肺炎鏈球菌藥敏試驗(yàn)檢驗(yàn)結(jié)果探討

摘要：目的：肺炎鏈球菌感染是導(dǎo)致細(xì)菌性疾病和死亡的主要原因。然而，肺炎鏈球菌卻對(duì)青霉素、紅霉素以及三代頭孢菌素等多種抗生素耐藥，不利于臨床治療。本文旨在探討肺炎鏈球菌的耐藥機(jī)制，進(jìn)行耐藥性檢測(cè)和藥敏試驗(yàn)。方法：從2009-2011年在醫(yī)院進(jìn)行治療的呼吸道感染病人的痰液中分離出肺炎鏈球菌30株，對(duì)其藥敏結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)分析。結(jié)果：肺炎鏈球菌的耐藥性存在地區(qū)差異。結(jié)論：根據(jù)藥敏結(jié)果在本地區(qū)選取合理有效的抗生素對(duì)患者進(jìn)行治療，或者對(duì)易感人群進(jìn)行肺炎鏈球菌疫苗接種。

關(guān)鍵詞：肺炎鏈球菌 藥敏試敏 檢驗(yàn)結(jié)果【中圖分類(lèi)號(hào)】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1008-1879（2012）12-0205-01

肺炎鏈球菌感染是導(dǎo)致細(xì)菌性疾病和死亡的主要原因，它寄居在人體上呼吸道，是一種條件致病菌，人體抵抗力下降時(shí)，肺炎鏈球菌即引起支氣管炎或大葉肺炎，還可能導(dǎo)致中耳炎、腦膜炎等多種疾病。20世紀(jì)60年代以前，醫(yī)學(xué)界普遍認(rèn)為肺炎鏈球菌對(duì)青霉素高度敏感，因此，將青霉素作為治療的首選藥物。自1967年首次發(fā)現(xiàn)耐青霉素肺炎鏈球菌后，青霉素對(duì)其的治療效果明顯減弱。近年來(lái)，又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)肺炎鏈球菌對(duì)紅霉素、三代頭孢菌素的耐藥性，嚴(yán)重影響了臨床治療，故對(duì)分離出的肺炎鏈球菌進(jìn)行藥敏性分析，為臨床治療提供更多的參考。

1 材料和方法

1.1 菌株來(lái)源。2009-2011年在醫(yī)院接受治療的呼吸道感染病人的痰液中分離出的肺炎鏈球菌30株。

1.2 分離與鑒定。根據(jù)菌落形態(tài)、革蘭氏染色，結(jié)合膽汁溶液試驗(yàn)、Optochin敏感試驗(yàn)、ATB自動(dòng)化細(xì)菌鑒定儀等鑒定，檢出的肺炎鏈球菌為該標(biāo)本單一菌種或主要菌種。

1.3 藥敏試驗(yàn)。在NCCLS的動(dòng)員下，相關(guān)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)發(fā)了可靠的肺炎鏈球菌專(zhuān)用的藥敏試驗(yàn)方法。主要有紙片擴(kuò)散法、微量稀釋法和商品試劑盒法。

1.3.1 紙片擴(kuò)散法^[1]。紙片擴(kuò)散法使用羊血平板，0.5麥?zhǔn)蠞岫染航臃N平板。紙片法簡(jiǎn)單易行，將平板上放在35攝氏度，5%CO2中培養(yǎng)20—24h。但紙片擴(kuò)散法對(duì)一些青霉素類(lèi)和頭孢菌素類(lèi)藥物的準(zhǔn)確性不夠理想，易出現(xiàn)重要誤差和次要誤差。NCCLS對(duì)解釋抑菌環(huán)和質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)都有特別規(guī)定^[2]。頭孢噻肟、頭孢曲松紙片藥敏試驗(yàn)會(huì)產(chǎn)生15%的次要誤差。

1.3.2 微量稀釋法^[1]。微量稀釋法采用經(jīng)離子校正的M—H肉湯加入2%-5%溶血馬血的培養(yǎng)基，將抗生素稀釋于培養(yǎng)基中，分裝微量板。用羊血平板上的菌落制備菌液，加入微量板，在35攝氏度、普通環(huán)境下培養(yǎng)20—24h，然后人工判定結(jié)果，MIC的解釋可以參考NCCLS的最新文件中的標(biāo)準(zhǔn)。

1.3.3 商品試劑盒法^[1]。采用經(jīng)FDA認(rèn)可的商品藥敏試劑盒，參照微量稀釋法設(shè)計(jì)，微量板上有14對(duì)含有一種或多種濃度的測(cè)試杯。挑取菌落制成懸浮液，接種到測(cè)試杯中，在35攝氏度、普通環(huán)境下培養(yǎng)20—24h，然后人工判定結(jié)果。或用ATB鑒定儀直接測(cè)定MIC，MIC的解釋可以參考NCCLS的最新文件中的標(biāo)準(zhǔn)。

1.3.4 藥敏試驗(yàn)的質(zhì)量控制。每周以肺炎鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC49619對(duì)10種抗生素紙片進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。所有質(zhì)控結(jié)果均符合NCCLS最新頒布的藥敏質(zhì)控范圍。

2 結(jié)果

作為試驗(yàn)標(biāo)本的肺炎鏈球菌對(duì)青霉素、萬(wàn)古霉素、左氧氟沙星和阿莫西林的敏感率為100%，對(duì)復(fù)方新諾明、紅霉素和林可霉素的耐藥率較高。所以，在該地區(qū)內(nèi)治療肺炎鏈球菌感染仍然以青霉素為首要選擇，而復(fù)方新諾明、紅霉素和林可霉素已經(jīng)不能適用于該地區(qū)感染的治療了。肺炎鏈球菌的耐藥性存在地區(qū)差異，因此，應(yīng)該根據(jù)所在地細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果，選擇合理有效的抗生素進(jìn)行治療。

3 討論

自1967年發(fā)現(xiàn)第一株耐青霉素的肺炎鏈球菌后，耐青霉素的肺炎鏈球菌在全球范圍內(nèi)明顯增多。隨后，醫(yī)學(xué)界開(kāi)始使用三代頭孢菌素治療肺炎鏈球菌感染，但很快又出現(xiàn)了對(duì)三代頭孢菌素產(chǎn)生耐藥性的肺炎鏈球菌^[3]。

肺炎鏈球菌細(xì)胞壁上有多種青霉素結(jié)合蛋白，當(dāng)抗生素與結(jié)合蛋白結(jié)合時(shí)，細(xì)菌生長(zhǎng)受到抑制，細(xì)菌體迅速溶解。但產(chǎn)生耐藥性的肺炎鏈球菌，有一種或多種結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，對(duì)青霉素的親和力下降，導(dǎo)致對(duì)青霉素產(chǎn)生耐藥^[4]。低親和力的結(jié)合蛋白是由于基因編碼變異導(dǎo)致的，這種變異不是突變，是由于轉(zhuǎn)座子直接“跳躍”至細(xì)菌的DNA上進(jìn)行復(fù)制，這種變異是具有多樣性，因?yàn)榭梢园l(fā)生在不同的位點(diǎn)，從而獲得不同類(lèi)型的低親和力的結(jié)合蛋白。

近年來(lái)，對(duì)耐青霉素肺炎鏈球菌的報(bào)道日漸增多，耐藥肺炎鏈球菌大部分是社區(qū)感染導(dǎo)致的，抗生素的不合理大量使用導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性，并從一個(gè)地區(qū)傳播到另一個(gè)地區(qū)。這對(duì)醫(yī)學(xué)工作者而言，并不是一個(gè)好消息，因?yàn)槿藗儫o(wú)法控制由轉(zhuǎn)座子、質(zhì)粒或轉(zhuǎn)型變異導(dǎo)致耐藥基因擴(kuò)散的遺傳機(jī)制，細(xì)菌的耐藥性已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)界必須重視的問(wèn)題，臨床治療中合理有效使用抗生素是減少和預(yù)防耐藥性肺炎鏈球菌產(chǎn)生的重要保證。在高度流行區(qū)域，應(yīng)對(duì)易感高危人群進(jìn)行積極的預(yù)防。目前，對(duì)肺炎鏈球菌疫苗的開(kāi)發(fā)已經(jīng)在進(jìn)行中，盡管目前研發(fā)出的疫苗效果還不盡如人意，但隨著改進(jìn)研究的進(jìn)一步發(fā)展，一定會(huì)研發(fā)出能有效積極預(yù)防肺炎鏈球菌感染的疫苗。

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