【摘 要】目的 分析2011年沈陽市肺結核細菌分離培養的情況及影響因素。方法 針對結核菌分離培養,從標本收集、實驗室操作、試劑培養基質控、實驗室設備設施及生物安全等方面進行分析。結果 通過對影響肺結核細菌分離培養因素的有效控制達到了培養陽性率大于90%,污染率小于5%的要求。結論 肺結核細菌分離培養的影響因素一是實驗室設備設施、試劑培養基質量等,二是人員的操作技術,業務素質,更為重要的是相應的操作規程、管理工作的嚴格執行。
【關鍵詞】結核;細菌培養;影響因素
結核病是危害人類健康的重要傳染病,我國是全球結核病高負擔國家之一[1]。肺結核病防控的關鍵主要是提高發現率和治愈率消滅傳染源。2011年沈陽市疾病預防控制中心開展了以提高發現率為目的的結核菌分離培養工作。選取了轄區內的5個結核病防治所承擔病例納入、病史采集、實驗室涂片和陽性痰標本上送市疾病預防控制中心等任務。市疾病預防控制中心承擔結核菌的分離培養工作。
1 材料和方法
1.1 對象
選取沈陽市13個區縣結核病防治所中的5個區做為監測點,沈陽市內和平區和沈河區2個區,于洪區、新民市和法庫縣3個郊區進行結核菌分離培養。根據2010年各個區實驗室涂片結果計算得出在2011年半年時間內這5個區理論上能夠完成每個區共計51例病例。累計培養初治病例38例,復治病例13例。
1.2 方法
5個區結核病防治所承擔病例納入、病史采集、實驗室涂片和陽性痰標本上送市疾病預防控制中心等任務。市疾病預防控制中心承擔結核菌的分離培養工作。納入病人的涂陽病例的痰標本全部保留,若三份痰標本均為涂片陽性,任選擇兩份進行培養;若三份痰標本涂片兩份陽性,一份陰性,選擇兩份陽性痰標本進行培養;若三份痰標本一份陽性,兩份陰性,選擇一份陽性和任選一份陰性進行培養。
2 結果
2.1 病例納入情況
2011年下半年從七月到十二月共完成了250例病例標本的采集,病例的采集各個月份相差不多,但主要集中在十月份及十一月份,分別為48例和53例。十二月份較少為31例,七月份和八月份同為39例,九月份為40例。
2.2 5個區各區每月病例納入情況
和平區4個月完成了51例病例的納入,沈河區和于洪區6個月完成了病例納入,法庫縣用了7個月,新民市在2012年2月份完成了要求病例的納入。
2.3 5個區結核菌分離培養結果
5個區中和平區的污染率最高8.33%(經調查是其存放標本的冰箱溫度太高,經改正后,污染減少),于洪區污染率為零,另外3個區污染率也控制在允許范圍之內。
2.4 影響因素
結核菌分離培養的影響因素的研究主要包括以下幾個方面:痰涂片陽性標本的收集,保存及運輸;培養基的質量保證;操作的規范性;實驗室的設備設施;生物安全防護等。區(縣)結核病防治所承擔的工作是該項目的首要環節,項目能夠順利開展的第一步。
人員方面:承擔結核菌分離培養的實驗室人員要參加過相關的培訓并且從事過細菌或病毒的分離培養工作,如果以往從事過結核菌的培養將對工作更加有利。承擔該工作的人員要身體健康,項目開展前要進行一次全面的體檢。另外,該人員心理要有一定的承受能力,要不怕臟(痰標本多數為膿痰、干酪樣痰),不怕危險(做結核菌培養工作就有被感染的可能性,本項目沈陽市需要做255名患者,接種1020管培養基,陽性率不低于90%),同時要有耐心(標本送來后要立即培養,每份標本要定期觀察,陰性標本要培養至少2個月)。
用于細菌分離培養的試劑主要是4%的氫氧化鈉,培養基為貝索公司購買的酸性羅氏培養基。溫箱、冰箱、生物安全柜的設備均達到項目的要求。按照標準的操作規程進行分離培養。為保證項目的完成質量省、市、區(縣)要及時溝通發現問題盡快解決。
3 討論
結核菌耐藥情況的調查研究對提高結核病人的治療以及結核病的防控有著非常重要的作用。能夠從涂陽患者痰標本中分離出結核菌是開展該項目的關鍵,本文僅僅從影響結核菌細菌分離培養的相關因素進行研究來保證分離的陽性率和降低污染率,從而保證該項目能夠順利完成。達到了分離率不低于90%,污染率小于5%的要求。
通過研究我們發現,該項目的結核菌分離培養的影響因素既有同其他細菌分離檢測的相同影響因素,又有其不同之處。從分離高致病性細菌來說,它與從事布魯氏菌、炭疽芽孢桿菌的分離培養一樣都需要二級以上的生物安全防護及相應的設備設施,需要操作人員具有相應的專業知識及實踐經驗,需要按照要求進行標本采集、保存、運輸,對試劑、培養基進行質量控制保證以及按照標準的操作程序進行操作。而不同其他的細菌分離培養之處是,該項目涉及到省、市、區(縣)3個部門,3個部分分工不同,每個部分的工作出現失誤整個項目就將失敗。因此,相應的管理工作顯得尤為重要,省里在項目實施前做了相應的項目實施方案及細則,我們市里在此基礎上又制定了我們的相關的操作規程并且也給區(縣)提出了具體的要求。而最為重要的工作就是能夠把省、市提出的要求各個部門嚴格執行,保證執行的質量一是靠各級人員的業務素質,更重要的是要靠從省到市到區(縣)的業務督導,區(縣)到市到省的工作反饋這一動態的溝通管理工作。
參考文獻
[1] 閆蓓,蔡鳳珠,白云,孫喬.上海市蒲東新區第五輪中國全球基金流動人口結核病防治項目實施2年效果分析[J].中國防癆雜志,2011,33(3):137—140.