【摘要】目的 探討臨床上遇到的高效價冷凝集素致血型鑒定和交叉配血困難的結果分析。方法 通過臨床病例分析、紅細胞ABO血型鑒定、復查血型、冷凝集素效價測定等血型血清學檢測來尋找配血困難原因。結果 在ABO血型鑒定和交叉配血試驗中,獻血者和受血者血液中的高效價冷凝集素是引起意外凝集的常見原因,將會給臨床血庫造成血型判定錯誤,且干擾交叉配血。結論 高效價冷凝集素所致的配血不舍,應從不同角度思考選擇有價值的鑒別試驗,如復核血型、自身抗體吸收試驗、聚集胺法交叉配血試驗等多方面排除、鑒定。
【關鍵詞】冷凝集素;血型鑒定;交叉配血;血清學試驗
1 病例摘要
患者,女,57歲,既往無輸血史,有慢性肝炎病史,該患者皮膚粘膜蒼白,呈重度貧血貌,因疲乏無力入住我院,實驗室檢查Hb32g/L、RBC1.75×1012/L、WBC3.9×109/L,血型鑒定為“AB”型,臨床申請輸同型紅細胞懸液2u,但與AB型交叉配血不合。
2 血清學檢查
2.1試劑
抗A、抗B血型定型試劑(長址:南京欣迪生物藥業工程有限責任公司,批號20120602)
A型、B型標準紅細胞(由本科室自制),凝聚胺試劑盒。
2.2方法及結果
2.2.1ABO定型
重新血型鑒定,取干燥潔凈試管3只,分別滴加抗A、抗B、抗AB血清各2滴,再分別加入患者5%紅細胞鹽水懸液2滴,混勻;另取干燥潔凈試管3只,分別滴加患者血清2滴,再分別加入標準A、B、O型5%紅細胞懸液2滴,混勻;再取潔凈試管1只,分別加入患者血清及其5%紅細胞鹽水懸液各2滴,混勻。立即以1000r/min離心1分鐘,結果正定型為AB型;反定型ABO均凝集,正反定型不一致。將患者正反定型試管放置于37℃水浴箱中,10min后觀察可見,抗B側凝集顆粒消失、抗A側不變,取出置室溫1min后,抗B側復又出現凝集,初步定型為A型,RH(D)陽性。對患者紅細胞用37℃生理鹽水洗滌3次后進行實驗,做正定型為A型,將患者血清與自身洗滌紅細胞(37℃生理鹽水洗滌6次)等體積混合后置4℃冰箱30min迅速以冰水保護離心血清做反定型,也為A型,且在4℃、22℃、37℃時患者鹽水自凝效價有明顯差異,考慮可能為冷凝素所致。
2.2.2配血和輸血
用A型血按常規方法做鹽水配血試驗,主側管出現凝集、次側管無凝集、配血不合。此時,對患者紅細胞用37℃生理鹽水洗滌后配成5%的紅細胞鹽水懸液與A型血血清做次側交叉,無凝集及溶血;用經自家吸收后的血清與A型血紅細胞鹽水懸液做主側交叉,無凝集及溶血,并應用了凝聚胺法進行交叉,配血相合,均顯示可以輸血,考慮該患者冷凝集素效價太高,建議臨床保溫輸血,而且室溫控制在25~30℃。保溫緩慢輸注A型、RHD(+)紅細胞懸液1.5U,無不良反應,后按同樣方法二次相繼輸A型、RHD(+)紅細胞懸液4U及血漿200ml,患者均無不良反應。此患者經上級醫院診斷為肝硬化。
2.2.3血清冷凝集效價測定
將患者血清用生理鹽水進行倍比稀釋,然后加入本人紅細胞懸液,在不同溫度下進行測定。4℃時凝集效價為1:1024、22℃時凝集效價為1:32、37℃時凝集效價為1:2。
2.2.4吸收冷凝集素
用37℃生理鹽水洗滌患者紅細胞3次,然后用患者血清與以上洗滌后的壓積紅細胞等體積混合,置4℃冰箱60分鐘。
3 討論
健康人血清中含有少量低效價冷凝集素,效價一般在1:16以下,且在20℃時凝集即可消失。高效價冷凝集素是患者體內產生了抗自身紅細胞的嗜異性冷抗體,此抗體為IgM類,在體外4℃或室溫條件下可與自身紅細胞或ABO系統其它各個血型的RBC發生非特異性凝集反應,實驗結果表明,室溫時自身對照有凝集現象;37℃時自身對照無凝集現象;患者血清冷凝集效價在4℃、22℃、37℃時有明顯差異,提示患者血清中存在自身冷抗體。這種抗體在32℃以下(0~4℃)時活性最強,能與RBC結合,才會產生凝集現象,當溫度升高時凝集的RBC呈可逆性完全散開,可迅速從RBC表面解離,因此不引起非特異性凝集,但在某些病理情況下,如自身免疫性溶血性貧血、支原體和EB病毒感染、肝硬化及某些腫瘤等癥患者的血清中可出現高效價冷凝集素,導致我們在日常工作中定型和配血困難。遇到上述情況應注意(1)做血型時,先用37℃溫生理鹽水洗滌被檢紅細胞3~5次,可消除冷凝集素造成的定型錯誤。(2)交叉配血時,一定要結合臨床診斷綜合分析,做出正確處理。如次側管患者紅細胞應用37℃生理鹽水洗滌3~5次;主側管患者血清應該用吸收了冷凝集素的血清,以防冷凝集素造成的配血不合。(3)若冷凝集素效價過高,輸血時提高室溫25~30℃可以避免高效價冷凝集素引起的不良反應。