間皮素、D2－40和Glypican3在卵巢腫瘤中的鑒別診斷意義

印永祥，趙 華，龔 華

（南京醫科大學附屬無錫市婦幼保健院 病理科，江蘇 無錫214002）

卵巢癌是第三大婦科惡性腫瘤，卵巢透明細胞癌臨床較少見，約占卵巢上皮性惡性腫瘤的5%－10%，但在婦科病理鑒別診斷中卻占有相當比例。與卵巢透明細胞癌相關的鑒別診斷包括原始生殖細胞腫瘤（特別是卵黃囊瘤和無性細胞瘤）及卵巢漿液性囊腺癌，卵巢癌的分類不同與預后及臨床處理大不相同，需要更加客觀的指標用來鑒別卵巢癌。本文的目的旨在 mesothelin、D2－40、Glypican3在卵巢癌診斷和鑒別診斷中的作用加以探討。

1 材料與方法

1.1材料選取無錫市婦幼保健醫院2003～2011年以國際FIGO診斷標準診斷的卵巢漿液性囊腺癌12例，卵巢透明細胞癌10例，卵巢卵黃囊瘤10例和卵巢無性細胞瘤10例。所有病例均未行放、化療。

1.2方法鼠抗人間皮素mesothelin單克隆抗體購置epitomics公司（1：2000，克隆號EPR2685），即用型鼠抗人D2－40單克隆抗體（克隆號D2－40）、即用型鼠抗人磷脂酰肌醇聚糖Glypican3單克隆抗體（克隆號1G12）購置福州邁新生物技術有限公司。全部標本均經10%中性福爾馬林固定，行常規石蠟包埋，4微米連續切片，染色按MaxVisionTM2試劑盒說明書操作。以抗體稀釋液替代一抗作為陰性對照，以公司提供的陽性片作為陽性對照。

1.3結果判定在雙肓下進行。間皮素和D2－40在細胞膜上著色，Glypican3在細胞質上著色。

2 結果

間皮素在卵巢漿液性囊腺癌中全都是彌漫陽性，透明細胞癌中陽性比例達90%，在卵黃囊瘤和無性細胞瘤呈陰性表達。D2－40在無性細胞瘤上彌漫陽性率90%，在卵巢漿液性囊腺癌中有20%的局灶陽性，在透明細胞癌和卵黃囊瘤呈陰性表達。Glypican3在卵黃囊瘤上90%呈彌漫表達，10%局灶表達，呈100%陽性；在透明細胞癌上50%的彌漫陽性，20%的局灶陽性；在卵巢漿液性囊腺癌和無性細胞瘤上呈陰性表達。見表1。

3 討論

卵巢透明細胞癌一種較常見的婦科腫瘤，具有早期轉移、早期復發、對化療藥物易耐藥、預后差的特點［1］。間皮素是卵巢上皮性癌的新的篩查標記物和預后分子［2］。間皮素是一種細胞表面糖蛋白，通常僅表達在胸膜腔、腹膜腔和心包腔的間皮細胞。間皮素是一種分化抗原，近年來發現在惡性胸膜間皮瘤、胰腺癌和卵巢癌等惡性腫瘤中過表達，并可能參與腫瘤的黏附轉移，與卵巢癌細胞在腹腔內的種植轉移有關［3］。間皮素表達與卵巢癌病理分期、分級相關，說明間皮素可能通過增強細胞黏附來促進腫瘤細胞種植在腹膜上，導致腫瘤擴散。測定間皮素的量可以幫助判斷卵巢癌的預后［4］和指導進行靶向治療。間皮素和人類附睪蛋白HE4作為卵巢癌的生物標記，最近有人報道與間皮素相比，CA125和HE4結合具有更高的敏感性檢測卵巢癌和早期卵巢癌［5］。透明細胞癌需與漿液性癌進行鑒別，我們的研究發現，間皮素在卵巢漿液性囊腺癌中100%彌漫陽性；透明細胞癌顯示80%局灶陽性，10%彌漫陽性；在區別卵巢漿液性癌與透明細胞癌中有明顯的鑒別意義。最近研究發現在間皮素在14例卵巢漿液性囊腺癌全陽性，8例透明細胞癌中有6例陽性，3例子宮內膜樣癌全陽性，4例移行細胞癌全陽性［6］，與本文研究相符。

表1 mesothelin、D2－40、Glypican3在卵巢癌上的表達

圖1 間皮素、Glypican3和D2－40在卵巢癌上的表達

卵巢透明細胞癌（CCCs）是最常與原發性生殖細胞腫瘤相混淆的卵巢表面上皮性腫瘤，其診斷有時較困難。無性細胞癌和卵黃囊瘤中可出現透明細胞成分，卵巢透明細胞癌還需與無性細胞癌和惡性卵黃囊瘤鑒別。D2－40表達于淋巴管內皮細胞，而不表達血管內皮細胞，通常用于標記組織中的淋巴管內皮，有助于淋巴管內皮細胞源性腫瘤診斷及判斷其他腫瘤組織是否發生淋巴道浸潤和轉移。D2－40是高敏感性無性細胞瘤免疫組化標記物，在無性細胞瘤診斷和卵巢原始生殖細胞腫瘤的鑒別診斷［7］中很有幫助。我們的研究同樣發現，D2－40在無性細胞瘤中90%彌漫陽性，在卵黃囊瘤不表達；Glypican3在卵黃囊瘤90%彌漫陽性、10%局灶陽性。卵黃囊瘤最重要的IHC表達是AFP陽性表達，75%以上的腫瘤細胞質陽性；透明細胞癌CD15陽性，AFP陰性，可與卵黃囊瘤相區別［8］。但我們在實際工作中發現AFP在卵黃囊中表達并不理想，卵黃囊瘤細胞能與Glypican3蛋白產生免疫反應。

Glypican3蛋白是一種硫酸肝素糖蛋白和癌胚抗原。我們的數據表明Glypican3在透明細胞癌上50%的彌漫陽性，20%的局灶陽性。同樣文獻報道，Stadlmannn等［9］對308名卵巢癌患者的腫瘤組織進行檢測，發現其中18% 的腫瘤組織表達Glypican3，超過60% 的卵巢透明細胞癌表達Glypican3，以上結果提示，Glypican3可能成為卵巢透明細胞癌的腫瘤標志物。但也有相反的報道，在大部分卵巢透明細胞癌中檢測發現Glypican3表達陰性［10］。最近報道Glypican3還與Ⅰ期透明細胞癌的預后密切相關，Glypican3表達陽性的患者預后差，且傾向于對紫杉類藥物耐藥［11］在手術病理學檢查中，區別卵黃囊瘤和卵巢透明細胞腺癌組織比較困難，發現Glypican 3在卵黃囊瘤中彌漫性陽性率為100%，而在卵巢透明細胞腺癌中彌漫性陽性率只有10%，有望成為有效的鑒別診斷標志［12］。

過去認為卵巢透明細胞癌和卵黃囊瘤均來自于中腎，SCULLY發現與子宮內膜異位相關，提示透明細胞癌來自于卵巢表面上皮。現其Mullerian性質已經被廣泛接受，但在某些病例中，仍存在鑒別診斷問題，因這些腫瘤組織組織學表現有一定程度的重疊。知曉患者年齡、臨床情況及血清AFP水平有助于鑒別。一般而言，P53在透明細胞癌中可陰性表達，也有偶有表達，其強度及范圍要比漿液性癌弱。WT1與P53相似。故P53和WT1胞核彌漫性強陽性可支持漿液性癌診斷［8］。除了免疫組化指標有助于鑒別診斷，還可能通過臨床表現、年齡等指標輔助診斷。無性細胞瘤一般發生于年輕人。而透明細胞癌一般發生于老年人。

我們首先發現間皮素免疫組化染色有助于卵巢腫瘤的診斷，間皮素在卵巢漿液性囊腺癌中彌漫性高表達，在卵巢透明細胞癌中局灶表達，D2－40在無性細胞瘤中表達的敏感性高，Glypican3在卵黃囊瘤中高表達。當卵巢腫瘤組織學難以區分時，在卵巢癌的疑難診斷上，通過這三種抗體能對卵巢漿液性囊腺癌、透明細胞癌、無性細胞瘤和卵黃囊瘤相鑒別。當然，當免疫標記物與組織學相左時，還是以組織HE為主。

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