)注射麻醉，打開胸腔在胸主動脈采血，采血量5ml/只，并立即移入離心管，迅速放入全自動高速冷凍離心機里，以3500r/min離心15min，取50μl上清液。同時迅速將取過血液的大鼠置于冰盤上斷頭分離腦干、稱重，沸水浴10分鐘，置玻璃勻漿器， 加入1 mol/ L 預(yù)冷的醋酸（ w / v = 1∶5） 勻漿， 低溫離心（ 4500rpm×10min，4℃），取上清液置于聚丙乙烯塑料試管中加 PELH 液補充至 3ml，所取血液迅速置于含 10% EDTANa2501和1001抑肽酶試管中， 混勻低溫離心（ 4500rpm×10min， 4℃） ， 取上清液置于聚丙乙烯塑料試管中，所有樣本均置于-70℃低溫冰箱中保存。樣本收集齊后一次性用南京建成出品的ET 和CGRP 放免藥盒進行測試，操作程序嚴格按各藥盒說明進行。

1.4 統(tǒng)計處理。各組測定結(jié)果以表示， 用電子計算機進行各組均數(shù)和各組均數(shù)間差別顯著性檢驗（P檢驗）。

2 結(jié)果

表1 各組大鼠腦ET、CGRP 的變化比較（ n=50只）

組別ET（pg/mg）CGRP（pg/ml）對照組Ⅰ7.76±2.07**105.4±27.63對照組Ⅱ6.37±1.9498.37±27.69造模組16.07±2.35157.26±32.81**表2 各組大鼠血漿ET、CGRP 的變化比較（X±S，n=50只）

組別ET（pg/mg）CGRP（pg/ml）對照組Ⅰ7.76±2.07**157.26±32.81**對照組Ⅱ6.37±1.9441.02±27.50造模組1.91±5.18**395.43±40.003 討論

本課題采用動物作為實驗研究對象，研究高血壓的病因及生化指標(biāo)的變化，課題結(jié)果顯示： 2月齡WR高鹽飲食高血壓WR腦干和血漿中 ET水平明顯高于同齡正常血壓WR的含量（P<0.01），而 12月齡的正常血壓的WR腦干和血漿ET含量又明顯高于2月齡的含量（P<0.01）。2月齡高鹽飲食高血壓WR腦干和血漿 CGRP 含量低于2月齡和12月齡WR的含量，并隨鼠齡增加，其含量逐漸下降。結(jié)果提示：①造模組Wistar 大鼠每天加入4 %NaCl液體500ml，共持續(xù)10周時間，所有大鼠都出現(xiàn)了高血壓，說明長期高鹽飲食可以形成高血壓，建議我們平時最好低鹽飲食；②2月齡高鹽飲食高血壓WR腦干和血漿中 ET水平明顯高于同齡正常血壓的WR腦干和血漿中 ET含量（P<0.01），而 12月齡的正常血壓WR的腦干和血漿ET和血漿CGRP 含量低于2月齡WR的含量（P<0.01）。③高血壓WR的腦干和血漿ET和血漿CGRP 含量的變化說明，高血壓的維持和發(fā)展可能與其高水平的ET含量以及較低水平的CGRP 含量有關(guān)。

有報道^[5]，在高血壓狀態(tài)下， 腦組織缺血范圍比正常血壓狀態(tài)下大，而且恢復(fù)差， 除與側(cè)支循環(huán)血管的損害有關(guān)外，也可能與ET 的過量釋放有關(guān)。本實驗結(jié)果說明， 在中樞和外周高水平的ET 含量和較低水平的CGRP 含量可能與高血壓的形成、維持和發(fā)展有關(guān)。局部腦缺血后， ET在高血壓狀態(tài)下持續(xù)處于高水平，不利于側(cè)支循環(huán)的開放，而可能加速缺血性腦損傷的發(fā)生和發(fā)展， 此亦可能是臨床高血壓性腦梗塞患者恢復(fù)慢，療效差的一個重要原因。參考文獻

[1] 彭英， 黃如訓(xùn)， 李湘平， 等. 高血壓致腦血管損害及其對腦梗塞影響的實驗研究[J].中華醫(yī)學(xué)雜志2011，14（11）： 100

[2] 馬維紅，李琦.高血壓流行及危險因素調(diào)查現(xiàn)狀[J].內(nèi)科，2010，2（15）：201-203