高效液相色譜法測定福多司坦原料藥的含量

[摘要] 目的 建立福多司坦原料藥含量的測定方法。 方法 采用高效液相色譜法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠柱C18（250 mm×4.6 mm，5mm）為色譜柱，水-甲醇（99.5 ： 0.5）為流動相，流速為0.8 mL/min，檢測波長：220 nm，溫度：30 ℃。 結果 福多司坦的線性范圍為y=1 575.2x-1 319，r=0.989 242，平均回收率為95.89%（RSD=1.7%）。 結論 該法精確可靠，簡單方便，建立了HPLC法測定福多司坦原料藥中的福多司坦含量的方法。

[關鍵詞] 福多司坦；高效液相色譜法；含量測定

[中圖分類號] R927.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）04-103-02

福多司坦為S-（3-羥基丙基）-L-半胱氨酸是無臭，無味的類白色至微黃色結晶或結晶性粉末，由SSP公司和三菱Welfide公司生產的一種新型的祛痰藥[1]。福多司坦結構中有非游離密封的巰基，對局部黏蛋白無活性作用，口服后經代謝產生含有游離巰基的代謝產物而發(fā)揮藥理作用，因而用藥后無明顯胃腸道副作用[2]。

實驗證明，福多司坦可以改變分泌物的組成和流變學性質，體內代謝物導致支氣管分泌物中黏蛋白的二硫鍵斷裂，降低痰液黏度，使受抑制的呼吸功能得到改善；還可以改善和增強抗生素對支氣管黏膜的滲透作用，利于呼吸道各種炎癥的治療[3]。國外臨床研究表明與羧甲司坦、乙酰半胱氨酸和氨溴索等同類產品比較，本品對支氣管擴張、慢性支氣管炎、支氣管哮喘、彌漫性支氣管炎、塵肺癥、肺氣腫、肺結核和非典型耐酸桿菌感染癥具有很好的療效[4]。作為新型作用的去痰劑，該藥對氣道上皮杯細胞的過量形成起抑制作用，大劑量給藥沒有發(fā)生藥物蓄積，肝和腎功能中度障礙[5]。為了確保該藥質量，本研究建立了HPLC測定福多司坦原料藥含量的方法，具有快速、簡便、專屬性好、結果測定準確、可靠等優(yōu)點[6]。

1 材料與方法

1.1 儀器

Agilnt1100型高效液相色譜儀；自動進樣器；DAD檢測器；Agilent Chemstation色譜工作站。福多司坦對照品（含量（干）99.7%，批號061100040），福多司坦原料藥（批號061000030；061000040；061100040）均由河南天方藥業(yè)股份有限公司提供；甲醇為色譜純。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱：DiamonsilTM（鉆石）C18 柱（250 mm ×4.6 mm，5 mm）；流動相：水-甲醇（99.5 ： 0.5）；流速：0.8 mL/min；檢測波長：220 nm；柱溫：30 ℃。

1.2.2 對照品溶液的制備 取105 ℃干燥至恒重的福多司坦對照品50 mg，精密稱定，置10 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成福多司坦貯備液。精密量取貯備液10 mL，溶50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，制成福多司坦1.0 mg/mL的對照品溶液。

1.2.3 供試溶液的制備 精密量取福多司坦原料藥100 mg，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即成福多司坦原料藥供試品溶液。

2 結果

2.1 系統適應性試驗

在前述色譜條件下，分別精密吸取福多司坦對照品溶液，福多司坦原料藥供試品溶液20μL進樣，色譜圖見圖1。福多司坦保留時間為 6.5 min，色譜柱理論塔板數按福多司坦計算不少于3 000。

2.2 線性與范圍

精密吸取“2.2項”下福多司坦貯備液適量，用流動相分別稀釋成濃度為0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/mL，分別精密吸取20μL在“2.2項”下色譜條件下進樣。用測得的福多司坦面積A對濃度C作標準曲線，其直線方程為y=1575.2x-1319，r=0.989 242。結果表明，濃度在0.25～2.5 mg/mL范圍內，峰面積和測定濃度保持良好的線性關系。

2.3 精密度試驗

2.3.1 精密度 精密吸取含量測定用的福多司坦對照品溶液20μL，照含量測定方法注入高效液相色譜儀，重復進樣6次，依法測得峰面積，以峰面積考察其精密度，結果證明精密度試驗良好，平均峰面積為3 696.07，RSD=1.4%。

2.3.2 重復性 精密稱定同一批次的福多司坦原料藥6份，配置成1 mg/mL 的溶液，依次進樣，平均峰面積為3 614.57，RSD為0.9%。

2.4 穩(wěn)定性試驗

精密吸取同一濃度供試品溶液20μL，室溫放置，分別在2，4，6，8，10，12 h測定峰面積，峰面積基本不變，平均峰面積為3 748.46，RSD為1.6%，說明樣品穩(wěn)定性良好。

2.5 加樣回收率試驗

取已知含量的福多司坦原料藥樣品9份，分別加入福多司坦原料藥對照品相當于福多司坦原料藥樣品中已知含量的80%，100%，120%，按含量測定的方法，進行回收率測定結果，3種加入量福多司坦原料藥的平均回收率為95.89%，RSD為1.7%。見表1。

2.6 樣品測定

取對照品溶液和供試品溶液，按上述色譜條件進行進樣，色譜分析按外標法計算含量，結果見表取福多司坦供試品，精密吸取20μL在上述色譜條件下測定3次，由對照品溶液所得福多司坦原料藥的線性關系計算含量的RSD值分別為0.17%、0.09%、0.12%。

3 討論

3.1 波長的選擇

將對照品溶液在200～400 nm處進行紫外掃描，以最大吸收波長220 nm作為該樣品檢測波長最為合適。

3.2 流動相的選擇

本實驗考察了不同流動相條件下樣品色譜峰的分離情況。因為本品的極性較大，為使本品與有關物質能獲得良好的分離，故考慮盡量增加流動相中水的比例。故采用水-甲醇（99.5 ： 0.5）為流動相。同時考慮到樣品與雜質峰更好的分離，選擇流速為0.8 mL/min。實驗證實，選擇此流動相簡單、方便、快捷。

[參考文獻]

[1] 許茜，李杰，王燕，等.高效液相色譜法測定福多司坦口服溶液的含量、有關物質及對其穩(wěn)定性的初步研究[J].藥物分析雜志，2006（10）：1457-1460.

[2] 張軍霞，仲平.高效液相色譜法測定福多司坦的含量[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2009，19（6）：1287-1288，1445.

[3] 胡士高.高效液相色譜法測定福多司坦膠囊的有關物質[J].中國實用醫(yī)藥，2007，38（12）：26-27.

[4] 張嶄，王玲，屈凌波.福多司坦膠囊的制備及其處方優(yōu)化[J].河南師范大學學報，2010，36（6）：98-100.

[5] 宋小莉，鄭文.高效液相色譜法測定福多司坦片的含量[J].藥物分析雜志，2005，25（9）：1143-1144.

[6] 沈敏.反相高效液相色譜法測定福多司坦片的含量[J].齊魯藥事，2005，24（18）：464-465.

（收稿日期：2012-12-21）