宮曉 程增青 李陸梅等
摘要:介紹了雞新城疫病的流行情況及疫苗的應用現狀,概述了滅活疫苗、活疫苗及基因工程苗等主要的雞新城疫疫苗研究及應用現狀,旨為雞新城疫疫苗的研制和應用提供一定的參考依據。
關鍵詞:新城疫;疫苗;研制;應用
中圖分類號:S858.31 文獻標識碼:B 文章編號:1007-273X(2013)09-0065-02
1 新城疫流行情況及疫苗應用現狀
雞新城疫又叫亞洲雞瘟。它是一種由副粘病毒引起的高度接觸性、急性敗血性傳染病。主要感染禽,也可感染人類。該病流行于很多國家,給世界養殖業造成很大的威脅,被世界衛生組織定為A類疫病[1]。新城疫自1926年被確認以來,在世界范圍內廣為傳播已有80多年,給養禽業帶來了巨大的經濟損失,迄今仍是禽類最重要的疾病之一。新城疫病毒自1946年在我國首次分離至今已在中國存在了60多年,自20世紀90年代以來,臨床上非典型新城疫的發生現象十分普遍,在鵝群及鴨群中均有發生[2-4],說明新城疫的易感宿主范圍在進一步擴大。由于疫苗的廣泛應用,目前的NDV流行株基因型已發生較大改變,流行病學調查充分顯示,基因Ⅶd亞型在我國當前NDV流行株中占有絕對優勢,與經典疫苗Lasota 株(基因Ⅱ型)核苷酸同源性不足78%。揚州大學[5]、中國動物疫病流行中心[6,7]、山東農科院家禽所[8]等在流行病學調查中均顯示我國近幾年基因Ⅶ型NDV流行十分普遍。目前國內外企業生產的新城疫疫苗毒株有10余株,其中Lasota毒株制備的活疫苗、滅活疫苗占據優勢地位。
2 疫苗種類
2.1 滅活疫苗
目前預防雞新城疫的滅活疫苗使用較多的為油乳劑滅活疫苗,國內生物制品廠家多用Lasota株,梅里亞用Ulster2c株、英特威用Clone-30株制備疫苗。評價疫苗質量的主要因素在于毒株的免疫原性及病毒含量的高低。目前,疫苗效力均已達到國際上要求的滅活苗標準,可用于不同日齡的雞,主要通過頸部皮下及肌肉注射途徑免疫。
2.2 活疫苗
目前新城疫弱毒活疫苗有I系、Ⅱ系、Ⅳ系、Clone-30、CS2、VG/GA、HB1、Mukteswar、ZM10、N79、F、Ulsterzc、V4/HB92克隆株、VH株等幾種。
2.2.1 I系苗 為中等毒力,主要由Mukteswar株制備,對雛雞有一定的致病性。60日齡以上雞才可以用。用法為肌肉注射,不能點眼、滴鼻或飲水,接種后產生免疫力很快,7~10 d抗體水平上升到高峰,隨后緩慢下降。同低毒力疫苗相比,免疫期較長。I系苗不能用于產蛋雞,否則可引起產蛋量大幅下降,蛋殼變劣,且恢復緩慢。
2.2.2 CS株 為中等毒力,免疫效果與普通I系苗相似但毒力稍溫和,安全性較優。雞群1月齡以上才可使用,且此前至少接種過1次新城疫低毒力苗,不能用于初生雛雞;產蛋雞不宜接種;在有成雞和雛雞的雞場,應注意消毒隔離,避免苗毒的傳播引起雛雞死亡。接種方法只能肌肉注射。
2.2.3 Ⅱ系苗 毒力弱,通常只用于雛雞首免,安全性好,但產生免疫力較慢較弱。用法為點眼、滴鼻,不能飲水。
2.2.4 Ⅳ系苗(Lasota株) 是國內外廣泛應用的優良低毒力苗,其毒力與免疫性能高于Ⅱ系苗,安全性良好。7日齡以上的健康雛雞、青年雞、產蛋雞均可使用。用法可滴眼、滴鼻、飲水或肌肉注射,雛雞首免可點眼、滴鼻。
2.2.5 Clone-30株 該疫苗最早是荷蘭研制者應用克隆技術,由Lasota株優化制成。其免疫效果與Ⅳ系苗相似而毒力較溫和,能突破母源抗體障礙,從1日齡雛雞至成年雞均可使用。用法可點眼、滴鼻、飲水或肌注,雛雞首免可點眼、滴鼻。
2.2.6 N79株 是美國應用克隆技術對Ⅳ系苗加以優化而制成,滴鼻、點眼、飲水免疫均可。
2.2.7 VH株 是以色列用新城疫病毒自然弱毒株制成的一種低毒力苗,毒力溫和而穩定,主要用于雛雞首免。通常應用的是該毒與傳支制成的聯苗,如VH+H120+28/86,用法可點眼、滴鼻。
2.2.8 其他新城疫低毒力苗 有法國的“衛雞城”活疫苗與VG/GA株活疫苗、ZM10株活疫苗、V4/HB92克隆株活疫苗、HB1株活疫苗、F株活疫苗等,其主要優點是免疫原性好而毒力溫和,呼吸道反應輕微,可飲水、點眼、滴鼻。
2.3 基因工程苗
隨著分子生物學及重組DNA技術的發展,基因工程疫苗的研究不斷深入,傳統的全病毒疫苗存在諸多缺陷,利用基因工程技術開發疫苗是目前疫苗研究的熱點,但商品化的產品較少。國內外一些實驗室從20世紀80年代末開始利用重組DNA技術研制ND基因工程疫苗。目前,ND基因工程苗主要有DNA疫苗、亞單位苗、活載體疫苗、多肽苗和轉基因植物疫苗等幾種。
2.3.1 亞單位苗 是將NDV保護性抗原基因在原核或真核系統中表達所獲得的產品制成的疫苗,具有安全性高,穩定性好,便于保存運輸,易于批量生產的優點。有研究利用相同系統表達的NDV長春株的HN蛋白作為亞單位疫苗,雛雞可抵抗NDV強毒攻擊,并可獲得100%的保護。揚州大學[9]利用反向遺傳操作構建的基因Ⅶ型疫苗為經過改造的Ⅶ型毒株與大多數流行株一致,為基因Ⅶd亞型,可有效降低喉氣管和泄殖腔中的排毒率,對鵝、鴨等水禽具有更好的免疫效果,比經典疫苗Lasota株產生更高的抗體。
2.3.2 DNA 疫苗 具有能夠激發機體體液免疫和細胞免疫反應、不散毒、便于儲存和運輸等優點。DNA疫苗不僅可誘導體液免疫應答,而且還可誘導細胞免疫應答,并兼有亞單位苗的安全性和弱毒疫苗的高效性,已經成為國際疫苗研究領域最熱門的課題之一。2005年底農業部宣布,中國已成功研制出禽流感-新城疫重組二聯活疫苗,并正式批準生產。
2.4 聯苗
新城疫在我國主要養殖區域流行相當普遍,尤其與其他疾病混合感染的情況也很常見,因此在進行新城疫疫苗免疫的同時還要對其他禽病進行疫苗免疫。為了減少對雞的免疫次數和應激,多采用聯苗來防治雞的各種疾病。國內外新城疫聯苗正處于研制及推廣應用階段,已顯示出其打一針可防數病的優越性。國內滅活疫苗產品有新支二聯、新流二聯、新法二聯、新病二聯、新支減三聯、新支流三聯、新支法三聯、新流法三聯、新支法關四聯、新支流法四聯等相關產品,活疫苗有新支二聯等,市場應用效果較好。
3 應用展望
從以上介紹來看,滅活疫苗接種劑量較大,接種后通常需2~3周后才能產生免疫力,不能用作緊急預防免疫?;钜呙缒艽碳ぎa生局部免疫,免疫后很快得到保護。亞單位疫苗雖然安全性高,穩定性好,便于保存運輸,易于批量生產,但是市場應用效果一般,故目前市場仍然采用活疫苗加滅活苗的免疫程序進行雞新城疫的預防。
據市場跟蹤調查,新城疫活疫苗每個月用一次,滅活苗2~3個月免疫一次,使用頻率如此之高,但新城疫病毒仍不能得到有效控制,有研究者提出,雞新城疫雖然只有一個血清型,但由于疫苗株與當前流行株之間的基因型和抗原差異性,免疫雞群中也會不同程度地感染強毒,目前常用新城疫疫苗毒株與當前流行毒株基因型不匹配,免疫保護力不足。新城疫新型疫苗對控制我國新城疫病毒流行有著非常廣闊的應用前景,并且實驗室的數據表明,使用與流行株同型的基因Ⅶ型疫苗可以有效降低免疫雞群中新城疫強毒的攜帶量及感染率。秦卓明等[10]對國內大量新城疫病毒(NDV)血凝素基因F和HN的測序表明,NDV主要免疫原HN和F基因與生產中廣泛應用的經典疫苗Lasota 株的核苷酸同源性不足80%,而NDV流行株之間的同源性則高達94.4%~100%,從分子遺傳學角度證實了VIId型NDV是導致新城疫免疫失敗的重要原因。HI交叉抑制試驗和雞胚中和試驗等則從抗原性的角度證實了NDV在免疫壓力下抗原性的變化。
新城疫目前沒有特效藥物及疫苗,只能以預防為主,根據當地的發病特點、流行趨勢和規律,用高質量的疫苗,科學的免疫程序,加強飼養管理與隔離消毒,才是防治ND的關鍵。因而篩選出優質高效的VIId型NDV毒株制備滅活疫苗或者活疫苗,有可能在今后的生產上替代現有的疫苗,而被廣泛使用。參考文獻:
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