人類X射線交錯互補修復基因1 Arg399Gln位點多態性與胃癌易患性病例對照研究的Meta分析

王曉龍，張成武，劉 寧，馬曉明

胃癌在全球發病率居第4位，病死率居第2位。中國每年新發胃癌病例數高達463 000例，占全球發病人數的46.8%；中國每年胃癌病死例數高達352 000例，占全球胃癌病死人數的47.8%[1]。胃癌的發病率具有明顯的地域差異，中國、日本和韓國為胃癌的高發地區，約占全球胃癌患病人數的2/3，這可能與不同地區胃癌的致癌因素不同有關[2]。目前，多數學者認為胃癌的發生、發展是環境與基因交互作用的結果，其發生發展主要與癌基因的激活、抑癌基因的失活以及DNA修復基因的突變相關[3]。DNA損傷修復系統維持著基因組的穩定性，一旦相關修復基因發生突變，就可能導致整個基因組DNA修復能力下降，引起細胞增殖和分化失控，從而增加了腫瘤的易患性[4]。人類X射線交錯互補修復基因1(X-ray repair cross complementing gene 1，XRCC1)是第一個分離到的影響細胞對電離輻射敏感性的哺乳動物基因，廣泛參與DNA損傷的修復[5]。目前研究發現XRCC1存在3個多態性位點，即第6外顯子上的C26304T(Arg194Trp)、第9外顯子上的G27466A(Arg280His)和第10外顯子上的G28152A(Arg399Gln)[6]。Shen等[7]首次進行了XRCC1 Arg399Gln位點多態性與胃癌易患性的研究，此后陸續有學者報道二者之間的關聯性，但研究結果不一致，加之單個研究樣本量小，檢驗效能不足，因此有必要采用Meta分析的方法對其進行定量分析，為基礎研究提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 納入標準和排除標準 納入標準：(1)研究類型為病例對照研究；(2)研究對象：①病理學檢查確診的胃癌患者(病例組)和健康者(對照組)；②關于XRCC1多態性與胃癌易患性的病例對照研究；③有XRCC1多態性的分布頻數；④有各基因型與胃癌發病風險的比值比(odd ratio，OR)；⑤在對照組人群中，基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(HWE)。

排除標準：重復報告；XRCC1多態性的分布頻數數據描述不清；在對照組人群中，基因型分布不符合HWE。

1.2 檢索策略 檢索PubMed、Embase、中國生物醫學文獻數據庫(CBM)、中文科技期刊全文數據庫(VIP)、中國期刊全文數據庫(CNKI)、萬方數據庫關于XRCC1多態性與胃癌易患性的病例對照研究，檢索日期均從開始建庫到2012年10月，追查已納入文獻和相關綜述的參考文獻。英文檢索詞為XRCC1、polymorphism和gastric cancer；中文檢索詞為人類X射線交錯互補修復基因1、基因多態性和胃癌。手工檢索相關領域的雜志、會議論文集、學位論文匯編、科技報告等。

1.3 資料提取 由兩位研究者獨立閱讀納入文獻的題目、摘要，排除明顯不符合納入標準和排除標準的文獻。對可能符合納入標準和排除標準的文獻，通過閱讀全文來確定。兩位研究者交叉核對，對于難以確定是否納入的文獻，通過討論解決分歧。

1.4 統計學方法 采用STATA軟件進行統計檢驗。以OR及95%CI為效應量來評價XRCC1多態性與胃癌易患性的關系。采用χ2檢驗對納入的研究進行異質性檢驗，當納入文獻間無統計學異質性時(I2<50%，P>0.10)，采用固定效應模型；而當納入文獻間有統計學異質性時，采用隨機效應模型。可根據異質性的來源進行亞組分析或是敏感性分析，若臨床異質性過大，則采用描述性分析。必要時采用敏感性分析檢驗Meta分析結果的穩定性(根據各研究中顯性模型下AA+AG基因型及GG基因型的數據，用依次減少1篇文獻的方法來進行OR值的合并，以驗證Meta分析結果的穩定性)。根據確定的Meta分析模型，分別在各種基因模型下對各研究進行Meta分析，同時根據納入研究的種族來源進行亞組分析。合并OR值的統計學檢驗采用Z檢驗。采用漏斗圖評估納入文獻的發表偏倚，使用Egger線性回歸的方法進行發表偏倚的檢驗。

2 結果

2.1 納入文獻的一般特征 初檢獲得232篇文獻，最終12篇文獻[7-18]納入Meta分析(見圖1)。其中7篇文獻[7，11-14，16-17]來自中國，2篇文獻[15，18]來自意大利，剩余3篇文獻分別來自韓國[8]、巴西[9]和波蘭[10]。納入的文獻均為病例對照試驗，其中病例組共納入胃癌患者2 701例，對照組共納入健康人群4 210例。納入文獻的一般情況見表1。

2.2 Meta分析結果 異質性檢驗顯示，關于XRCC1 Arg399Gln位點雜合子模型(AA與GA)與胃癌易患性的各研究間無異質性(I2=0，P=0.630，見圖2)，采用固定效應模型進行分析，合并OR值及其95%CI為0.98(0.88，1.08)。而關于XRCC1 Arg399Gln位點純合子模型(AA與GG)、雜合子模型(GA與GG)與胃癌易患性的各研究間存在異質性(I2=52.2%，P=0.018，見圖3；I2=59.4%，P=0.004，見圖4)，采用隨機效應模型，合并OR值及其95%CI分別為0.75(0.54，1.05)、0.78(0.54，1.12)。關于XRCC1 Arg399Gln位點顯性模型(AA+GA與GG)與胃癌易患性的各研究間存在異質性(I2=57.1%，P=0.007，見圖5)，采用隨機效應模型，合并OR值及其95%CI為0.74(0.53，1.05)。而關于XRCC1 Arg399Gln位點隱性模型(GG+GA與AA)與胃癌易患性的各研究間無異質性(I2=0，P=0.755，見圖6)，采用固定效應模型，合并OR值及其95%CI為1.05(0.95，1.16)。提示在各種模型下，XRCC1 Arg399Gln位點多態性與胃癌的易患性無關聯。

按照種族的不同進行亞組分析，雜合子模型(AA與GA)中，亞洲、南美洲、歐洲人群合并OR值及其95%CI分別為0.99(0.87，1.11)、1.02(0.52，2.00)、0.95(0.77，1.17)(見圖2)；純合子模型(AA與GG)中，亞洲、南美洲、歐洲人群合并OR值及其95%CI分別為0.62(0.37，1.03)、3.23(0.13，79.99)、0.96(0.69，1.34)(見圖3)；雜合子模型(GA與GG)中，亞洲、南美洲、歐洲人群合并OR值及其95%CI分別為0.66(0.38，1.14)、3.15(0.12，82.16)、1.01(0.72，1.39)(見圖4)。顯性模型(AA+GA與GG)中，亞洲、南美洲、歐洲人群合并OR值及其95%CI分別為0.62(0.37，1.03)、3.22(0.13，79.68)、0.98(0.72，1.34)(見圖5)；隱形模型(GG+GA與AA)中，亞洲、南美洲、歐洲人群合并OR值及其95%CI分別為1.05(0.94，1.18)、0.93(0.48，1.80)、1.05(0.86，1.28)(見圖6)。提示即使種族不同，XRCC1 Arg399Gln位點的多態性與胃癌的易患性亦無關聯。

表1 12篇納入文獻的一般特征

注：PCR-RFLP=限制性片段長度多態性聚合酶鏈反應技術，MALDI-TOF MS=基質輔助激光解析電離飛行時間質譜，DHPLC=變性高效液相色譜分析

圖1 納入文獻篩選流程圖

圖2 AA與GA相比胃癌易患性的Meta分析

Figure2 Meta-analysis of the relationship between XRCC1 Arg399Gln polymorphism(AA versus GA) and gastric cancer susceptibility

圖3 AA與GG相比胃癌易患性的Meta分析

Figure3 Meta-analysis of the relationship between gastric cancer susceptibility and XRCC1 Arg399Gln polymorphism(AA versus GG)

2.3 發表偏倚 在顯性模型下，AA+GA基因型相對于GG基因型的文獻發表偏倚漏斗圖見圖7，可以看出漏斗圖存在不對稱；Egger檢驗顯示t=2.2，P=0.05，加之納入文獻多來自亞洲國家，提示存在發表偏倚的可能。

3 討論

DNA修復基因XRCC1定位于人類19號染色體長臂19q13.2，參與DNA損傷的堿基切除修復[19]，在修復DNA單鏈斷裂、保持細胞基因組的完整和穩定中起重要作用。其Arg399Gln位點多態性可以改變蛋白產物的DNA修復效能[20]。Arg399Gln對XRCC1蛋白活性的影響，可以表現為個體DNA損傷后修復能力的差異，進而改變對某些腫瘤發生的遺傳易患性[14]。已有研究提示XRCC1多態性可能與肺癌、乳腺癌、胃癌等多種腫瘤的易患性增高相關[21-23]，XRCC1 Arg399Gln位點的多態性是否增加胃癌的易患性尚無定論。因此，本研究采用Meta分析的方法定量評價兩者之間是否存在關聯。

圖4 GA與GG相比胃癌易患性的Meta分析

Figure4 Meta-analysis of the relationship between gastric cancer susceptibility and XRCC1 Arg399Gln polymorphism(GA versus GG)

圖5 AA+GA與GG相比胃癌易患性的顯性模型的Meta分析

Figure5 Meta-analysis of the relationship between XRCC1 Arg399Gln polymorphism(AA+GA versus GG) using dominant model and gastric cancer susceptibilityl

Shen等[7]首次探討了XRCC1多態性與中國人群胃癌易患性的關系，該研究共納入188例中國江蘇籍胃癌患者和166例非胃癌患者，結果顯示攜帶G等位基因的個體與A/A基因型個體相比，胃癌易患性有所升高〔OR=1.35，95%CI(0.98，2.39)〕，但差異無統計學意義。韓國Lee等[8]以病例對照的形式探討了XRCC1多態性與胃癌發病率之間的關聯，結果表明XRCC1第194、280、399位點的多態性可能與胃癌的易患性存在關聯；且單倍型A(194Trp、280Arg、399Arg)使胃癌的易患性降低〔OR=0.65，95%CI(0.43，0.99)〕，但單倍型D(194Arg、280Arg、399Arg)與胃癌的易患性無關聯〔OR=1.57，95%CI(0.93，2.65)〕，該研究結果也提示用單倍型分析可能更有利于評價XRCC1多態性與胃癌易患性的關系[8]。

圖6 GG+GA與AA相比胃癌易患性隱性模型的Meta分析

Figure6 Meta-analysis of the relationship between XRCC1 Arg399Gln polymorphism(GG+GA versus AA) using recessive model and gastric cancer susceptibility

圖7 漏斗圖

本研究Meta分析結果顯示，無論是隱性模型還是顯性模型，XRCC1 Arg399Gln位點的多態性與胃癌的易患性無關聯；亞組分析結果也提示在不同種族間兩者亦無關聯。現有研究表明胃癌的發生發展是環境因素和遺傳因素共同作用的結果，暴露于同一環境的人群，胃癌的發病率存在差異，提示遺傳因素與胃癌的易患性關系密切，不同地區人群所暴露的致癌因素不同將涉及不同的DNA修復途徑[24]。XRCC1 Arg399Gln位點的多態性與胃癌的易患性在不同人群中的研究結論不一致的原因，可能與不同地區人群的遺傳背景、飲食習慣、生活方式以及接觸致癌物質的差異有關[7-8]。另一種解釋就是胃癌的發病可能與多種基因的多態性以及多種基因與環境的交互作用相關[25]。本研究納入12篇文獻，樣本量達6 911例，研究結論較為可靠。但納入文獻多數來自亞洲，提示存在發表偏倚的可能。因此，本研究尚需來自其他地區和國家高質量大樣本的病例對照試驗進一步去證實。此外，本研究納入的文獻均為病例對照試驗，該類研究目前尚無公認的方法學質量評價方法，因此本研究未對納入的文獻質量進行評價。

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