網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量在β-地中海貧血和缺鐵性貧血病人中的變化研究

曾華，張智賢，倪李佳，朱玉琴，鮑蘊(yùn)文

(1、中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東廣州510120；2、中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院生殖中心，廣東廣州510120)

網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量在β-地中海貧血和缺鐵性貧血病人中的變化研究

曾華1，張智賢1，倪李佳1，朱玉琴2，鮑蘊(yùn)文1

(1、中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東廣州510120；2、中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院生殖中心，廣東廣州510120)

目的探討網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量(RET-He)在β-地中海貧血和缺鐵性貧血中的分布差異。方法Sysmex XE-5000檢測(cè)貧血患者的血常規(guī)結(jié)果，比較正常人、缺鐵性貧血與β-地中海貧血之間RBC、MCV、RET#、Ret-He等參數(shù)分布的差異性。結(jié)果Ret-He在正常人、缺鐵性貧血與β-地中海貧血之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論Ret-He可輔助鑒別輕度β-地中海貧血和輕度缺鐵性貧血，并且在缺鐵性貧血患者中隨著貧血程度的加重而降低。

網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量；缺鐵性貧血；β-地中海貧血

網(wǎng)織紅細(xì)胞是骨髓釋放的尚未完全成熟的紅細(xì)胞，半衰期僅為1～2d，可以及時(shí)反映骨髓紅細(xì)胞生成狀態(tài)，網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量(reticulocyte hemoglobin content,Ret-He)是網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)之一，直接反應(yīng)新生紅細(xì)胞血紅蛋白的合成水平。

缺鐵性貧血(IDA)和β-地中海貧血(β-地貧)是臨床上最常見的小細(xì)胞低色素性貧血，目前臨床上通常用全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(complete blood counts,簡(jiǎn)稱CBC)、血清鐵生化及血紅蛋白電泳單一或聯(lián)合來鑒別這兩種疾病，但這些指標(biāo)存在缺陷，HbA2在重度IDA、鐵幼粒貧血及鉛中毒時(shí)會(huì)減低，而巨幼貧、甲亢及風(fēng)濕病時(shí)會(huì)增高；血清鐵蛋白(SF)敏感性高，但受機(jī)體生物變異影響很大；血漿游離鋅原卟啉(ZPP)敏感性低，受鉛中毒、溶血性疾病和慢性感染等的影響[1]。

本研究旨在探討Ret-He在缺鐵性貧血與β-地中海貧血患者中的分布差異，以及鑒別診斷的意義。

1 材料與方法

1.1 臨床資料收集2009年11月至2011年6月在我院門診及住院病人確診為缺鐵性貧血和β-地中海貧血病例共164例，其中缺鐵性貧血86例，β-地中海貧血78例。對(duì)照組75例，為我院健康體檢者。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)缺鐵性貧血和β-地中海貧血的診斷使用國(guó)內(nèi)診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。缺鐵性貧血的診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)小細(xì)胞低色素貧血：男性Hb＜120g/L，女性Hb＜110g/L，MCV＜80fl，MCH＜27pg，MCHC＜0.32；(2)有明確的缺鐵病因和臨床表現(xiàn)；(3)SF＜12μg/L。β-地中海貧血的診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床表現(xiàn)：貧血癥狀或無，肝脾腫大，地中海貧血面容等；(2)實(shí)驗(yàn)室檢查：呈小細(xì)胞低色素貧血，男性Hb＜120g/L,女性Hb＜110g/L。紅細(xì)胞大小不等、形態(tài)不一，有靶形紅細(xì)胞，紅細(xì)胞脆性減低，HbA2＞3.5%或正常，HbF增加；(3)遺傳學(xué)：父母至少一方為β地中海貧血。

1.3 儀器及試劑Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀及其配套試劑(BIONO1納博萬血球儀試劑)。

1.4 檢測(cè)原理全自動(dòng)網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)：XE-5000用隨機(jī)進(jìn)樣方式全自動(dòng)檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞，采用了獨(dú)立的檢測(cè)通道和特殊的RNA/DNA熒光染料，除了能報(bào)告網(wǎng)織紅細(xì)胞的絕對(duì)值、百分比外，還能根據(jù)網(wǎng)織紅細(xì)胞的成熟度對(duì)網(wǎng)織紅細(xì)胞進(jìn)行分類，并同時(shí)報(bào)告未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(IRF)和網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量(Ret-He)。

1.5 分組先按病種分類比較，再進(jìn)一步按貧血程度將每個(gè)病例組分為輕度、中度、重度貧血,共6個(gè)病例組，采集貧血患者未治療前的血常規(guī)結(jié)果。同時(shí)設(shè)正常對(duì)照組。排除有合并癥，近期有輸血史及鐵劑治療史，符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的病例β-地中海貧血共78例，其中輕度貧血42例，中度貧血30例，重度貧血6例；缺鐵性貧血共86例，其中輕度貧血46例，中度貧血32例，重度貧血8例。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法利用SPSS13.0軟件分析數(shù)據(jù):用Boxplot圖顯示RET-He在缺鐵性貧血和β-地中海貧血中的分布情況。各組RBC、MCV、RET#、RET-He的組間均數(shù)比較用方差分析,兩兩比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

圖1 β-地中海貧血、缺鐵性貧血、正常對(duì)照Ret-He的比較

2.1 β-地中海貧血、缺鐵性貧血與正常對(duì)照組之間RET-He比較Ret-He參數(shù)在β-地貧組與缺鐵性貧血組之間差異較小，而兩組與正常對(duì)照組比較，則差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見圖1。

2.2 RET-He在各組貧血程度分組中的分布情況根據(jù)貧血程度，Ret-He呈下降趨勢(shì)；在輕度和中度貧血中，β-地貧組較IDA組降低更為明顯，見圖2。

圖2 各組Ret-He均數(shù)的比較

2.3 各組RBC參數(shù)檢測(cè)結(jié)果級(jí)其相互比較結(jié)果各病例組與正常對(duì)照組相比，RBC各參數(shù)均有顯著性差異。在β-地中海貧血病人中，不同貧血程度的β-地中海貧血之間Ret-He差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；在缺鐵性貧血病人中，不同程度的缺鐵性貧血之間Ret-He的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；Ret-He在輕度及中度β-地中海貧血和缺鐵性貧血之間P＜0.01，有顯著性差異，見表1。

3 討論

表1 各組RBC相關(guān)參數(shù)的比較

缺鐵性貧血是由于鐵供應(yīng)或吸收不足而引起血紅蛋白合成量減少，β-地中海貧血是由于基因缺失導(dǎo)致β珠蛋白生成障礙，兩者均屬于小細(xì)胞低色素貧血。但兩者的治療及預(yù)后完全不同，故在臨床上鑒別診斷這兩種貧血顯得尤為重要。

β-地中海貧血臨床診斷依據(jù)主要是通過血紅蛋白電泳中可見胎兒血紅蛋白(HbF)或血紅蛋白A2(HbA2)增加，患者的血清鐵蛋白(SF)及轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度(TfS)、骨髓可染鐵均增多，聯(lián)合傳統(tǒng)的血細(xì)胞計(jì)數(shù)診斷為β-地中海貧血。傳統(tǒng)診斷鐵缺乏或缺鐵性貧血主要通過血常規(guī)和鐵代謝檢查，必要時(shí)行骨髓鐵染色檢查，骨髓小粒中可染鐵消失曾為診斷鐵缺乏的“金標(biāo)準(zhǔn)”[3]，但由于骨髓鐵染色檢查為侵入性檢查，患者依從性差。自20世紀(jì)70年代開始測(cè)定SF后，骨髓鐵染色已很少單獨(dú)用于診斷缺鐵[4]，一般IDA的診斷多基于低色素小紅細(xì)胞增多，并伴有SF、TfS降低和血清可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)增高[5]。然而，就疾病的篩查目的而言，上述這些檢查項(xiàng)目費(fèi)用較為昂貴，實(shí)際價(jià)值不如一些紅細(xì)胞指數(shù)。

網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量(Ret-He)是全自動(dòng)血液分析儀提供的一個(gè)新的報(bào)告參數(shù)。Ret-He小于25pg是診斷IDA的最佳界值[6]。在健康人群中，紅細(xì)胞血紅蛋白含量(Hb)和網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量(Ret-He)在紅細(xì)胞或網(wǎng)織紅細(xì)胞的整個(gè)生命周期中是恒定的，只有在某些可導(dǎo)致紅細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)成分丟失的疾病，Hb和Ret-He才會(huì)發(fā)生改變[7]。Ret-He、MCV、MCHC變異系數(shù)小，為0.18 %～1.6%,尤其以Ret-He最低，王建中等[8]發(fā)現(xiàn)，Ret-He不受機(jī)體急性時(shí)相反應(yīng)影響，不僅可用于鐵缺乏的診斷，且對(duì)慢性病貧血等功能性鐵缺乏以及合并其他系統(tǒng)疾患時(shí)鐵缺乏的診斷更有價(jià)值。由于紅細(xì)胞的壽命較長(zhǎng)(120d)，導(dǎo)致Hb減低較慢；網(wǎng)織紅細(xì)胞的壽命較短，僅為1～2d，故測(cè)定Ret-He更為敏感。有研究認(rèn)為[9]Ret-He與珠蛋白生成障礙性貧血的基因型相關(guān)，且Ret-He與HbA2含量明顯呈負(fù)相關(guān)。

本研究結(jié)果表明，Ret-He在β-地中海貧血和缺鐵性貧血之間有顯著性差異(P＜0.01)，而MCV在這兩者間的差異較Ret-He小。繼續(xù)研究比較，發(fā)現(xiàn)不同貧血程度之間Ret-He的差異程度不一樣。Ret-He在輕度及中度β-地中海貧血和輕度及中度缺鐵性貧血之間P＜0.01，有顯著性差異；而在重度β-地中海貧血和重度缺鐵性貧血之間P＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Ret-He病例組均減低[10]，輕度β-地中海貧血患者比輕度缺鐵性貧血患者減低更明顯，并且其在缺鐵性貧血患者不同貧血程度之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而β-地中海貧血患者不同貧血程度之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。輕度β-地中海貧血和輕度缺鐵性貧血的MCV均降低，且輕度β-地中海貧血減低更明顯。

在IDA患者中，如補(bǔ)鐵4周后Ret-He能穩(wěn)定升高且保持正常水平，臨床就可以考慮適當(dāng)減少補(bǔ)鐵劑量，避免補(bǔ)鐵過量。因此，利用Ret-He作為鐵劑治療前后療效的評(píng)價(jià)指標(biāo)比常規(guī)使用的方法更早期、更靈敏、特異性更高[11]。

Ret-He在機(jī)體中較SF、HbA2等指標(biāo)穩(wěn)定，可及時(shí)反映新生紅細(xì)胞血紅蛋白合成水平，是貧血診斷的一項(xiàng)早期、有價(jià)值的指標(biāo)，并可初步作為臨床上鑒別β-地中海貧血和缺鐵性貧血的導(dǎo)向指標(biāo)。

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Study of the changes of reticulocyte haemoglobin content in β-thalassemia and iron-deficiency anemia

ZENG Hua, ZHANG Zhixian,NI Lijia,et al.Department of Clinical Labortory,Sun Yat-sen Memorial Hospatal of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510120,China

Objective To study the changes of RET-He in β-thalassemia and iron-deficiency anemia.Methods Blood routine tests were detected by Sysmex XE-5000 in patients with iron-deficiency anemia,β-thalassemia and normal counterparts, RBC,MCV,Ret-He and other parameters were analyzed.Results Ret-He levels were different from each other among normal subjects,iron-deficiency anemia and β-thalassemia,Ret-He level in the mild β-thalassemia was significantly lower than that in mild iron-deficiency anemia(P＜0.01).Conclusion Ret-He may assist differential diagnosis of mild β-thalassemia and mild iron-deficiency anemia,and it decreases with the increased degree of anemia in patients with iron-deficiency anemia.

Reticulocyte hemoglobin content;Iron-deficiency anemia;Beta-thalassemia

R446.11+1,R556+.3,R556.6+1

A

1674-1129(2013)03-0205-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.03.002

曾華，女，1977年3月生，畢業(yè)于廣州醫(yī)學(xué)院，學(xué)士學(xué)位，主管技師,研究方向：免疫，分子診斷。